广西壮族自治区自然科学基金(0991231)
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 相关作者：刘剑仑韩璐璐杨华伟韦薇李德全更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- RSK4过表达真核表达载体对人乳腺癌移植瘤体内侵袭和转移的影响被引量：5
- 2012年
- 目的构建稳定过表达RSK4基因的MD-MB-231乳腺癌细胞株，观察过表达RSK4基因对乳腺癌体内成瘤的影响。方法将pcDNA3．1／Neo和pcDNA3．1／Neo—RSK4分别转染进人乳腺癌细胞MD—MB-231，筛选出稳定的细胞株，命名为空载体组（MN10，MN11）和转染组（MR11，MR12）并种植至免疫缺陷小鼠（SCID）皮下组织，建立SCID人乳腺癌MD—MB^31细胞移植瘤模型，种植后6—10周观察移植瘤的生长、侵袭转移的情况。结果筛选出稳定表达的乳腺癌细胞株MR11和MR12和空白对照组MN10和MN11；构建SCID的人乳腺癌移植瘤模型，解剖鼠发现：注射MN10和MN11对照组细胞后6周，SCID鼠均有转移瘤生成10／10，而注射MR11和MR12细胞组后在第6周和7周分别有6／10和7／10鼠成瘤，注射MR11或MR12细胞的鼠在所形成的肿瘤大小和重量上明显小于MNIO和MN11对照组；注射10周后，RSK4高表达的MR11和MR12组有4只小鼠发生内脏转移瘤，而对照组有8只小鼠出现内脏转移瘤，HE染色发现发生在肺的转移灶MN10和MN11组明显多于MR11和MR12组。结论成功构建SCID人乳腺癌MD-MB-231细胞转移瘤模型，较真实模拟人乳腺癌生长过程，证实过表达RSK4基因在体内可抑制乳腺癌生长。
- 杨华伟刘剑仑廖德仲孙源陈祖舜张晓丽
- 关键词：蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶基因表达调控肿瘤转移
- p90核糖体S6蛋白激酶家族与恶性肿瘤被引量：1
- 2013年
- p90核糖体S6蛋白激酶(ribosomal S6 kinase,RSK)为Ras信号转导通路下游途径的重要调控因子,对Ras通路起调控作用。近年发现RSK家族与恶性肿瘤发生、发展密切相关。本文就RSK家族与恶性肿瘤的关系作简要综述。
- 杨华伟刘剑仑
- 关键词：恶性肿瘤
- RSK4对乳腺癌细胞增殖侵袭黏附相关基因表达水平的影响被引量：1
- 2013年
- [目的]探讨核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4 gene,RSK4)基因对乳腺癌细胞Ki-67、cyclin D1、CXCR4、HIF-1α、E-cadherin基因转录影响。[方法]分别构建RSK4干扰载体、过表达载体转染至乳腺癌MCF-7细胞及MDA-MB-231细胞中,RT-PCR比较实验组和对照组Ki-67、cyclin D1、CXCR4、HIF-1α及E-cadherin mRNA表达水平。[结果]干扰组CXCR4、HIF-1α、cyclin D1及Ki-67mRNA的转录水平分别为2.238±0.0711、1.672±0.0833、1.540±0.0115、1.390±0.0902,与空白对照组、阴性对照组相比均升高,但E-cadherin mRNA的转录水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组Ki-67、cy-clinD1、CXCR4和HIF-1α转录水平分别是0.603±0.0066、0.460±0.0155、0.424±0.0198、0.205±0.0082,与空白对照组、阴性对照组相比均降低,而E-cadherin mRNA转录水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]RSK4基因表达影响乳腺癌细胞增殖黏附相关基因Ki-67、cyclinD1、CXCR4、HIF-1α和E-cadherin mRNA转录水平。
- 李德全韩璐璐刘剑仑
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移细胞黏附
- 慢病毒介导的RSK4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:观察转染核糖体S6蛋白激酶4(RSK4)慢病毒表达载体对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力的影响。方法:构建特异性的RSK4慢病毒表达载体LV-RPS6KA6,稳定转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中,使用荧光定量PCR和蛋白印迹检测RSK4mRNA和蛋白的表达情况。用Cell Counting Kit-8实验检测转染后细胞的生长增殖情况。结果:稳定转染LV-RPS6KA6至乳腺癌MDA-MB-231细胞后,RSK4mRNA和蛋白的表达均明显上调(均P=0.000)。过表达RSK4的MDA-MB-231细胞生长被明显抑制,转染24,48,72,96h后,其生长抑制率分别为(10.5±1.8)%、(17.7±2.5)%、(27.1±3.7)%和(13.8±2.1)%。结论:稳定转染RSK4慢病毒表达载体可明显上调RSK4mRNA和蛋白表达,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖。
- 韦薇韩璐璐杨华伟刘剑仑
- 关键词：乳腺癌慢病毒增殖
- 慢病毒载体介导shRNA干扰对乳腺癌MCF-7细胞RSK4基因表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察慢病毒干扰载体(RSK4-RNAi-LV)转染对低侵袭、低转移潜能的乳腺癌MCF-7细胞中核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)基因表达的影响。方法设计合成特异性的RSK4 shRNA干扰体RSK4-RNAi-LV,稳定转染至乳腺癌MCF-7细胞中,应用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测RSK4 mRNA及其蛋白的表达情况。结果稳定转染慢病毒干扰载体至乳腺癌细胞后,72h开始检测到GFP荧光表达,90h后GFP荧光表达明显增强,RSK4 mRNA及其蛋白的表达均被明显抑制,抑制率分别为98.2%和80.1%。结论稳定转染RSK4-RNAi-LV可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞中RSK4 mRNA及其蛋白的表达。
- 韩璐璐刘剑仑韦薇
- 关键词：乳腺肿瘤SHRNA干扰慢病毒载体
- 核糖体S6蛋白激酶4对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学特性的影响
- 2013年
- 目的 观察核糖体S6蛋白激酶4基因（RSK4）过表达对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响.方法 将细胞分为空白组、实验组和阴性对照组,采用病毒转染法,利用细胞集落实验、细胞计数试剂盒（CCK-8）法、细胞划痕实验、Transwell小室实验和细胞黏附实验探讨RSK4对MDA-MB-231细胞生物学特性的影响.结果 7d后3组细胞集落形成率分别为（21.280±0.114）％、（9.150±0.120）％、（19.080±0.108）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.CCK-8实验显示,实验组24、48、72和96h的吸光度（A值）分别为0.1790±0.0044、0.2090±0.0218、0.2230±0.0117、0.2680±0.0274.细胞划痕实验显示：实验组0、12、24、48 h细胞迁移距离分别是0、（0.9200±0.0735）、（1.4600±0.0510）、（2.0000±0.0316） mm.Transwell小室显示,实验组48 h细胞迁移实验中滤过膜细胞数为（273.000±2.2930）个；细胞侵袭实验中滤过膜细胞数为（89.000±1.208）个,以上均显示：实验组比空白对照组和阴性对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.而细胞黏附实验结果显示：实验组3h和6h的细胞黏附百分率分别为（0.0700±0.0037）％、（0.1920±0.0133）％,比空白对照组和阴性对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 RSK4过表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性.
- 李德全韩璐璐刘剑仑韦薇
- 关键词：乳腺癌生物学特性
