国家自然科学基金(39900179)
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
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- 相关机构：中国人民解放军第一军医大学军事医学科学院更多>>
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- 三种反义c-myc RNA对体外血管平滑肌细胞表型转换的影响被引量：1
- 2000年
- 目的 厂解反义ｃ－ｍｙｃ基因在平滑肌细胞中持续、稳定表达对细胞表型转换的影响。方法 分别载有ｃ－ｍｙｃ第１、２和３外显子反义片段的３种重组逆转录病毒表达载体ａＭ１、ａＭ２和ａＭ３被导入体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ），井于持续筛选后 １个月进行稳定表达检测。结果 ａＭ２的导入和稳定表达使 ＳＭＣ α－ＳＭ ａｃｔｉｎ的表达提高了 ４２％，而 ａＭ１和 ａＭ３转染后的 ＳＭＣ α－ＳＭ ａｃｔｉｎ表达明显下降。另外，在转染了 ａＭ２的 ＳＭＣ的超微结构中普遍出现明显的肌丝束，而ａＭ１和ａＭ３组则呈现明显的细胞退行性变。结论 反义 ｃ－ｍｙｃ ａＭ２载体的稳定表达在体外使 ＳＭＣ出现了收缩表型的逆转或部分逆转，而ａＭ１和ａＭ３则无此功能。
- 曾嵘李进戴云刘小蓉安靓
- 关键词：反义表型转换血管平滑肌细胞
- 全文增补中
- 三种反义c-myc RNA对HL-60细胞凋亡的影响被引量：1
- 2001年
- 目的 :了解和比较不同的反义c myc基因导入对HL 60细胞凋亡的影响。方法 :将分别载有c myc第 1、2和3外显子反义片段的三种重组逆转录病毒表达载体aM 1、aM 2和aM3导入体外培养的HL 60 ,并观察基因稳定表达对靶细胞凋亡的影响。结果 :(1 )光镜下aM2、aM 3组细胞核质比例明显缩小 ,出现凋亡小体等凋亡的形态特征 ;(2 )透射电镜下显示反义载体的导入使细胞胞质中出现了大量的自噬体和自噬泡 ,该现象的出现以aM1组为主 ;(3 )反义c myc导入引起HL 60中ACP酶活性增高 (aM1 >aM 3 >aM2 ) ,尤其是aM 1组 ,约提高了 86%。 (4 )流式细胞仪显示aM 2和aM3的瞬时和稳定表达都诱使HL 60凋亡率增高、细胞体积缩小、核质比减小 ,aM 1则无上述凋亡诱导作用。结论 :aM 2、aM3的导入促使HL 60出现了凋亡样改变 ,而aM 1则主要使细胞出现自噬。
- 曾嵘李进周生李秀森
- 关键词：白细胞髓细胞白血病细胞凋亡HL-60
- 三种反义c-mycRNA稳定表达对HL-60细胞生长、增殖的影响
- 2001年
- 目的 比较不同的反义 c- myc基因导入对 HL- 60生长、增殖的影响。方法 将分别载有 c- myc等 1、2和 3外显子反义片段的三种重组逆转录病毒表达载体 a M1、a M2和 a M3导入体外培养的 HL- 60 ,观察对靶细胞生长、增殖的影响。结果 ( 1 )三种载体抑制了 c- Myc的表达 ,抑制作用 a M2 >a M1 >a M3;( 2 ) a M2使 HL- 60 Go/G1细胞增多 ,S期减少 ,DNA和总蛋白合成减少 ;a M1影响轻微 ;a M3作用相反 ;( 3) a M2使 HL- 60 PCNA表达减少 43.8% ,而 a M1和 a M3增强表达 ;( 4 ) a M2明显抑制细胞的生长、增殖活性和软琼脂集落形成能力 ;a M1作用相反 ;a M3抑制生长、增殖活性 ,但促进其集落形成能力。结论 a M2持续表达抑制了 HL- 60的生长。
- 曾嵘
- 关键词：髓系白血病细胞基因治疗白血病反义C-MYC基因导入RNA
- 三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响
- 2000年
- 目的 了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用，找出最佳的反义封闭靶区，为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据。方法 系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体（aM1、aM2和aM3），分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段，经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞，并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测。结果 与对照组相比，aM2使c-myc表达量减少了37.6%，aM1为对照组的98.8%，而aM3却使c-myc表达增高21.7%；与此同时，aM1和aM2组增殖细胞核抗原（PCNA）表达分别下降了36.0%和30.9%，而aM3组PCNA表达增高。DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高（aM2>aM1>aM3），S 期比例略下降（aM1>aM2>aM3），但尚未有DNA合成量的明显改变。结论 反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达，但对细胞周期和DNA合成的影响尚小。
- 曾嵘刘小蓉李进戴云安靓
- 关键词：反义RNA基因转染血管平滑肌细胞C-MYC
- 三种反义c-mycRNA对HL-60细胞分化的影响
- 2001年
- 曾嵘李进周生李秀森
- 关键词：白血病HL-60细胞细胞分化反义C-MYCRNA
- 三种反义c-mycRNA对成纤维细胞NIH3T3的体外生物学效应被引量：1
- 2001年
- 目的 了解反义c myc基因稳定整合对正常细胞的影响。 方法 将分别载有c myc第 1、2和 3外显子的反义片段的 3种反义c myc重组逆转录病毒表达载体aM1、aM2和aM3,导入c myc正常表达的正常小鼠成纤维细胞系NIH3T3,并在基因稳定表达后进行各项检测。 结果 3种反义载体导入明显抑制了NIH3T3c myc表达(抑制作用aM2 >aM3>aM1)、PCNA表达 (aM2 >aM1>aM3) ,使细胞体外生长增殖活性下降 (下降程度aM2 >aM1>aM3) ,aM2、aM3还使细胞周期出现了延长和DNA合成减少 ,并使NIH3T3软琼脂集落形成能力下降 (aM2 >aM3)。 结论 反义c mycRNA的导入对正常细胞的生长增殖能力有抑制作用 ,提示局部治疗和靶向治疗在反义c
- 曾嵘戴云安靓刘小蓉李进
- 关键词：反义C-MYC成纤维细胞RNANIH3T3
- 三种反义c-myc RNA稳定表达对血管平滑肌细胞生长、增殖的影响被引量：3
- 2000年
- 目的 研究反义基因在细胞中持续、稳定表达对平滑肌细胞生长增殖的影响。方法 将分别载有c(myc第1、2和3外显子反义片段的三种重组逆转录病毒表达载体aM1、aM2和aM3导入大鼠主动脉平滑肌细胞（SMC），并于持续筛选后1个月进行稳定表达检测。结果 aM1和aM2能持续抑制靶细胞Myc蛋白表达（分别为对照表达量的59.7%和81.3%）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达（分别为对照表达量的52.4%和51.9%），抑制靶细胞的生长增殖活性并以aM2作用最强（抑制率达到30%），同时，aM2还有一定的延长细胞周期和减少DNA合成的作用，而aM3作用相反。另外，与瞬时表达相比，外源基因在靶细胞中的作用并非一成不变，而基因转染操作对细胞的影响会随着细胞的代偿逐渐减少并在短期内消失。结论 对c(myc中不同区域进行反义封闭会产生不同的效应，对其转录活性区进行封闭可取得最强的细胞生长抑制。而靶细胞对对外源基因导入可能具有“纠正作用”。
- 曾嵘刘小蓉李进安靓戴云
- 关键词：血管平滑肌细胞基因治疗C-MYCRNASMC
