江苏省高校高新技术产业发展项目(JSB05-45)
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 相关作者：邱玉华刘玉华徐耀瑜马泓冰王艳茹更多>>
- 相关机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校高新技术产业发展项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫老化与T淋巴细胞功能性分子的改变被引量：14
- 2009年
- 免疫老化(senescence)是机体代谢过程中的一个必然阶段,免疫系统参与机体正常的老化过程,是机体衰老的主要调节系统之一。随着年龄的增长,免疫细胞发生增龄性改变。T淋巴细胞是机体重要的介导细胞免疫的效应性细胞,其在免疫老化过程中,诸多功能性分子如免疫突触形成所涉及的分子、T细胞活化所需的协同刺激分子及凋亡相关分子等均发生增龄性改变,从而导致机体正常的免疫应答功能下降或出现异常,致使老年人易罹患肿瘤、感染及自身免疫性疾病等。
- 刘玉华邱玉华
- 关键词：免疫老化T淋巴细胞增龄性改变
- 抗人CD86人-鼠嵌合抗体的构建及在CHO细胞的表达被引量：9
- 2008年
- 从分泌鼠抗人CD86单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:1D1)中抽提总RNA,采用简并引物,经RT-PCR扩增单抗VH和VL的DNA编码区基因。通过SMART-PCR扩增VH和VL基因相应的信号肽序列。采用基因重组技术,将单抗VH、VL基因及其相应信号肽序列,与人IgG1的CH基因、Cκ链基因进行拼接,构建人-鼠嵌合抗体基因的表达质粒pIRES/1D1。转染293T细胞进行瞬时表达,采用流式细胞术分析,转染上清与L929-CD86基因转染细胞的阳性结合率为97.6%。既而转染CHO细胞,经G418筛选,获取稳定分泌嵌合抗体的基因转染细胞株(CHO-ch1D1)。收集无血清培养基的培养上清,采用Protein G亲和层析柱分离纯化,经Lowr法定量。从上清中获取的嵌合抗体蛋白的得率为3.066 mg/L。经进一步间接免疫荧光及流式细胞术分析,纯化嵌合抗体与L929-CD86基因转染细胞,及Daudi细胞膜型CD86分子的阳性结合率分别为98.5%和95.7%。将嵌合抗体(终浓度为5μg/ml)加入到Daudi细胞的培养体系中,经显微镜观察及MTT法分析,嵌合抗体对Daudi细胞的生长具有抑制作用(P<0.05)。本研究获取的嵌合抗体在CD86分子的基础和应用研究中具有重要的价值。
- 胡玲玲徐耀瑜陈永井马泓冰程钢刘玉华王艳茹孙杰陈明心邱玉华
- 关键词：CD86单克隆抗体嵌合抗体
