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国家重点基础研究发展计划(2006CB101801)

作品数：16 被引量：56H指数：4
相关作者：黄倢刘庆慧成君军张峥张士璀更多>>
相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学中国科学院更多>>
发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 16篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 12篇农业科学
  • 5篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 8篇对虾
  • 8篇WSSV
  • 5篇基因
  • 4篇白斑综合征
  • 4篇白斑综合征病...
  • 3篇蛋白
  • 3篇对虾白斑综合...
  • 3篇对虾白斑综合...
  • 3篇囊膜
  • 3篇囊膜蛋白
  • 2篇对虾白斑综合...
  • 2篇细胞
  • 2篇酵母
  • 2篇酵母双杂交
  • 2篇结构蛋白
  • 2篇克隆
  • 2篇白斑综合症
  • 2篇白斑综合症病...
  • 2篇病毒
  • 1篇蛋白表达

机构

  • 16篇中国水产科学...
  • 7篇中国海洋大学
  • 2篇辽宁医学院
  • 2篇青岛科技大学
  • 2篇青岛农业大学
  • 2篇中国科学院
  • 2篇上海海洋大学
  • 1篇辽宁师范大学

作者

  • 10篇黄倢
  • 8篇刘庆慧
  • 3篇成君军
  • 2篇王维新
  • 2篇张秀丽
  • 2篇高天翔
  • 2篇黄健
  • 2篇张士璀
  • 2篇于洪涛
  • 2篇张峥
  • 1篇梁艳
  • 1篇杨冰
  • 1篇王明森
  • 1篇侯林
  • 1篇许华
  • 1篇韩文君
  • 1篇杨官品
  • 1篇仇知光
  • 1篇陈文博
  • 1篇刘笋

传媒

  • 4篇安徽农业科学
  • 2篇动物医学进展
  • 2篇海洋水产研究
  • 2篇渔业科学进展
  • 1篇中国水产科学
  • 1篇生物技术
  • 1篇海洋湖沼通报
  • 1篇水产学报
  • 1篇水生生物学报
  • 1篇中国病毒学

年份

  • 2篇2011
  • 6篇2010
  • 2篇2009
  • 5篇2008
  • 2篇2007
共 16 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
Molecular Epidemiological Investigation of Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus and Taura Syndrome Virus in Penaeus Vannamei Cultured in China被引量：3
2007年
The Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus(IHHNV) and Taura syndrome virus(TSV) are two important shrimp viruses in cultured shrimp in America.These two viruses were transmitted to China at the beginning of the 21st century.In this study,214 shrimp samples of Penaeus vannamei were collected from seven different areas of China and tested by PCR for IHHNV and TSV infection.The results showed that there were a high prevalence of IHHNV(65.42%) and low prevalence of TSV(3.27%) in the tested samples.Several samples were found to be co-infected with these two viruses.A 3 kb fragment of 7 positive IHHNV samples and a structure protein region(ORF2) of three TSV positive samples were amplified and sequenced.The sequence comparison indicated that both IHHNV and TSV sequenced in China have a low genetic variations compared with the prototype IHHNV and TSV from Hawaii.Phylogenetic analysis showed that TSV isolates were clustered into two groups,Asia and America group,which was genetically correlated to geographic distribution.
Cong ZHANG Jun-fa YUAN Zheng-li SHI
关键词：桃拉综合征病毒
发酵条件对细菌工程菌产WSSV-VP37的影响被引量：1
2009年
在pBAD/gIIIA-VP37重组表达载体构建的基础上,研究发酵工艺参数对重组WSSV-VP37(rVP37)蛋白表达量的影响,并对重组质粒的稳定性和重组菌的生长进行研究。结果表明,pBAD/gIIIA-VP37表达的rVP37以包涵体形式存在于菌体中,发酵温度及诱导时间影响rVP37蛋白表达和菌体产量,以37℃诱导5h最佳。重组质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性,WSSV-VP37基因的插入对宿主菌的生长规律影响不大。
张秀丽杨啸刘庆慧马璀艳黄倢
关键词：发酵条件蛋白表达
一种大规模制备双链RNA的简单方法及其在斑节对虾中的应用被引量：3
2010年
RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)诱发的特异性沉默目的基因表达的过程,一种大规模制备双链RNA的方法可以便利RNAi技术的应用。以斑节对虾kazal型蛋白激酶抑制剂(KPI)基因为例,详细介绍了一种以体内载体表达大量制备dsRNA(>300nt)的方法。使用商业载体pGEMT和pDRIVE,以2步克隆法构建含有发夹环(hairpin loop)dsRNA表达载体,转化RNA酶Ⅲ缺陷的大肠杆菌HT115(DE3)进行体内转录制备dsRNA。构建的发夹RNA表达载体含有494bp的正向靶序列和403bp的反向互补靶序列,其中正向靶序列多出的91bp即可成为loop环,而无需再次克隆加入。培养30mL的细菌,即可得到1mg纯化的dsRNA,而其成本仅为使用商业化体外转录试剂盒的四分之一。为评估RNAi效果,按照每1克虾体肌肉注射2μg dsRNA的剂量,在dsRNA注射后0,6,12和24h采集血淋巴,RT-PCR检测KPI mRNA的基因转录水平。与对照组GFP-dsRNA和NaCl注射组相比,KPI-dsRNA注射组可以在24h内沉默血淋巴中的KPI基因。结果表明该方法是可大规模制备长的dsRNA的方法。
梁艳Vanvimon SaksamerpromeKallaya Sritunyalucksan黄倢
关键词：斑节对虾RNA干扰双链RNA
对虾原代细胞培养研究现状被引量：2
2010年
对对虾血细胞的原代培养进行综述。对于对虾用作细胞培养的组织和培养基进行总结,介绍了对虾用于细胞培养的组织以及原代培养的培养基和培养条件控制,还介绍了对虾细胞培养的潜在应用价值,尤其是对于病毒防治工作的价值。
张秀丽刘庆慧
关键词：细胞培养
真核表达载体pcDNA3.1(+)-vp28的构建及其在细胞中的表达被引量：3
2010年
[目的]为研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白与虾细胞之间的作用机制奠定基础。[方法]采用PCR扩增方法构建含白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-vp28,用磷酸钙共沉淀法将重组质粒转染到293T细胞中,采用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。[结果]VP28的PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中呈现出1条634bp左右的条带,与GenBank中vp28的序列完全一致。对pcDNA3.1(+)-vp28转染后的阳性单克隆菌落进行PCR鉴定、扩大培养和质粒提取,并对所得质粒进行HindⅢ和BamⅢ双酶切,获得了5409和610bp左右的2条带,与预期结果一致;所获扩增产物与vp28序列完全一致,说明重组质粒pcDNA3.1(+)-vp28被成功转染到293T细胞中;SDS-PAGE和Westernblot检测结果显示,pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中的表达产物与预期结果相符。[结论]pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中可成功表达VP28。
姜坤黄健张峥成君军石正丽刘庆慧
关键词：WSSVVP28细胞转染293T细胞
对虾白斑综合征病毒亚单位疫苗研究进展被引量：4
2008年
对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种可以引起养殖对虾暴发性死亡的传染性病原,由于其强烈的传染性和极高的致死率,使得人们在应对它时,必须侧重于早期的防控。近年的研究表明,对虾存在类免疫(quasi-immune)机制,而WSSV的重组蛋白可以诱导对虾产生抗病保护效应。目前有关对虾白斑综合征病毒亚单位疫苗的研究大多围绕诱导产生高效免疫应答能力的囊膜蛋白进行免疫接种方式来展开。文章对该领域研究成果做一综述,旨在为今后WSSV的防控提供参考。
陈文博侯林刘庆慧
关键词：对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白亚单位疫苗
WSSV-VP39基因克隆与结构分析被引量：2
2007年
根据已公布的WSSV-VP39全基因序列(GenBank No.AAL89161)设计1对引物,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析,扩增出约898bp的特异条带,将其回收后克隆入pGAPZα-A载体中,并进行序列测定与分析。结果表明,扩增序列与Gene Bank登录序列(GenBank No.AAl89161)核苷酸同源性100%。序列分析表明,WSSV-VP39基因编码蛋白无跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和酪氨酸硫酸化位点,1个糖基化位点。蛋白序列比对结果表明,WSSV-VP39与WSSV-VP37具有较高的同源性,其在WSSV侵染中的作用值得关注。
刘庆慧韩文君杨冰黄倢
关键词：基因克隆
对虾白斑综合征病毒(WSSV)致病相关基因研究进展被引量：4
2008年
介绍了最近几年白斑综合征病毒WSSV致病相关基因的研究进展,包括病毒囊膜蛋白基因、核衣壳蛋白基因、病毒复制过程的关键酶基因、细胞因子受体基因、潜伏相关基因和抑制宿主细胞凋亡机制的基因等。
于洪涛黄倢张士璀
关键词：白斑综合征病毒致病相关基因
凡纳滨对虾β-actin基因的克隆与表达
2010年
目的:克隆凡纳滨对虾肌动蛋白基因并在原核表达系统中表达。方法:根据GenBank上凡纳滨对虾β-actin基因序列设计引物,采用RT-PCR方法,从凡纳滨对虾肌肉组织中克隆出β-肌动蛋白基因cDNA部分序列,克隆序列连接到pBAD/gⅢA质粒,转化入大肠杆菌TOP10,筛选阳性克隆,进行温度诱导表达重组蛋白。结果:克隆序列长度为1300bp,测序结果与Gene-Bank序列同源性达99.91%;获得重组体诱导表达产物经SDS—PAGE分析,在约48kD处有表达的蛋白带,表达产物经Western Blotting鉴定为阳性。结论:获得β-actin基因在大肠杆菌中稳定表达产物。
刘笋刘庆慧黄倢
关键词：凡纳滨对虾Β-ACTIN克隆
对虾白斑综合征病毒蛋白质组的研究进展被引量：14
2008年
白斑综合征病毒WSSV(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是引起对虾大规模死亡的主要病毒性病原,且该病毒感染的宿主广泛。自WSSV基因组全序列公布以来,国内外的学者对WSSV的研究热点转移到该病毒基因产物功能的相关研究上面来。弄清WSSV感染机理是有效防治病毒的基础,而对其感染机理的阐释则主要是搞清病毒各蛋白在感染中的作用,这些是WSSV蛋白质组学的研究内容之一。分析WSSV蛋白同时可以在分子水平上为研究海洋和陆地生物病毒的进化趋势提供有力的基础。
许华黄倢杨官品
关键词：WSSV结构蛋白非结构蛋白囊膜蛋白
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