国家自然科学基金(30801081)
- 作品数：6 被引量：34H指数：4
- 相关作者：符岳姜骏罗银秋蒋龙元毛小英更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学佛山市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Caspase抑制剂对体外氧糖剥夺损伤大鼠海马神经元的保护作用被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨Caspase抑制剂对体外氧糖剥夺损伤大鼠海马神经元的保护作用及机制. 方法 新生SD乳鼠海马神经元经体外原代培养7d后分为对照组、氧糖剥夺/复氧组、Caspase抑制剂苄氧羰基-缬氨酰-丙氨酰-门冬氨酰氟甲基酮（Z-VAD-FMK）组和二甲基亚砜（DMSO）组,其中氧糖剥夺/复氧组氧糖剥夺6h后复糖复氧,Z-VAD-FMK组在氧糖剥夺复氧过程中加入20 μmol/L Z-VAD-FMK,DMSO组在氧糖剥夺复氧过程中加入1‰药物溶媒DMSO.复氧复糖24 h后光镜及电镜下观察各组海马神经元的形态学变化,MTT比色法测定细胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量,Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪检测神经元凋亡率,比色法测定神经元Caspase-3活性,Western blotting法分析Caspase-3活性蛋白表达. 结果 氧糖剥夺/复氧组细胞胞体肿胀,部分胞膜破裂,细胞完整性破坏,细胞核水肿,线粒体肿胀,嵴排列混乱;Z-VAD-FMK组细胞损伤较氧糖剥夺/复氧组减轻,大多数神经元形态完整,细胞内颗粒增多,细胞器肿胀减轻,线粒体嵴结构存在,分布较规则.与氧糖剥夺/复氧组比较,Z-VAD-FMK组海马神经元吸光度值（0.204±0.019 vs 0.303±0.018）及细胞存活率（0.481％±0.045％vs 0.704％±0.040％）明显增高,LDH含量[（406.500±21.286） U/L vs（326.000±20.278） U/L]明显降低,细胞凋亡率（49.700％±3.100％vs 29.820％±2.839％）明显降低,反应Caspase-3活性片段的吸光度值明显降低,Caspase-3活性蛋白表达（1.070±0.077 vs 0.785±0.058）明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 Caspase抑制剂可通过抑制Caspase-3蛋白活性,减轻海马神经元的体外氧糖剥夺损伤.
- 姜骏蒋龙元符岳毛小英罗银秋谭健韶颜梅
- 关键词：CASPASE抑制剂海马神经元
- 早期乳酸清除率对脓毒症患者液体复苏治疗的指导作用被引量：6
- 2013年
- 目的探讨急诊严重脓毒症和脓毒性休克患者早期乳酸清除率与预后关系,评估其指导早期液体复苏治疗的作用。方法回顾性分析2009年7月至2012年7月在我院急诊科就诊的严重脓毒症及脓毒性休克患者的一般资料、基础乳酸值、早期乳酸清除率和预后情况。将患者按预后分为死亡组和存活组,按早期乳酸清除率高低分为高乳酸清除率组和低乳酸清除率组,比较其差异性。结果各组患者年龄、性别、基础乳酸值无显著性差异(P>0.05)。存活组患者乳酸清除率明显高于死亡组(P<0.01),高乳酸清除率组患者病死率显著低于低乳酸清除率组(P<0.01)。结论早期乳酸清除率与急诊严重脓毒症和脓毒性休克患者的预后相关,可用于指导急诊液体复苏治疗。
- 姜骏符岳谢春明许婉华颜梅罗银秋毛小英蒋龙元
- 关键词：严重脓毒症脓毒性休克乳酸清除率
- 大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型的建立与评价被引量：7
- 2014年
- 目的建立和评价大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型，探讨合适的窒息（AP）时间。方法实验在中山大学心肺脑复苏研究所完成。126只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组和实验组，通过静脉注射维库溴铵诱导窒息心搏骤停，实验组根据窒息时间不同分为AP4、AP6和AP8组，分别于心搏停止后4、6、8min给予机械胸外按压和同步通气复苏。记录复苏基本情况，复苏后1、3、7d，检测脑含水量、NDS评分、MRI影像学改变、脑组织病理损伤和神经元凋亡。统计分析采用单因素方差分析或X2检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果复苏后第1天各实验组的NDS评分最低，复苏后3d脑含水量增加和MRI影像学损伤明显，7d时脑组织病理损伤和神经元凋亡达到高峰。AP4、AP6和AP8组复苏后24h存活率分别为85％、75％和45％，AP8组的ROSC率及24h存活率显著低于AP4和AP6组（P〈0．01）。随着窒息时间延长，各实验组大鼠复苏后脑水肿及影像学、组织学、神经功能损伤逐渐加重，其中AP8组各指标损伤最严重，AP6组损伤程度适中。结论成功构建了大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型，结合复苏存活率和脑组织损伤程度，建议将窒息6min作为该模型合适的缺血时间。
- 姜骏李旷怡常瑞明常建星符岳黄子通
- 关键词：心搏骤停心肺脑复苏窒息脑含水量神经功能缺损评分
- 亚低温减轻氧糖剥夺所致的大鼠海马神经元损伤被引量：8
- 2013年
- 目的:研究亚低温(31～32℃)对氧糖剥夺(OGD)损伤的大鼠海马神经元的保护作用并探讨其保护机制。方法:本实验通过体外培养大鼠海马神经元并予以OGD处理,建立了模拟大脑缺血、缺氧的神经元OGD模型;将实验细胞随机分为正常对照组、单纯亚低温组、单纯OGD组以及亚低温+OGD组,通过形态学观察、神经元凋亡率检测以及胞浆内caspase-3活性检测,研究亚低温对神经元OGD的保护作用及其机制。结果:神经元OGD后出现明显的细胞损伤,凋亡率明显升高(P<0.01);与单纯OGD组比较,亚低温+OGD组细胞损伤明显改善,细胞形态学改善,凋亡率下降(P<0.05),同时caspase-3活性亦下降(P<0.05);神经元OGD后caspase-3活性升高,与凋亡率呈正相关(r=0.823,P<0.05),神经元经过亚低温和OGD后caspase-3活性与凋亡率亦呈正相关(r=0.841,P<0.05)。结论:OGD可使caspase-3的活性升高及神经元凋亡率增加。亚低温对神经元OGD的保护作用可能与其抑制caspase-3的活性有关。
- 周天恩张萌杨正飞蒋龙元
- 关键词：神经元氧糖剥夺亚低温半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 心肺复苏对心脏骤停大鼠脑线粒体功能的保护作用被引量：8
- 2013年
- 【目的】探讨心肺复苏对心脏骤停大鼠脑神经元线粒体功能的保护作用。【方法】建立大鼠室颤法心脏骤停模型,缺血组心跳停止15 min,不行心肺复苏,复苏组心跳停止10 min,行5 min心肺复苏。15 min末处死动物,分离提取海马脑组织线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体呼吸功能,线粒体内、外膜试剂盒测定线粒体膜完整性,电镜观察线粒体超微结构。【结果】心脏骤停后,缺血组和复苏组的线粒体外膜完整率、内膜膜电位、呼吸控制率均较假手术组明显降低(P<0.01),复苏组结果高于缺血组(P<0.01),形态学比较各组间无显著差异。【结论】心脏骤停早期,神经元线粒体损伤以功能性为主,形态学改变不明显,心肺复苏可改善缺血神经元的线粒体功能,减轻脑线粒体损伤。
- 符岳姜骏许婉华罗银秋毛小英谭健韶黄子通
- 关键词：心肺复苏心脏骤停线粒体
- 机械吹打法大鼠海马神经元原代培养的研究被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨建立简单、稳定的大鼠海马神经元体外原代培养方法。方法:分离出生24 hr大鼠海马组织,采用机械吹打法或胰蛋白酶消化法制备单细胞悬液,以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基接种,24 hr后更换含2%B27的DMEM/F12无血清培养基饲养,每3 d全量换液,观察神经元形态,培养第7d检测神经元纯度,MTT法测定神经细胞活性,比较两种操作方法的培养效果。结果:机械吹打法可缩短实验操作时间,减少培养污染率,降低了操作难度,培养出的神经元纯度高、活性好。结论:机械吹打法操作简便,结果稳定,是大鼠海马神经元体外原代培养的好方法。
- 姜骏符岳毛小英罗银秋周天恩蒋龙元黄子通
- 关键词：海马神经元原代培养
