北京市属高等学校人才强教计划资助项目(IHLB2009-07135)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吴国娟王晶王杏周旭平祝文琪更多>>
- 相关机构：北京农学院北京三元绿荷奶牛养殖中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 适配体传感器的研究进展被引量：4
- 2011年
- 适配体作为传统抗体的替代物,在药物残留检测、临床诊断、靶向治疗等许多领域有广范的应用。适配体与生物传感器检测技术相结合,可研制出一系列适配体传感器。介绍了适配体的概念和优点,适配体传感器的种类,如荧光传感器、电化学传感器、比色传感器、SERS(surface enhanced raman scattering)传感器和SPR(surface plasmon resonance)传感器,以及它们的原理、检测限和应用情况,展望适配体传感器在兽药残留检测和动物疾病诊断等方面的应用前景。
- 祝文琪高磊王晶王杏周旭平吴国娟
- 关键词：适配体传感器
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量：2
- 2012年
- 试验通过RT-PCR法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体pet-30a中,转入到BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物的特性。利用Ni柱纯化该重组蛋白,采用NC膜皮下包埋法免疫Balb/C小鼠,取免疫后的脾细胞与SP2/0细胞进行融合后筛选杂交瘤细胞株,检测杂交瘤细胞株的特性并制备单克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,该重组蛋白表达正确,约为20ku,能被抗PRRSV的阳性血清特异性识别。超声后用Ni柱纯化,经SDS-PAGE分析可得单一的目的条带。NC膜皮下包埋法免疫效果良好,通过细胞融合、ELISA筛选获得3株能稳定分泌抗PRRSV N蛋白抗体的杂交瘤细胞株(H7、F7、C8),制备出高特异性的针对N蛋白的H7单抗。IFA与Western blot-ting结果显示制备的单抗可与病毒N蛋白产生特异性反应。亚型鉴定为IgG2b型,染色体分析证实杂交瘤细胞染色体数目正确。结果成功实现了N蛋白的原核表达,并获得高特异性的单克隆抗体,为PRRSV N蛋白抗原的检测奠定基础。
- 王晶王星星高飞苑嗣纯吴国娟
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白原核表达单克隆抗体
