中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-07)
- 作品数：6 被引量：65H指数：4
- 相关作者：刘长明郭龙军黄立平危艳武陆月华更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学政治法律更多>>
- 猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染的检测及TTV遗传变异分析
- 为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,采用PCR法对来自14个省份280份送检病料进行了检测,TTV1与TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1和TTV2混合感染阳性...
- 刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明
- 关键词：TTVPCV遗传变异分析
- 文献传递
- 猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTV遗传变异分析被引量：5
- 2011年
- 为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,本研究采用PCR方法对采自14个省280份病料样品进行检测,结果显示,TTV1和TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1与TTV2混合感染率为18.2%;PCV1和PCV2阳性率分别为41.1%和37.5%,PCV1与PCV2混合感染率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达75.0%。此外,对2株TTV1基因组进行测序,与GenBank中登录的6个TTV1序列比对,相似性结果为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组测序,与GenBank登录的4条TTV2序列比对,相似性为84.7%～90.4%;将TTV1与TTV2进行序列比对,相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520 nt～2 594 nt和720 nt～2 170 nt;TTV1基因保守区位于1 nt～520 nt和2 595 nt～2 800 nt;而TTV2基因保守区位于1 nt～719 nt和2 171 nt～2 800 nt。以上结果表明,我国猪群中存在TTV与PCV2的混合感染,并且两种病毒混合感染引起的相关疾病可能存在协同致病性;TTV1和TTV2基因型差异较大,具有遗传变异多样性的特点。
- 刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明
- 关键词：猪圆环病毒遗传变异分析
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定被引量：15
- 2010年
- 【目的】猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白,起保护性抗原作用,对其进行抗原表位鉴定十分必要。【方法】本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体,通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达,先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位,然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。【结果】5株单抗中有4株针对同一抗原表位,坐落在Cap蛋白N末端核定位信号区,经多肽扫描证实,核心序列为26RPWLVHPRHRY36;另1株单抗(1D2)仅与重组Cap蛋白产生免疫活性反应,对4个分段截短表达的Cap蛋白无免疫活性反应,鉴于该单抗具有中和病毒活性,针对的可能是构象表位。【结论】本研究首次鉴定出位于Cap蛋白核定位信号区的一个抗原表位,为以后Cap蛋白功能及核定位机理的研究奠定基础。
- 郭龙军陆月华黄立平危艳武刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白抗原表位核定位信号
- 我国部分地区猪圆环病毒2型分离株的遗传变异分析被引量：30
- 2009年
- 为了解我国猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株遗传变异情况,本研究对本实验室分离到的19株PCV2分离株通过病毒全基因组克隆和测序分析,将其分为2个大基因群和3个亚群,其基因组分别为1766nt、1767nt和1768nt,各占15.8%、73.7%和10.5%。以1767nt毒株为基准,其基因组第39或1039位有1个碱基缺失后突变成1766nt毒株;第1040位有1个碱基插入后突变成1768nt毒株。对19株病毒ORF2编码的Cap蛋白分析发现,有4株病毒编码基因发生了突变,出现了705nt和708nt两种突变型,使ORF2编码的Cap蛋白C末端分别有1和2个氨基酸增加。同时,本实验选用AccⅠ和FbaⅠ内切酶对19株病毒基因组PCR产物进行了限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析,其结果可作为流行毒株分型鉴别依据。
- 郭龙军陆月华危艳武黄立平刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型流行毒株限制性片段长度多态性
- 猪细环病毒流行病学与遗传变异研究进展被引量：3
- 2012年
- 猪细环病毒(PTTV)是近年来发现的一种新病毒,属于指环病毒科、ι指环病毒属成员。该病毒在世界范围内广泛存在,在患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中,PTTV的流行率明显高于健康猪群,怀疑该病毒与PCV-2等病原起协同致病作用,但仍没有找到合适的细胞系适于病毒的体外培养。论文主要围绕其流行病学和遗传变异情况进行了综述,简要介绍了该病毒的多种检测方法,这对进一步研究该病毒的分布和致病性及防控有重要意义。
- 刘建波刘长明
- 关键词：流行病学
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定
- 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白,起保护性抗原作用,对其进行抗原表位鉴定十分必要。本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白...
- 郭龙军陆月华黄立平危艳武刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白抗原表位核定位信号
- 文献传递
- 2005年-2010年我国部分地区PRRSV流行毒株的遗传变异分析被引量：10
- 2011年
- 为了掌握高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的变异情况,揭示该病的发生规律,根据GenBank登录的PRRSV基因序列设计引物,采用RT-PCR法对2005年-2010年间送检的282份病料进行了PRRSV核酸检测,对其中9份阳性样品进行了ORF5-7基因片段扩增和测序,所得序列与GenBank下载的PRRSV CH-1a、VR2332、HB-2、LV株的ORF5序列进行同源性比较,并与国内已发表的27株PRRSV ORF5序列进行遗传进化树分析,对GP5蛋白潜在糖基化位点和数目进行预测与分析。结果表明,病料PRRSV核酸阳性检出率为18.8%（53/282）;9个流行毒株同属于一个基因亚群,其ORF5序列同源性为95.0%-99.2%,氨基酸序列同源性为92.0%-99.0%;与4个参考毒株的ORF5序列同源性依次为93.4%-95.5%、87.6%-89.4%、91.2%-92.7%和63.0%-64.0%,氨基酸序列的同源性依次为91.0%-94.0%、85.6%-88.6%、89.6%-92.0%和54.7%-58.2%;GP5糖基化位点分析表明,5个糖基化位点有3株,4个糖基化位点有5株,3个糖基化位点有1株;这些糖基化位点分布在第30位-第55位氨基酸之间,以第44、55位点保守,另3个位点存在变异。我国猪群中PRRSV流行毒株变异幅度较大,GP5糖基化位点不同可能与毒力存在一定联系。
- 范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因
- 2005年～2010年猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株的遗传变异分析
- 2006年我国南方猪高热病爆发以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在全国各地广泛流行,为了揭示该病的发生规律,根据GenBank登录的PRRSV基因序列设计引物,采用RT-PCR法对2005年～2010年间...
- 范培虎危艳武郭龙军黄立平刘长明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救毒株的体外生物学特性被引量：3
- 2011年
- 【目的】中国猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)感染存在不同基因型毒株(PCV2a、PCV2b和PCV2d),有必要阐明不同基因型PCV2毒株的致病性差异。【方法】采用感染性克隆技术构建了不同基因型代表性毒株,对拯救的毒株进行体外生物学特性试验。【结果】构建了4个不同基因型的PCV2感染性分子克隆,经转化细胞后拯救4个克隆毒株,经核酸序列分析、病毒形态学观察、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)等证实属于不同基因型的PCV2毒株;拯救的毒株均通过细胞连续传10代,病毒增殖能力稳定,毒价均可达到105.0TCID50.mL-1;用具有中和病毒活性的单克隆抗体(1D2株)进行抗原捕获ELISA检测,拯救的PCV2a/rCL毒株与该单抗产生特异性反应,另3个克隆毒株(PCV2b/rYJ、rJF和PCV2d/rBDH)与该单抗均无反应,表明不同基因型代表毒株抗原性不同。【结论】中国猪群中PCV2流行毒株基因组及ORF2长度存在差异,其病毒抗原特性不同,构建和拯救了4个代表不同基因型PCV2克隆毒株,为进一步研究其致病性差异奠定了基础。
- 郭龙军陆月华黄立平危艳武刘长明
- 关键词：PCV2不同基因型感染性克隆病毒拯救生物学特性
