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国家教育部博士点基金(20060062007)

作品数：4 被引量：7H指数：2
相关作者：赵维明徐勇孔德领王燕铭程兆康更多>>
相关机构：天津医科大学南开大学哈尔滨医科大学更多>>
发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇前列腺
  • 3篇基因
  • 3篇基因载体
  • 3篇HSV-TK...
  • 2篇前列腺癌
  • 2篇自杀
  • 2篇自杀基因
  • 2篇自杀基因系统
  • 2篇腺癌
  • 2篇基因系统
  • 2篇G5
  • 2篇HSV-TK...
  • 1篇蛋白
  • 1篇阳离子
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇体外
  • 1篇体外实验
  • 1篇体外实验研究
  • 1篇前列腺特异

机构

  • 3篇南开大学
  • 3篇天津医科大学
  • 2篇哈尔滨医科大...

作者

  • 3篇王燕铭
  • 3篇孔德领
  • 3篇徐勇
  • 3篇赵维明
  • 2篇于琦
  • 2篇程兆康
  • 1篇杨阔
  • 1篇陈岳
  • 1篇张志宏
  • 1篇修有成
  • 1篇王刚

传媒

  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇中国肿瘤临床

年份

  • 2篇2010
  • 2篇2007
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
前列腺特异性双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43的构建及鉴定
2010年
目的 构建前列腺特异性双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43,为前列腺癌基因治疗实验研究奠定基础. 方法获取Cx43基因并克隆至pMD19-T Simple载体;合成HSV-TK基因并克隆到pIRES载体的MCS A中,得pIRES-TK;获取PSMAe/p并克隆至pIRES-TK中替换CMV启动子,得到pIRES-PSMAe/p-TK;将Cx43基因克隆到pIRES-PSMAe/p-TK的MCS B中,得到pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43,对此质粒双酶切鉴定并测序.pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43转染人前列腺癌细胞株LNcap,RT-PCR观察TK及Cx43基因表达. 结果合成的各质粒经双酶切、琼脂糖凝胶电泳可见目的 基因条带;pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43经测序与预期设计相符.pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43转染LNCaP细胞,RT-PCR显示成功表达TK及Cx43 mRNA. 结论成功构建了含HSv-TK及Cx43的双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43.
王刚
关键词：HSV-TK/GCV连接蛋白43
新型基因载体G5-PAMAM-D在前列腺癌HSV-tk/GCV自杀基因系统中的应用被引量：4
2007年
背景与目的:考察纳米级阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物(polyam idoam ine dendrimers,PAMAM-D)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性,为前列腺癌的基因治疗寻找新的基因载体。方法:以第5代PAMAM-D(G5-PAMAM-D)为载体将含增强型荧光蛋白(EGFP)基因片段的重组质粒pEGFP-C1转染至前列腺癌细胞系PC-3和22Rv1,成功表达EGFP后,再以G5-PAMAM-D为载体将含HSV-tk自杀基因的真核表达重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和22Rv1,转染48h后,对转染的两种细胞给予浓度为0、10、100、1000、10000μmol/L前体药更昔洛韦(Ganciclovir,GCV),24h后采用MTT比色法测定药物对细胞增殖的影响。制作前列腺癌皮下荷瘤小鼠,将G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk复合物瘤内注射,24h后腹腔注射GCV,观察这一复合物体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:荧光观察及FCM结果证明G5-PAMAM-D可将pEGFP-C1转入两种前列腺癌细胞并表达EGFP。采用G5-PAMAM-D将pcDNA3-tk重组质粒转染PC-3和22Rv1细胞,给不同浓度的前体药GCV后,实验组细胞与对照组相比有明显浓度依赖性生长抑制。荷瘤小鼠在给予瘤内注射G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk复合物后,行腹腔注射GCV,治疗后第40天,实验组肿瘤体积(1135±245mm3)与对照组裸质粒组(9965±2109mm3)和PAMAM-D组(8357±1956mm3)相比肿瘤生长明显被抑制(P<0.01),生存时间延长。结论:G5-PAMAM-D可作为前列腺腺癌自杀基因治疗的基因载体,有良好的应用前景。
赵维明徐勇王燕铭程兆康于琦孔德领
关键词：自杀基因前列腺癌非病毒载体
阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导STAT3-shRNA对前列腺癌生长的抑制作用被引量：2
2007年
目的探讨第5代阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D)作为小发卡RNA (shRNA)真核表达质粒的载体,进行前列腺癌RNA干扰基因治疗的可行性。方法根据增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)cDNA序列结构,分别设计构建表达EGFP mRNA、STAT3 mRNA的特异shRNA真核表达质粒pSilencing 4.1-EGFP-shRNA和pSilencing 4.1- STAT3-shRNA。在体外以G5-PAMAM-D为载体,将质粒pEGFP-C1和pSilencing 4.1-EGFP-shRNA共转染前列腺癌细胞PC-3、22Rvl,通过观察EGFP表达检测干扰效果以及转染效率;然后,以同样的方式将pSilencing 4.1-STAT3-shRNA转入前列腺癌细胞系,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对细胞生长的抑制作用,丫啶橙染色观察细胞凋亡。制作前列腺癌小鼠模型,将G5-PAMAM-D与质粒pSilencing 4.1-STAT3-shRNA的混合物注射人荷瘤鼠肿瘤内,观察对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验表明,G5-PAMAM-D可将pSilencing 4.1.EGFP-shRNA转入前列腺癌细胞,明显沉默EGFP的表达,并且G5-PAMAM-D可将pSilencing 4.1-STAT3-shRNA有效转入前列腺癌细胞中,明显抑制肿瘤细胞的生长,增加细胞的凋亡。体内实验证明,G5-PAMAM-D/pSilencing 4.1-STAT3-shRNA可抑制荷瘤鼠前列腺癌的生长,而各对照组肿瘤生长无明显抑制。结论G5-PAMAM-D作为基因载体,可将shRNA的真核表达质粒在体内外转入前列腺癌组织细胞,并有效表达shRNA;G5-PAMAM-D可能成为应用前景广阔的小干扰RNA(siRNA)的载体。
赵维明修有成徐勇王燕铭程兆康于琦孔德领
关键词：前列腺肿瘤RNA干扰纳米基因载体STAT3
叶酸修饰的G5-PAMAM-D介导HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗前列腺癌的体外实验研究被引量：1
2010年
目的:探讨叶酸修饰的第五代聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D-fol)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性。方法:以GS-PAMAM-D-fol为基因载体将含有自杀基因HSV-TK的重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和LNCaP,24h后以RT-PCR法检测HSV-TK基因在两种前列腺癌细胞系中的mRNA表达;再次转染后24h,对转染的两种细胞分别给予不同浓度的前体药物更昔洛韦(GCV),48h后采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞抑制率。结果:RT-PCR结果证明G5-PAMAM-D-fol可将重组质粒pcDNA3-tk转染2种前列腺癌细胞并转录HSV-TK基因。MTT实验反映出A组(G5-PAMAM-D-fol/pcDNA3-tk)对PC-3和LNCaP细胞有明显的杀伤作用,并且比B组(G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk)的细胞抑制率更高。C组(G5-PAMAM-D-fol)和D组(GS-PAMAM-D)随着GCV浓度的增加细胞生长并未受到明显的抑制,而且前者并未表现出比后者更明显的细胞杀伤作用。结论:G5-PAMAM-D-fol能够在体外将自杀基因重组质粒成功转入前列腺癌细胞并表达HSV-TK基因,其靶向性强且细胞毒性低。
王刚陈岳徐勇张志宏杨阔王燕铭孔德领赵维明
关键词：基因载体自杀基因前列腺癌
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