新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金(XJDX0201-200804)
- 作品数：5 被引量：31H指数：3
- 相关作者：马纪刘璇张富春候凤马延龙更多>>
- 相关机构：新疆大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白活性的比较研究被引量：4
- 2008年
- 为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,并利用亲和层析纯化蛋白。SDS-PAGE分析结果证明获得了两种高效表达纯化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融合蛋白。在浓度为0.5mg/mL时,两种蛋白的热滞值分别为0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形态均为棱型。抗冻保护实验结果显示:准噶尔小胸鳖甲两种融合抗冻蛋白均能够显著提高细菌在低温下的存活率,并且MBP-MpAFP5对细菌的保护效果显著高于GST-MpAFP5。研究结果对于准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的应用具有重要的理论意义。
- 李素丽张富春孙琳杰刘璇马纪
- 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白原核表达热滞活性
- 准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698在真核细胞中的表达与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存的真核表达载体pEGFP-N1中,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、Western印迹检测蛋白表达。结果:构建了真核表达载体pEGFP-N1-mpafp698,在转染后24 h可检测到绿色荧光的表达,而对照组则没有检测到荧光蛋白;Western印迹结果显示表达蛋白的相对分子质量约37 000。结论:为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的细胞表达及功能研究奠定了基础。
- 姜敏于继云李晨晨马纪
- 关键词：准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白细胞表达
- 准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149的生物信息学分析
- 2009年
- 利用生物信息学方法对准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149所编码蛋白MPAFP149进行分析,分别从氨基酸组成、理化性质、二三级结构和功能、进化关系等方面进行预测。结果表明MPAFP149与其他昆虫抗冻蛋白在氨基酸水平上具有79%的相似性,二级结构上预测其为水溶性蛋白,含有信号肽和跨膜区。三级结构上与黄粉虫抗冻蛋白YL-1具有较高的相似性,并且具有昆虫抗冻蛋白所特有的结构域。本研究为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白功能的研究鉴定了基础。
- 邱立明王艳李秀明马纪
- 关键词：抗冻蛋白功能分析
- 荒漠昆虫光滑鳖甲的耐寒性季节变化及其生理机制被引量：22
- 2009年
- 光滑鳖甲Anatolica polita borealis生活于温差大的新疆荒漠环境,为探讨其耐寒性及耐寒机制,本研究测定了其3-9月份成虫在-10℃的耐寒性、过冷却点(SCP)、含水量、甘油含量和血淋巴热滞活性(thermal hysteresis activity,THA)以及冷驯化对增强光滑鳖甲成虫耐寒性的效果,还测定了光滑鳖甲不同发育阶段幼虫的SCP。结果表明:光滑鳖甲成虫的耐寒性和SCP具有明显的季节性变化,3月初SCP为-12.5℃,7月为-6℃,9月底为-13.6℃。4℃冷驯化能够提高光滑鳖甲成虫在-10℃的存活率,未驯化组在40min的存活率为50%,而驯化2h的为70%,驯化24h的为90%。虫体含水量在夏季有显著降低,3月、7月和9月结合水与自由水的比值分别为10.8∶1,2.6∶1和5.4∶1。成虫甘油含量与SCP的回归方程为y=-0.6204x-5.681,R2=0.7714。成虫血淋巴THA与过冷却点的回归方程为y=-5.26x-1.713,R2=0.9049。血淋巴THA比甘油浓度更能影响过冷却点降低的程度。随着幼虫的发育,其SCP逐渐降低。结果提示,光滑鳖甲通过提高结合水与自由水的比值、增加抗冻蛋白和甘油的含量使虫体保持较低的SCP,因而具有较高的耐寒性。
- 马延龙候凤马纪
- 关键词：光滑鳖甲耐寒性过冷却点热滞活性生理机制
- 一种提取荒漠拟步甲昆虫基因组DNA的新方法被引量：4
- 2009年
- 昆虫基因组DNA的提取是研究昆虫功能基因的关键环节。一些荒漠昆虫个体较小,不易除去的外壳会造成多糖污染,用普通动物组织DNA提取方法效果不佳。通过紫外分光光度测定、凝胶电泳检测、PCR反应及限制性酶切分析表明,CTAB-NaCl法是一种适用于拟步甲科小个体昆虫提取基因组DNA的好方法,蛋白质、多糖及RNA影响很低,完全能够满足后续DNA研究的需求。与传统方法相比简便快速,且成本低,尤其适用于拟步甲科昆虫DNA的分离。
- 刘璇张富春马纪
- 关键词：DNA提取分子生物学
