解放军总医院科技创新基金(06ZS03)
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
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- 软骨细胞外基质/壳聚糖复合多孔支架和骨髓间充质干细胞构建组织工程软骨被引量：11
- 2010年
- [目的]探讨软骨细胞外基质和壳聚糖制备复合多孔支架,同时并对小鼠骨髓间充质干细胞构建组织工程软骨的可行性进行观察。[方法]以猪关节软骨细胞外基质和壳聚糖为原料,采用冷冻干燥法制备软骨细胞外基质/壳聚糖复合多孔支架。通过扫描电镜观察材料内部结构及孔径大小,液体位移法测定材料的孔隙率,MTT方法检测支架浸提液毒性。将小鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离培养并用TGF-β1成软骨诱导后,与材料复合培养,扫描电镜观察细胞在材料上的生长粘附情况。[结果]软骨细胞外基质/壳聚糖复合支架具有疏松多孔结构,孔径大小(159±36)μm,孔隙率为90.5%±2.3%,复合支架中的软骨细胞外基质成分甲苯胺蓝染色、番红O染色均呈阳性,MTT结果显示支架无细胞毒性。诱导的骨髓间充质干细胞在支架表面生长良好。[结论]软骨细胞外基质/壳聚糖复合材料具有合适的孔径和孔隙率,生物相容性良好,是组织工程软骨的良好支架载体。
- 王玉彭江张莉陈继凤周晓涵黄靖香许文静郭全义卢世璧
- 关键词：壳聚糖软骨
- 可注射性组织工程软骨源性微载体的微观结构及其生物相容性观察被引量：6
- 2009年
- [目的]改进软骨源性微载体的制备方法。对其微观结构特征及其与骨髓间充质细胞的生物相容性进行观察,探索新的可注射性组织工程软骨的制备方法。[方法]将新鲜的猪关节软骨在液体中粉碎,梯度离心后制备成150～300μm的颗粒,去细胞处理后采用常规组织学方法观察软骨微粒的空间结构及化学组成,采用扫描电镜观察软骨源性微载体的形态特征,随后体外获取扩增骨髓间充质细胞,与软骨微粒复合,然后采用旋转式生物反应器扩增,构建可注射性组织工程软骨细胞。[结果]本研究制备的软骨微粒呈圆形或椭圆形,表面呈毛刷状结构,主要成分是Ⅱ型胶原和GAG,而毛刷的主要成份Ⅱ型胶原、骨髓间充质干细胞不仅与微载体结合良好,还能够在其表面大量扩增。[结论]与传统的微载体不同,软骨源性微载体与细胞复合后,不需要再将细胞消化,避免了软骨细胞外基质的损失,可以作为可注射性组织工程软骨的理想材料和方法。
- 卢强张莉彭江许瑞江黄靖香郭全义卢世璧
- 关键词：微载体软骨
- 壳聚糖和软骨细胞外基质复合组织工程骺软骨支架的性能观察被引量：3
- 2009年
- 背景:在组织工程骺软骨构建过程中,采用何种载体承载已经扩增了的软骨细胞越来越受到人们的关注。目的:探讨软骨细胞外基质与壳聚糖复合构建组织工程骺软骨支架的可行性并对其性能进行初步观察。设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-12/2009-03在解放军总医院骨科研究所完成。材料:壳聚糖(脱乙酰度90%,Mr10×105)由青岛海汇生物工程公司提供。市售猪关节软骨。方法:将新鲜的猪关节软骨在液体中粉碎,梯度离心后制备成3%软骨微丝悬液,将其按1︰1的比例与2%的壳聚糖溶液混合,采用冷冻冻干法制备脱细胞软骨基质三维多孔支架。主要观察指标:对梯度乙醇处理再次干燥后支架材料进行组织学及扫描电镜观察,测定支架孔径和孔隙率、吸水率,并采用MTT法分析支架浸提液毒性。分离培养兔骨髓间充质干细胞,用转化生长因子β1成软骨诱导后种植至支架,倒置显微镜、电镜观察细胞在支架上的生长、分化情况。结果:支架内孔洞相互连通,孔大小(161±31)μm,孔隙率为(90.1±1.6)%,吸水率为(2361±132)%。组织学观察显示,三维多孔支架甲苯胺蓝染色、番红O染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性。MTT法结果显示支架无细胞毒性。细胞在支架表面黏附良好,分布均匀,并有基质分泌。结论:制备的软骨细胞外基质和壳聚糖复合三维多孔支架结合良好,含有软骨细胞外基质主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,生物相容性良好。
- 卢强彭江黄靖香张莉郭全义卢世璧
- 关键词：软骨
