山西省科技攻关计划项目(021034) 作品数:9 被引量:95 H指数:5 相关作者: 曹秋芬 狄红梅 王学府 周慧 张传义 更多>> 相关机构: 山西省农业科学院 晋中职业技术学院 山西农业大学 更多>> 发文基金: 山西省科技攻关计划项目 山西省农业科学院高新技术项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
葡萄花粉介导转基因超声波处理参数的选择 被引量:12 2006年 利用花粉介导附加超声波对葡萄花粉进行处理,结果表明,超声波处理各参数对葡萄花粉有极显著影响,而且参数间存在交互作用。因此,用超声波处理花粉选择处理参数时,应考虑其交互作用。考察显著性检验结果,在试验花粉破碎率和萌发率的稳定性和不破坏DNA的基础上,超声波处理参数以功率100~120W,处理时间4~5s,间隙时间2~68,处理次数6为最佳组合选择范围。GUS活性检测结果,花粉有4‰的转化率。 岳新丽 曹秋芬 季兰 孟玉平 陈俊关键词:葡萄 转基因 一个调控葡萄花和果实色素形成的基因家族——MYB相关基因家族 被引量:10 2007年 葡萄浆果的颜色是由花色素苷的量来决定的,UFGT控制花色素苷的合成,Myb相关基因通过时空表达调节UFGT,从而使花色素苷在葡萄发育的不同阶段和不同部位表达。不同葡萄品种调节花色素苷的合成的强度和模式的差异造成了有色葡萄品种的果皮有多种颜色,白色葡萄品种果皮是由于没有花色素苷的合成。Myb相关基因家族主要有八个成员,其中MybA的三个种类VlmybA1-1,VlmybA1-2和VlmybA2以及MybB的两个种类VlmybB1-1和VlmybB1-2得到了较深入的研究。 张传义 曹秋芬 孟玉平 周慧关键词:葡萄 花色素苷 MYB 超声波处理对大白菜花粉管通道法转基因的影响 被引量:2 2012年 [目的]探索提高花粉管通道法对大白菜转化率的途径。[方法]以大白菜品种03号和玉青的花粉为材料,对其萌发的缓冲液和超声波处理的各参数进行筛选。[结果]大白菜花粉萌发的最佳缓冲液为蔗糖200 g/L+硼酸100 mg/L+硝酸钙200 mg/L,较理想的超声波处理参数为功率150 W、工作时间5s、间隔时间5s、处理次数8s;经浓度为200 mg/L的卡那霉素筛选,获得3株T1代单株。[结论]为进一步进行大白菜的基因转化奠定了基础。 狄红梅 王学府 曹秋芬 孟玉平关键词:超声波 大白菜 花粉管通道法 转基因 抗生素对菊花叶片再生及农杆菌生长的影响 被引量:5 2007年 以3个菊花品种的试管苗叶片为材料,通过探讨5种抗生素硫酸卡那霉素,氨苄青霉素,头孢噻肟钠,头孢唑林钠和羧苄青霉素对其再生的影响,结果表明,硫酸卡那霉素浓度为5mg/L时能完全抑制JB、Jc的再生,15mg/L时能完全抑制JA的再生。其它4种抗生素对3个菊花品种再生影响差异很大。随着浓度升高,头孢噻肟钠使JA、JB再生率持续下降,再生率持续上升;头孢唑林钠使JA、JB、Jc再生率都持续下降;羧苄青霉素使JA、JB、Jc再生率先上升,后下降,均在400mg/L时达到峰值。对于农杆菌LBA4404,头孢噻肟钠的抑菌效果最好,其次是羧苄青霉素。 张传义 曹秋芬 周慧 孟玉平 孙海峰 王卉关键词:抗生素 菊花 农杆菌 抑菌 苹果AFL1基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量:10 2008年 AFL1基因是苹果控制花发育的关键基因之一。在已得到AFL1 cDNA基因的基础上,将AFL1克隆到原核表达载体pET28b中,获得了重组表达质粒pET-AFL1,并将此重组质粒转化到大肠杆菌菌株BL21中,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE电泳分析,结果显示,AFL1基因在大肠杆菌中成功表达,表达的AFL1融合蛋白分子量大约为53 kD。 张传义 孟玉平 孙海峰 曹秋芬关键词:原核表达 表达载体构建 苹果LEAFY同源基因的cDNA克隆与表达分析 被引量:43 2003年 从苹果的果台枝顶芽中克隆了两个长约 1 4kb的cDNA片段 ,分别定名为AFL1和AFL2。它们的碱基序列在编码区有 90 %的同源性 ,但在 3 末端非编码区仅有约 6 0 %的同源性。它们表达的肽链氨基酸序列与小叶杨、大豆、矮牵牛等有 70 %以上的同源性 ,与番茄、金鱼草、拟南芥有近 70 %的同源性 ,证明它们是LFY的同源基因。RT -PCR的结果表明 ,生长期AFL2在萼片、子房、根、茎、叶以及果台枝顶芽中都有表达 ,而AFL1只在果台枝顶芽中表达 ;在不同发育时期的果台枝顶芽中 ,AFL1在顶芽停止营养生长转向生殖生长以后才清晰表达 ,而AFL2在生长期 6~ 10月都有表达。因此认为苹果中的这两个LFY同源基因虽有共同的起源 ,但是在功能上存在差异 ,在花和营养组织的发育中起不同的作用。DNA印迹分析表明 ,在苹果属及近缘的梨属植物中LFY同源基因是多拷贝的。 曹秋芬 和田雅人 孟玉平 黄静 孙毅 王果萍关键词:苹果 LEAFY 同源基因 CDNA克隆 不同栽培基质对仙客来根际环境和生长发育的影响 被引量:3 2018年 试验以仙客来"红芙蓉"为试材,用草炭、珍珠岩、牛粪、核桃壳按不同比例制成三种基质,研究对"红芙蓉"根际环境和生长发育的影响,结果显示:B草炭:珍珠岩=3∶1在仙客来生长发育的各项指标和最大持水量、容重方面表现最佳,C(牛粪+核桃壳):珍珠岩=3∶1次之,A纯草炭最差。在保肥、提供速效养分和促进根系吸收养分方面,C(牛粪+核桃壳):珍珠岩=3∶1表现最佳,B草炭:珍珠岩=3∶1次之,A纯草炭最差。 狄红梅 王学府 曹秋芬关键词:仙客来 草炭 牛粪 核桃壳 Effects of Ultrasonication on Genetic Transformation via the Pollen-Tube Pathway in Chinese Cabbage 2011年 [Objective] This research aimed to explore the method to increase conversion rate of pollen-tub pathway in Chinese cabbage.[Method] Chinese cabbage varieties Yuqing and No.03 were used as materials for the selection of germination buffer and parameters for ultrasonication.[Result] The optimal buffer for pollen germination of Chinese cabbage was 200 g/L sucrose + 100 mg/L boric acid + 200 mg/L calcium nitrate,the preferred ultrasonic processing power was 150 W,processing time was 5 s,interval time was 5 s and processing frequency was 8.Three T1-generation plants were obtained through selection with 200 mg/L kanamycin.[Conclusion] This research laid foundation for the further genetic transformation of Chinese cabbage. 狄红梅 王学府 曹秋芬 孟玉平农杆菌介导FT基因转化嘎拉苹果的研究 被引量:11 2008年 用农杆菌介导法对苹果品种嘎拉转化FT基因进行了研究,建立了苹果离体叶片高效再生体系,在含BA 5mg/L+IAA 0.5 mg/L的MS培养基上,以离体叶片远轴面(叶背面)向上,经过14 d的暗培养获得再生不定芽和再生植株,再生率达97%。在转基因再生体系中,以头孢噻肟钠500 mg/L和卡那霉素5 mg/L,作为脱菌培养和选择培养的条件,经过感染携带拟南芥FT基因的农杆菌,获得了一批转FT基因的植株,经PCR检测,目的基因已经整合到苹果基因组中。 孟玉平 曹秋芬 周慧 杜建中 曹尚银关键词:苹果 农杆菌