中国科学院知识创新工程重要方向项目(KZCX3-SW-434)
- 作品数：23 被引量：303H指数：10
- 相关作者：肖国樱赵森陈永华严钦泉廖江林更多>>
- 相关机构：中国科学院亚热带农业生态研究所湖南农业大学中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目湖南省自然科学杰出青年基金湖南省“十一五”重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程理学更多>>
- mRNA差异显示技术在分离水稻抗性基因中的应用被引量：1
- 2007年
- mRNA差异显示技术从问世至今,在分离水稻抗性基因中得到了广泛的应用,通过对差异表达基因进行分析,能够进一步阐明水稻的抗性机理。对近年来mRNA差异显示法分离水稻抗性基因的研究做了总结,并从引物改进、PCR退火温度、dNTP浓度的改进、胶浓度的选择、标记方法的改进和差异片段验证方法的改进7个方面对mRNA差异显示技术的优化做了简单阐述。
- 陈昊赵森肖国樱
- 关键词：MRNA差异显示水稻抗性基因
- 利用基因枪转化法获得受四环素调控的水稻雄性不育植株被引量：4
- 2006年
- 利用基因枪法通过pTET-BI-Bar和pTATx-BN-Bin质粒分别将TetR和Barnase基因共转化粳稻品种台北309、4008S和籼稻品种D68。通过对R0代植株不同的基因进行PCR及Southern分析,结果表明,Barnase、TetR基因和控制Barnase基因的TA29-TX启动子均已整合到水稻基因组。其中,台北309和4008S分别获得了15株和6株阳性转基因植株,其外源基因转化率分别为4.5%和1.9%,其外源基因TetR和Barnase的共转化率分别为0.6%和0.3%。D68没有获得阳性转基因植株。
- 田继微廖江林刘建丰李文彬肖国樱
- 关键词：水稻基因枪转化
- 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化影响因素研究被引量：9
- 2006年
- 从组织培养体系和根癌农杆菌侵染体系两个方面,对影响根癌农杆菌介导的水稻遗传转化频率的各种因素作了具体的分析和综述。
- 王育花田继微肖国樱
- 关键词：水稻根癌农杆菌介导影响因素
- 耐旱玉米新品种科玉2号的选育被引量：2
- 2008年
- 科玉2号是中国科学院亚热带农业生态研究所用自选系BX111和HB32杂交选育而成的耐旱玉米新品种。经过湖南省区试、生产试验和示范、抗性鉴定和品质分析,该品种表现生育期适中,耐旱、高产、优质、抗性较好。适应湖南省及周边地区种植。于2006年通过湖南省农作物品种审定委员会审定。现正在大面积推广。
- 贺喜全盛良学廖江林
- 关键词：选育技术
- 利用实时荧光定量PCR法检测转基因水稻外源基因拷贝数的研究被引量：59
- 2007年
- 转基因植物中外源基因拷贝数是影响目的基因表达水平和遗传稳定性的重要因素,因此外源基因拷贝数的检测成为转基因研究的关键.利用高通量、快速、灵敏的SYBR GreenⅠ荧光定量实时PCR法,检测了转大麦烟酰胺合成酶基因(NAS1)水稻中外源基因拷贝数.以蔗糖磷酸合成酶基因(SPS)作为水稻的内源参照基因,通过梯度稀释法,分别获得了NAS1和SPS基因的Ct值与起始模板数的相关性标准曲线,相关系数分别为0.99976和0.99571,相关性高.通过目的基因NAS1和水稻内源参照基因SPS起始模板数的比较,获得了目的基因在转基因水稻中的拷贝数,在8株转基因株系中,1株为假阳性,1株拷贝数为1,3株拷贝数为2,其余3株拷贝数分别为3、4和7,而阴性对照拷贝数为0.这种方法快速、简便、准确,可以满足转基因育种工作中对后代优良株系的选择.
- 王育花赵森陈芬肖国樱
- 关键词：SYBR转基因水稻拷贝数
- mRNA差异显示技术的研究进展被引量：10
- 2005年
- 针对mRNA差异显示技术中的假阳性高和放射性污染等缺陷,文章从改进引物设计、应用非放射性标记、优化PCR参数、假阳性鉴定等方面进行了综述。1采用4种兼并或单碱基引物作锚定引物;用特异和长序列(≥20bp)专一性引物作为随机引物,可增加特异性;在锚定引物之前加上了一段T7启动子序列,在随机引物前加上一段M13重复序列,可使DDRT—PCR的体系的扩增特异性更一致。2针对放射性同位素检测法的缺点,文章提出并比较了几种常用的非放射性同位素标记方法。3保证起始(模板)mRNA质量和浓度,降低dNTP浓度,选择最适的反转录和PCR退火温度,可优化PCR参数。4用两种不同的反转录酶进行反转录平行实验,很容易区分出RNA制备过程中造成的假阳性,目前假阳性鉴定大多还是以Northern印迹为基础,再作些适当的改进。
- 陈永华严钦泉余建蒲肖国樱
- 关键词：MRNA差异显示技术NORTHERN随机引物放射性污染启动子序列反转录酶
- 荧光定量PCR检测淹涝胁迫下水稻Adh2基因的表达量变化被引量：24
- 2008年
- 采用荧光定量PCR方法,应用特异性引物,对淹涝胁迫下水稻叶片中低丰度表达的乙醇脱氢酶基因Adh2(Alcohol dehydrogene2)进行转录水平上的定量分析。实验得到一组基线平整、斜率大、指数区明显的S形荧光曲线。结果显示,在淹涝胁迫前期,Adh2基因表达持续增加,在水淹后8h表达量最大,随后下降。淹涝胁迫能诱导叶片中Adh2基因大量表达,且呈低-高-低的变化趋势。
- 赵森陈永华陈昊肖国樱
- 关键词：淹涝胁迫乙醇脱氢酶实时荧光PCR基因表达
- 不同培养基和激素对超级杂交稻花药培养力的影响被引量：29
- 2006年
- 以超级杂交稻两优培九F1的花药为材料,探讨不同诱导培养基、分化培养基及植物激素等因素对其花药培养效果的影响。结果表明:(1)不同的培养基表现出不同的花培效果,培养基和基因型间存在着一定的互作效应,其中改良M 8培养基表现出对不同基因型材料有较广的适应性和较强的绿苗诱导作用。(2)诱导培养基中添加1．5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)与1．5 mg／L萘乙酸(NAA)配比的组合比添加2．0 mg／L 2,4-D的组合绿苗分化率高1．17-2．80个百分点。(3)MS分化培养基中添加2．0 mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)配比的比添加2．0 mg/L激动素(KT)配比的绿苗分化率高2．52个百分点。
- 冯双华赵森郭家源欧阳俊闻肖国樱
- 关键词：花药培养培养基
- 水稻籼爪重组自交系群体芽期耐旱性鉴定被引量：8
- 2009年
- 以20%PEG-6000作渗透介质,模拟干旱条件,芽期处理水稻籼爪重组自交系7天,测定处理后的胚根长、芽长、芽干重。以各性状相对值的耐旱级别而得出的耐旱总级别为指标,筛选出8个耐旱株系,它们可作为耐旱资源在育种和耐旱机理研究中应用。
- 樊庆鲁郭加沅肖国樱
- 关键词：水稻重组自交系芽期PEG胁迫耐旱性
- Epsps基因为筛选标记的多基因抗虫表达载体构建被引量：3
- 2008年
- 目的:为了获得水稻的广谱抗虫性,同时也避免由潮霉素抗性基因引起的安全性问题。构建以抗除草剂基因(Epsps基因)为筛选标记的多基因抗虫植物表达载体pCTSK。方法:以双元载体pCAMBIA1300为基础,将潮霉素抗性基因hpt替换成携带烟草叶绿体转运肽序列TSP的草甘膦抗性突变基因aroAM12(编码细菌5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶Epsps)作为筛选标记基因,获得中间表达载体pCTSM1300。然后再连接上3个抗虫基因(马铃薯蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ、苏云金杆菌毒蛋白基因Bt cryI(A)及雪花莲外源凝集素基因GNA)的完整表达片段(包含各自的启动子和终止子)。结果:通过PCR方法和酶切方法鉴定已成功地构建了该表达载体;通过不同实验方案的数据分析,得出在载体构建的大分子连接中优化的一次连接法连接效率高于二次连接法的结论。
- 邓力华于元杰李宝健肖国樱
- 关键词：抗虫基因植物表达载体
