中国博士后科学基金(20060390897)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：刘燕张宏福陈大芳娄玉杰赵莹更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学济南市畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 康宁木霉AS3.2774纤维素酶CBH Ⅱ基因的cDNA克隆被引量：1
- 2017年
- 采用植物叶总RNA提取试剂盒提取康宁木霉AS3.2774总RNA,根据GenBank已发表的纤维素酶CBH Ⅱ基因序列(DQ504304)设计并合成了1对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增得到康宁木霉CBH Ⅱ基因cDNA,并成功转入大肠杆菌。序列测定结果表明,该基因序列与GenBank发表的康宁木霉CBH Ⅱ基因序列同源性达到99.86%。
- 刘燕王瑞军
- 关键词：康宁木霉克隆
- 酸性纤维素酶CBHⅡ基因与非抗性穿梭表达载体的重组及在乳酸杆菌的表达及其活性检测被引量：5
- 2009年
- 以SmaI和SphI双酶切pMD18-T-CBHⅡ和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,胶回收酸性纤维素酶CBHⅡ基因和载体大片段,并将纯化的CBHⅡ基因和表达载体pW425t大片段进行连接,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-CBHⅡ。将pW425t-CBHⅡ转化至thyA基因缺陷型的乳酸杆菌感受态细胞中,通过质粒提取、酶切鉴定、PCR鉴定、测序分析和生长功能弥补筛选阳性克隆。SDS-PAGE分析,可见约49.6 ku的蛋白,并且刚果红染色显示重组乳酸杆菌可产生明显的水解圈。
- 赵莹孙哲刘燕胡后银陈大芳娄玉杰张宏福
- 关键词：纤维素酶乳酸杆菌
