中国博士后科学基金(20080430788)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：曾巧英王宝松单虎王凡王冬梅更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学青岛农业大学西北民族大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪链球菌2型MRP-FBP串联表达蛋白对小鼠的免疫保护力被引量：5
- 2009年
- 针对猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBP)抗原性较强的基因片段,分别设计了1对引物,用PCR扩增出了mrp基因和fbp基因的片段。利用这些片段分别构建了原核表达载体pET32a-mrp、pET32a-fbp和pET32a-mrp-fbp。将这些表达载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行了表达。SDS-PAGE分析表明,表达的MRP、FBP、MRP-FBP的分子质量分别为47、52、80 ku。Western-blot分析表明,重组蛋白MRP-FBP可被SS2阳性血清所识别。免疫保护试验表明,串联表达的融合蛋白MRP-FBP对BALB/c小鼠的保护率达80%,是目前筛选到的制备SS2亚单位疫苗保护力最高的短片段串联免疫原。
- 王宝松李明义单虎曾巧英
- 关键词：猪链球菌2型
- 猪链球菌2型胞外因子短片段的原核表达及其免疫保护力
- 2009年
- 以江苏分离株HA9801基因组DNA为模板,扩增猪链球菌2型(SS2)胞外因子ef基因的1423～2203bp片段,并将其亚克隆至表达载体pGEX-4T-1上,构建了重组质粒pGEX-4T-1-ef。将鉴定阳性的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG诱导8h,表达的融合蛋白rGST-sEF大小为56ku,以包涵体形式存在。Western-blotting显示,rGST-sEF能与全菌兔抗血清发生特异性反应。用自制rGST-sEF亚单位疫苗免疫新西兰兔,以最小致死量HA9801攻击,保护率为60%。结果表明,表达的融合蛋白rGST-sEF具有良好的免疫原性和免疫反应性。
- 王冬梅王凡殷宏曾巧英
- 关键词：猪链球菌2型原核表达免疫保护力
