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国家高技术研究发展计划(2006AA02Z228)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
许煜泉
李荣秀
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董德贤
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许煜泉
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微生物学通报
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2010
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假单胞菌株M18 gacA基因的克隆、表达及蛋白纯化
被引量:3
2010年
GacA是GacS/A双元调控系统的一个组分,克隆假单胞菌株M18中的gacA基因。测序结果同Pseudomonas sp.PAO1比较,该基因2个碱基的改变未引起氨基酸的改变。将该基因克隆到表达质粒pET28b(+)中,将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析柱纯化,蛋白纯度约为98%,质谱鉴定证明纯化的蛋白为GacA蛋白。CD谱分析GacA包含了4%α-helix,48%β-sheet和48%无规则卷曲。GacA蛋白的获得为进一步研究其晶体结构、生物学性能以及GacS/A双元调控系统奠定了基础。
任慧娟
许煜泉
董德贤
李荣秀
关键词:
GACA
纯化
质谱鉴定
圆二色谱
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