国家自然科学基金(81271917)
- 作品数：10 被引量：50H指数：4
- 相关作者：陶志华段秀枝刘春华陈玉华程玥更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第二医院温州医科大学浙江省台州医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因的筛选与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 采用染色质免疫共沉淀技术在全基因组水平筛选雄激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-AI的雄激素受体结合位点,行高通量测序及生物信息学分析共得到2 876个peak(pvalue<1×10–5),peak平均长度为673 bp;将peak序列定位到Hg19基因组,共有1 865个靶基因,其中fold enrichment≥10的基因有425个。对peak相关基因进行GO分析发现,与细胞、细胞组分、细胞过程、结合、细胞器相关的基因位列前五位;对peak相关基因进行通路分析发现,与黏着斑、代谢通路、癌症中的转录错误调控、嘌呤代谢等信号通路相关的基因占大多数。筛选出7个候选AR靶基因,采用Real-time qPCR技术分析它们在LNCaP-AI细胞和雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP中对DTH刺激的反应性,发现DHT刺激可改变7个候选AR靶基因在LNCaP-AI细胞中的表达,为进一步研究雄激素依赖性前列腺癌向非依赖性前列腺癌发展的过程中雄激素受体及其调控的下游靶基因功能起着至关重要的作用。
- 徐思琪廖昭平刘春华程玥季丽丽段秀枝陈玉华陶志华
- 关键词：前列腺癌雄激素非依赖雄激素受体靶基因
- 中国汉族人群中发现一例Rh血型弱D59型被引量：3
- 2018年
- 【摘要】目的鉴定中国汉族人群中发现的1例Rh血型弱D59型。方法采用常规血清学试剂对筛查出的D变异型血型做血清学鉴定，结合12种单克隆抗体对该标本RHD抗原表位进行确认；使用PCR-SSP法对弱D型进行基因分型。对RHD基因的10个外显子及侧翼序列进行测序并分析其杂合性。结果在该标本中发现等位基因C．1148T〉C，其血清学反应格局符合弱D表型。RHD合子型鉴定其为RHD＋／RHD-杂合型。结论该先证者为中国人群中首次发现的弱D59型。
- 廖昭平徐慧英刘春华王蕊项凯华冯洁乐芳嘉吴婷陶志华
- 关键词：RH血型
- 雄激素受体负向调节雄激素非依赖性前列腺癌细胞FN1和ZNF438基因表达的研究被引量：3
- 2015年
- 目的 验证FN1和ZNF438是否为雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因,并探索雄激素受体对FN1和ZNF438基因的表达调节作用.方法 采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量PCR及琼脂糖凝胶电泳技术验证雄激素受体（AR）作用于FN1和ZNF438基因.用双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞及慢病毒干扰LNCaP-AI细胞AR的表达,通过逆转录荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析FN1和ZNF438基因的表达情况.结果 AR-ChIP实验组所富集到的FN1和ZNF438基因分别为7.274±0.290和6.843±0.078,显著高于IgG-ChIP对照组的1.004±0.113和1.000±0.014,差异有统计学意义（t=34.91、128.377,均P＜0.05）.在双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为0.434±0.050和0.069±0.042,显著低于对照组的1.000±0.016和1.025±0.277;差异有统计学意义（t=18.532、5.905,均P＜0.05）.而在慢病毒转染干扰LNCaP-AI细胞AR的表达后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为17.579±4.415和1.895±0.424,显著高于对照组的1.028±0.445和1.041 ±0.190;差异有统计学意义（=6.461、3.184,均P＜0.05）.结论 FN1和ZNF438为雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP-AI细胞雄激素受体负向调节的靶基因,可为进一步研究雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生长发展机制提供新的研究思路.
- 俞攀尹彬彬刘春华程玥刘伟伟段秀枝廖昭平陈玉华王旭楚潘小艳陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤受体
- 肝癌的实验室标志物检测现状与展望被引量：9
- 2014年
- 肝癌在我国一直具有较高的发病率和死亡率。随着新研究技术和实验室检测方法发展，寻找高灵敏度和特异性的肝癌实验室诊断标志物及其检测方法是研究者共同目标。临床实验室只有系统地了解这些实验室标志物及其在肝癌进展中变化规律，并将其运用于肝癌诊断、治疗监测和预后判断，切实提高肝癌的实验室诊断能力，才能更好更有效地服务于临床。r手华裣验医学杂岙，2014，37：觯彤）
- 段秀枝陶志华
- 关键词：肝肿瘤生物学标记
- 前列腺癌细胞核内雄激素受体靶基因的筛选
- 2022年
- 目的筛选雄激素依赖性前列腺癌(PC)和雄激素非依赖性PC细胞核内的雄激素受体靶基因。方法取雄激素依赖性PC细胞株LNCaP和雄激素非依赖性PC细胞株LNCaP-AI进行培养,使用染色质免疫共沉淀技术在全基因组水平上筛选LNCaP、LNCaP-AI细胞中的雄激素受体结合位点,联合高通量测序技术寻找雄激素受体靶基因。采用RT-PCR法检测并比较LNCaP、LNCaP-AI细胞中雄激素受体差异靶基因表达水平。结果LNCaP、LNCaP-AI细胞中分别发现9021、4949个基因组测序数据富集区域,其中4143、2380个落在雄激素受体结合位点,将这些位点定位到基因组后分别得到2796、1854个雄激素受体相关基因(相同的基因有789个)。多数靶基因集中在肌动蛋白细胞骨架的调节、紧密连接、血管平滑肌收缩信号通路;LNCaP与LNCaP-AI细胞的差异靶细胞通路为黏着斑通路。从LNCaP与LNCaP-AI细胞测序得到的雄激素受体差异靶基因中筛选出富集程度较高的雄激素受体差异靶基因2个,即LIFR、PSMA6。LNCaP-AI细胞中LIFR、PSMA6 mRNA表达水平均明显高于LNCaP细胞(均P<0.05)。结论LIFR、PSMA6为PC细胞核内雄激素受体靶基因。
- 程玥夏旭芬陶志华
- 关键词：前列腺癌受体雄激素靶基因高通量测序
- RPR在乙型肝炎性肝纤维化诊断和预测严重程度中应用价值的评价被引量：12
- 2017年
- 肝纤维化是肝脏对各种病因所致的慢性、非自限性肝损伤的一种可逆的创伤修复反应.准确诊断肝纤维化、预测肝纤维化严重程度,对诊疗工作极为重要.肝脏活组织检查仍是肝纤维化的金标准,但其无法满足动态预测肝纤维化严重程度及动态监测疗效.临床迫切需要无创、可重复、快速检测的诊断指标.我国Chen等[1]提出基于乙肝的红细胞平均分布宽度-血小板比率（red cell volume distribution width-platelet ratio, RPR）模型.
- 丁予昀王海军廖昭平朱小丽陶志华
- 关键词：肝纤维化RPR
- 染色质免疫共沉淀技术在前列腺癌细胞雄激素受体下游靶基因研究中的应用
- 2014年
- 前列腺癌是男性人群中最常见的恶性肿瘤之一，雄激素受体可通过与基因组中雄激素反应元件结合并与共调解因子相互作用调控下游靶基因的表达从而参与前列腺癌的发生发展以及前列腺癌由雄激素依赖到非依赖的转变过程。染色质免疫共沉淀技术与PCR、基因芯片、高通量测序技术的结合使得对雄激素受体调控的靶基因研究有了最新进展，为雄激素去势治疗产生耐药的分子机制的研究提供新的思路。（中华检验医学杂志，2014，37：673-677）
- 徐思琪陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤基因表达调控
- 遗传性异常纤维蛋白原血症一家系的发病机制分析被引量：4
- 2014年
- 目的对1个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析及相关功能结构研究，探讨其发病机制。方法采集2012年11月浙江大学医学院附属第二医院诊断的遗传性异常纤维蛋白原血症1家系4代共19人外周静脉血，检测凝血指标，用免疫比浊法检测纤维蛋白原抗原含量。通过血栓弹力图检测血小板功能和纤维蛋白原功能；用PCR方法对纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列进行基因扩增，通过正反向测序明确突变位点；用还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）免疫印迹法检测纤维蛋白原突变体；采用分子结构模拟图分析预测突变氨基酸对纤维蛋白原的结构和功能的影响。结果先证者（Ⅱ-1）及其母亲（I-2）、妹妹（Ⅱ-2）、弟弟（Ⅱ-3）、女儿（II-1）纤维蛋白原活性明显下降，凝血酶时间（1tr）明显延长，但纤维蛋白原抗原含量、活化部分凝血酶原时间（APYF）和D-二聚体（D—dimer）均在正常范围内。血栓弹力图显示I-2、Ⅱ-2、111．1血小板功能正常，纤维蛋白原功能减低，而先证者及Ⅱ-3纤维蛋白原功能严重降低。基因检测结果显示先证者及Ⅱ-3存在纤维蛋白原FGGC．1001A〉C纯合突变，导致叫链第308位天冬酰胺（Asn）突变为苏氨酸（Thr）（P．Asn308Thr），而I-2、Ⅱ-2及IL-1存在纤维蛋白原FGGC．1001A〉c（P．Asn308Thr）杂合突变，家系其他成员均未检测到此突变位点。还原性SDS—PAGE免疫印迹未检测到纤维蛋白原突变体。分子结构模拟图显示突变位点Asn308位于纤维蛋白原二聚体结合的接触面，此位置氨基酸突变会对纤维蛋白的正常形成及功能产生影响。结论该家系成员异常纤维蛋白原血症系显性遗传，纤维蛋白原FGGC．1001A〉C突变是引起该家系异常纤维蛋白原血症的发病原因。
- 廖昭平徐思琪唐沪强谢怡怡段秀枝刘春华程玥陈玉华王德强罗淼陶志华
- 关键词：突变纯合子杂合子
- PCA3基因与前列腺癌的诊断及其应用价值研究被引量：14
- 2016年
- 前列腺癌发病率在许多国家的男性人群中稳步上升。血清前列腺特异性抗原（PSA）被广泛应用于临床诊断和前列腺癌筛查。然而血清PSA水平处于灰区时前列腺癌检出的特异性低，易导致较高的穿刺活检阴性及过度治疗，临床需要新的肿瘤标志物诊断、预测及监测前列腺癌。前列腺癌基因3（PCA3基因）在前列腺癌细胞和组织中特异性高表达，已被确定为一个前列腺癌分子标志物并初步应用于临床。但PCA3的诊断意义还有待进一步研究。本文关注PCA3分子生物学特性以及在前列腺癌诊断、治疗中的应用进展研究。
- 段秀枝陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤
- 前列腺癌相关标志物的研究进展被引量：5
- 2015年
- 受环境及生活方式转变等多因素的影响，前列腺癌成为老年男性常见的恶性肿瘤。血清前列腺特异性抗原的广泛应用，显著改变了前列腺癌的诊断和治疗。然而，作为前列腺癌筛选指标的前列腺特异抗原检测导致的前列腺癌患者过度诊治引起了学术界较大争议，另其在前列腺癌预测、治疗以及辅助临床决策的准确性也存在缺陷。因此，临床迫切需要新标志物来补充前列腺癌的监测和管理。本文对前列腺癌早期诊断及预后监测方面的新标志物进行了概括阐述，以期为前列腺癌的临床诊断及预后评估提供参考依据。
- 段秀枝陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤肿瘤标记生物学预后
