国家自然科学基金(30672012)
- 作品数：9 被引量：26H指数：4
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- 常染色体显性遗传性视网膜色素变性家系致病基因的定位研究
- 2011年
- 目的对1个常染色体显性遗传的视网膜色素变性家系进行致病基因定位，并对候选基因进行突变筛查。方法收集1个视网膜色素变性家系，对其成员进行系统的眼科检查。抽取家系成员外周血并提取DNA，用连锁分析方法定位家系的致病基因，对定位区域的候选基因进行突变筛查。结果两点连锁分析结果在微卫星标记DIS252处获得最大两点LOD值2．02（0—0．00时），多点连锁分析结果显示LOD值在DIS252处具有最大LOD值2．28。但直接测序在该区域的两个候选基因中均未发现突变。结论该家系致病基因定位于lp21．1-q23．3之间。两个候选基因PRPF3与SEMA4A可能并非该家系的致病基因，附近可能存在1个未知的致病基因。
- 丁锋周新袁媛严明郑芳
- 关键词：视网膜色素变性微卫星标记
- 载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病的关系被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨载脂蛋白E基因型与2型糖尿病的易感性。方法:应用multi-ARMS快速分型法对316例T2DM患者、512例健康对照人群的ApoE基因第4外显子112位Cys/Arg和158位Arg/Cys进行检测;随机抽取分型标本进行DNA测序法验证。结果:ε2/2、ε2/3、ε3/3、ε4/2、ε4/3、ε4/4基因型在二组中的频率分布为:0.6%,5.7%,72.8%,1.9%,14.9%,4.1%(T2DM组);0.6%,9.4%,70.1%,1.8%,17.0%,1.2%(对照组)。二组间差异有显著性统计学意义(χ2=11.45,P<0.05),T2DM组ε4/4基因型频率明显高于对照组(4.11%VS1.17%)。结论:ApoEε4/4基因型可能与T2DM的易感性有关。
- 熊燏周新刘松梅杨艳曲喜英谢焱胡汉宁庞志宇
- 关键词：2型糖尿病载脂蛋白E基因多态性胰岛素受体临床综合征电解质紊乱环境因素
- 用高效液相色谱法检测2型糖尿病患者血浆游离脂肪酸谱的分析研究被引量：5
- 2010年
- 目的 用高效液相色谱法分析T2DM患者血浆游离脂肪酸谱的变化.方法 收集武汉大学中南医院体检人群和住院患者,其中健康对照组94名、单纯T2DM组101例、T2DM合并高脂血症组77例.取受试者空腹静脉血,分离新鲜血浆,以正十七酸作为内标,以改良Doles法萃取游离脂肪酸,溴苯乙酮作为柱前衍化剂,采用Dionex Summit高效液相色谱法分析系统检测血浆游离脂肪酸谱,内标标准曲线法定量.结果 健康对照组、单纯T2DM组与T2DM合并高脂血症组3组之间的总游离脂肪酸浓度分别为（355.63±100.35）、（421.21±200.83）、（473.04±213.40）μmol/L,3组之间差异有统计学意义（X2=13.08,P〈0.01）,不饱和游离脂肪酸浓度依次为（206.29±61.94）、（218.11±110.28）、（240.94±116.79）μmol/L,3组之间差异无统计学意义（x2=2.17,P〉0.05）.单纯T2DM组与健康对照组比较,总游离脂肪酸升高[（421.21±200.83）μmol/L vs（355.63±100.35）μmol/L,x2=7.22,P〈0.05],不饱和游离脂肪酸浓度和健康对照组差异无统计学意义.T2DM合并高脂血症组与健康对照组比较,总游离脂肪酸浓度升高[（473.04±213.40）μmol/L vs （355.63±100.35）μmol/L,x2=27.93,P〈0.01].日间及日内RSD均〈5%,最低检测浓度为0.05～0.35 μmol/L,高、中、低浓度下的回收率为96.4%～104.8%.结论 T2DM患者血浆总游离脂肪酸浓度升高,以饱和游离脂肪酸升高为主,不饱和游离脂肪酸改变差异无统计学意义.可能与T2MD的发生发展有关,有望成为糖尿病脂代谢紊乱的临床早期监测新指标.
- 宁乐平刘松梅周新郑芳徐凤霞
- 载脂蛋白E基因型与冠心病和2型糖尿病的易感性研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨载脂蛋白E基因型与冠心病（CHD）和2型糖尿病（T2DM）的易感性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法、多重特异性扩增突变系统（multi—ARMS）快速分型法和PCR-单链构象多态性（PCR—SSCP）法，对238例CHD、316例T2DM、1892名健康对照的apoE基因第4外显子112位Cys／Arg和158位Arg／Cys进行检测；随机抽取前2种方法分型标本进行DNA测序法验证。并对所有异常带型标本进行DNA测序，确认是否存在基因变异；同时测定空腹血糖和血浆脂质水平。结果CHD组血浆HDL—C（t=2．66）和apoAⅠ（t=2．30）水平显著低于健康对照组（P〈0．05），收缩压（t=8．48）、舒张压（t=5．66）、TG（t=3．38）、LDL—C（t=2．48）、apoB（t=1．67）、Lp（a）（t=4．16）和FBG（t=7．04）水平均显著高于健康对照组（P〈0．05），TC水平在两组问差异无统计学意义（t=0．94，P〉0．05）；T2DM组收缩压（t=5．74）、舒张压（t=3．35）、血浆TG（t=4．56）、TC（t=5．22）、LDL—C（t=7．00）、apoB（t=2．24）、Lp（a）（t=4．15）和FBG（t=16．93）水平亦均显著高于健康对照组（P〈0．05），HDL—C（t=0．74）和apoAⅠ（t=0．41）水平在两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。ε2／2、ε2／3、ε3／3、ε4／2、ε4／3、ε4／4基因型在3组中的频率分布为：0．4％，13．4％，58．0％，1．3％，26．5％，0．4％（CHD组）；0．6％，5．7％，72．8％，1．9％，14．9％，4．1％（T2DM）；0．5％，10．5％，69．6％，1．6％，16．8％，1．1％（健康对照组）。CHD组和T2DM组基因型频率分布与健康对照组差异均有统计学意义（Χ^2=14．90，P=0．00；Χ^2=7．08，P=0．03），CHD组ε3／4基因型频率明显高于健康对照组（26．5％对16．8％），而ε3／3基因型频率显著低于健康对照组（58．0％对69．6％）；T2DM组ε4／4基因型频率明显高于�
- 刘松梅涂建成周新熊燏汪春红杨艳庞志宇
- 关键词：载脂蛋白E类基因型冠状动脉疾病疾病易感性
- 膜芯片检测糖尿病相关线粒体基因突变位点
- 2007年
- 目的构建一种快速、系统检测与糖尿病相关的45个 mtDNA 位点的膜芯片。方法针对 mtDNA 的45个突变位点,采用 Primer Premier 5.0和 NCBI BLAST 软件设计野生型和突变型探针;将带有8T 长臂的90条探针,通过紫外交联固定于经5×SSC Buffer 处理的尼龙膜;不对称 PCR 方法制备单链靶序列,纯化后经 Biotin 标记,AP-avidin 作用于 NBT/BCIP 显色,目视化观察结果。采用该膜芯片检测24份已知 mtDNA 序列的糖尿病标本,每份标本平行检测3次,评价检测结果。结果 9对引物可在同一条件下特异性扩增45个基因位点的目的片段;野生型和突变型探针的退火温度分别为(59.01±1.42)℃、(59.34±1.29)℃,能够在相同的温度下完成杂交反应;膜芯片样点清晰、规整度好,分布均匀,无漏点和连点,阳性对照和阴性对照结果理想,阴性对照的信号强度与背景持同;除16189位点外,检测结果与 DNA 测序方法有很好的一致性(x^2=113.132,Kappa 值=0.888,P=0.000)。结论成功构建可一次性检测目前国内外报道与糖尿病相关的44个 mtDNA 突变位点的膜芯片,适用于糖尿病患者和高危人群的检测。
- 刘松梅周新秦汉刘兵涂建成郑芳李霞
- 关键词：基因芯片糖尿病DNA探针
- 线粒体基因突变与糖尿病被引量：5
- 2007年
- 线粒体基凶缺陷型糖尿病按照新的糖尿病分型标准应属于β细胞功能遗传缺陷的特殊类型糖尿病。现对线粒体的分子遗传学特点、与糖尿病相关的线粒体基因突变位点以及线粒体基因缺陷型糖尿病发病的分子机制进行综述。
- 刘松梅刘兵周新
- 关键词：突变糖尿病
- 两重巢式PCR检测母体外周血中胎儿游离DNA
- 2008年
- 使用两重巢式PCR技术检测母体外周血中胎儿游离DNA，为非损伤性产前鉴定胎儿性别和诊断单基因疾病奠定基础．采用改良的chelex100方法提取60例孕龄为16～36周孕妇的外周血浆中游离胎儿DNA，依据NCBIX染色体长臂ATL1位点，Y染色体上DYS14位点序列，设计并合成引物，用巢式PCR同时扩增2个基因片段，以鉴定胎儿性别．结果表明；有ATL1位点和DYS14位点的扩增产物261bp和198bp鉴定为男性胎儿，而仅有261bp扩增产物鉴定为女性胎儿．均以真实出生性别进行确认后发现，此方法能有效提高检测特异性．两重巢式PCR能够简便并准确地鉴定胎儿性别，对单基因疾病特别是X-连锁遗传病的诊断有积极意义．
- 袁媛陈思礼周新
- 关键词：母体外周血胎儿游离DNA性别鉴定单基因疾病
- 糖尿病线粒体ND1基因3316G→A突变的功能研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨线粒体ND1基因3316G—A突变对线粒体生物学功能的影响及其在糖尿病发病中的作用。方法利用真核表达载体pcDNA3．1B和大肠杆菌DH5α构建野生型和线粒体DNA的ND1基因3316G—A突变型重组子pcDNA3．1B—ND1；设计特异性siRNA序列干扰Hela细胞内源性线粒体DNA表达，使其内源性ND1基因沉默；经脂质体转入野生型和突变型重组子pcDNA3．1B—NDl，使其在Hela细胞内表达。通过RT—PCR、十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光显微镜，从mRNA水平→蛋白质水平→线粒体膜电势位检测干扰效果，以筛选有效干扰siRNA序列。结果线粒体ND11和线粒体ND12siRNA序列均具有一定的干扰效果，后者效果明显优于前者；转入3316G→A突变型重组子pcDNA3．1B—ND1的Hela细胞表达的线粒体蛋白低于野生型。结论线粒体DNA的ND1基因正常表达对维持正常的呼吸链功能和细胞增殖至关重要，携有3316G→A突变基因的糖尿病的发病与线粒体蛋白表达下降有关。
- 邓冠华周新庞志宇刘松梅谢焱
- 关键词：糖尿病基因
- 线粒体基因5个位点与2型糖尿病早发的关联研究被引量：4
- 2008年
- 用PCR-RFLP及DNA测序方法对湖北省汉族人群无血缘关系的102例发病年龄≤45岁2型糖尿病患者及104例正常对照个体的线粒体DNA tRNA Leu(UUR)基因及ND-1基因5个位点进行突变分析。实验组检出3714(A→G)突变2例,两组间仅nt3316(G→A)突变的发生率有统计学差异。推测该位点变异可能与某些核基因或环境因素协同与汉族人群中的线粒体糖尿病的早发及发展有关。
- 熊燏周新钱士匀刘兵杨艳刘松梅
- 关键词：线粒体DNA突变线粒体糖尿病
