广东省中医药管理局科研基金(1060170)
- 作品数：3 被引量：52H指数：3
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- 相关机构：成都军区总医院中山大学更多>>
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- 含骨碎补总黄酮血清对新生SD大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化的影响被引量：8
- 2010年
- 目的 探讨骨碎补总黄酮含药血清对新生SD大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化的影响及其作用机制.方法 （1）骨碎补总黄酮含药血清的制备：选用12月龄雌性SD大鼠,药物灌胃,每日1次,连续12 d,末次灌药1.5 h后腹主动脉取血,分离血清备用.（2）实验模型的建立：采用二次酶消化法从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞,传代培养,取第3代成骨细胞为实验模型.（3）指标测定：①细胞增殖：用MTr法;②细胞分化：碱性磷酸酶（ALP）活性（PNPP法）;骨钙素含量（放射免疫分析法）;③细胞矿化：采用茜素红染色法,在40倍光镜下计矿化结节.结果 骨碎补总黄酮含药血清可刺激体外培养新生SD大鼠成骨细胞增殖,促进成骨细胞合成分泌ALP,且能增加成骨细胞骨钙素的分泌,促进矿化结节的形成.结论 骨碎补总黄酮可促进成骨细胞的增殖、分化和矿化,从而促进骨形成.
- 舒晓春刘君静孔梅钱明张丽娟王莺
- 关键词：骨碎补总黄酮含药血清成骨细胞分化矿化
- 不同浓度的骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响被引量：35
- 2010年
- 目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴定,再通过设立含不同浓度骨碎补总黄酮条件培养基,分组对BMSCs进行干预,观察各组7d和14d碱性磷酸酶(ALP)的表达,同时通过ALP染色和矿化结节染色进行定性分析。结果:用全骨髓贴壁法成功分离获得了均一稳定的BMSCs,各浓度骨碎补总黄酮作用BMSCs7d和14d后,诱导不同程度的ALP表达,经10-5g/L骨碎补总黄酮诱导,ALP染色及矿化结节染色均阳性。结论:低浓度骨碎补总黄酮能促进BMSCs向成骨细胞分化,其ALP生成量随着骨碎补总黄酮浓度的降低大致呈增加趋势。
- 舒晓春刘君静朱丹华庞天骄
- 关键词：骨碎补总黄酮骨髓间充质干细胞成骨细胞细胞分化
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外生长增殖特点的实验研究被引量：10
- 2010年
- 目的 了解应用全骨髓贴壁法分离的大鼠骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）的生长、增殖特点,以及接种密度、培养时间对细胞增殖的影响,为预防和治疗机体退行性疾病等提供多潜能的种子细胞.方法 通过全骨髓贴壁法分离SD大鼠BMSCs,在体外条件下培养,应用倒置显微镜观察细胞形态学特征及流式细胞仪鉴定、检测大鼠BMSCs表面标志抗原,并通过分析对接种于96孔板不同接种密度（2×103、5×103、1×104个细胞/ml）连续培养10 d细胞生长曲线的特点,研究接种密度和培养时间对BMSCs生长、增殖的影响.结果 流式细胞仪分析CD29细胞阳性率为97.68%（7607/7788）,CD34、CD45细胞阳性率分别为7.93%（661/8340）、2.76%（215/7788）,符合BMSCs表面标记物表达特征.通过换液及消化传代,3代以上的BMSCs较为均一纯化,呈典型的旋涡或放射状生长,约传代至7～10代时出现细胞衰老并衰老细胞逐渐增多;中等密度（5×103个细胞/ml）接种细胞的生长曲线呈较典型的S形曲线.第1、2天为潜伏期;第3～5天为对数生长期;第6天细胞数目进入平台期;第8～10天细胞数量稍有下降.结论 全骨髓贴壁法是获得BMSCs较为简便有效的方法,且中等量接种密度更有利于细胞增殖,可获得更多的种子细胞.
- 舒晓春朱丹华刘君静尹代婵庞天娇鲁红云孙辽
- 关键词：间质干细胞细胞培养技术
