国家自然科学基金(39770293)
- 作品数：7 被引量：116H指数：6
- 相关作者：邹万忠郭华孙铭柱徐曼李玲更多>>
- 相关机构：北京医科大学北京大学中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 肾小管损伤时内皮素1、肿瘤坏死因子α的表达及其对离体肾间质成纤维细胞的影响被引量：18
- 1999年
- 目的 研究内皮素１（ＥＴ１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦα） 在肾小管上皮细胞的表达、肾小管的损伤及它们对肾间质成纤维细胞的影响。方法 应用肾小管上皮细胞及肾间质成纤维细胞的体外培养；建立肾小管损伤动物模型；应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 、免疫组化ＳＰ法染色、放射免疫测定（ＲＩＡ） 及双重免疫组织化学染色技术，并测定３ＨＴＤＲ 掺入率。结果 肾小管上皮细胞既有ＥＴ１ｍＲＮＡ和ＴＮＦαｍＲＮＡ 的表达（ＲＴＰＣＲ的扩增片段分别为５４６ ｂｐ 和４１５ ｂｐ） ，还有ＥＴ１ 及ＴＮＦα的蛋白合成及分泌；细胞培养上清中ＥＴ１ 和ＴＮＦα含量分别为１．４２ ｐｇ／ｍｌ 和０ ．５８ ｎｇ／ｍｌ；且肾小管损伤及再生过程中，ＥＴ１ 及ＴＮＦα表达增加。对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞分别加入ＥＴ１ 、ＴＮＦα，３ＨＴＤＲ掺入率较对照组明显增高（ Ｐ＜ ０．０５）；并证明肾间质成纤维细胞有ＥＴ受体（ＥＴＲ） ｍＲＮＡ及ＴＮＦ受体（ＴＮＦＲ１） ｍＲＮＡ的表达（ＲＴＰＣＲ 扩增片段分别为５４４ ｂｐ 和３４７ ｂｐ）。结论 损伤及再生的肾小管上皮细胞较正常时合成和分泌更多的ＥＴ１ 和ＴＮＦα，ＥＴ１
- 李玲邹万忠
- 关键词：肾小管损伤肿瘤坏死因子内皮素1
- 肾小管间质纤维化中转化生长因子β1的表达特征被引量：37
- 2000年
- 目的研究大鼠肾小管间质纤维化中转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）的表达特征。方法以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化实验模型，应用免疫组织化学（组化）、逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、原位杂交及 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测 ６只正常及３０只模型大鼠肾组织ＴＧＦ－β１蛋白及基因表达。结果６只正常大鼠肾组织ＴＧＦ－β１主要位于皮髓交界处肾小管上皮细胞，ＴＧＦ－β１免疫组化平均阳性表达率为（４．２±０ ．８）％；损伤的肾小管上皮细胞ＴＧＦ－β１表达增加，给药１～５周，３０只模型肾组织 ＴＧＦ－β１免疫组化平均阳性表达率分别为（８． ３± ０． ４）％、（９． ６± ０． ５）％、（ １１． ５± １． ０）％。（１６．６±０．８）％及（１７． ８ ±０．９）％。各实验组ＴＧＦ－β１平均阳性表达率均与正常对照组的差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）；实验组的ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达高于正常组，而且随着肾小管损伤和间质纤维化的日益加重，实验第５周ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ表达量最高。结论 ＴＧＦ－β１在肾小管间质纤维化中主要由受损伤的肾小管上皮细胞产生，通过自分泌及旁分泌途径发挥促纤维化作用。
- 孙铭柱徐曼邹万忠
- 关键词：转化生长因子Β1肾小管间质纤维化腺嘌呤
- 肾小管间质纤维化与单核巨噬细胞的关系被引量：10
- 2003年
- 目的 :探讨肾小管间质纤维化与单核巨噬细胞 (MC/MP)的关系。方法 :结扎大鼠一侧肾静脉 ,连续饲养2 5d ,制作大鼠肾小管间质纤维化模型。每 5天杀检取材。HE、PAS、PASM、Masson等染色方法观察MC/MP的聚集和肾小管间质纤维化病变 ;免疫组化和双重免疫组化观察肾间质MC/MP的聚集与增生 ;原位杂交、免疫组化观察单核细胞化学吸引蛋白质 1(MCP 1)、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)在肾内的表达分布。Westernblot检测病变肾脏MCP 1的表达。对不同时间点肾小管变性、肾小管间质纤维化程度、肾间质MC/MP聚集的数量及其中的增生比例、MCP 1和M CSF的表达进行评估分析。结果 :肾静脉结扎侧表现为肾小管变性萎缩、间质中MC/MP浸润、细胞外基质沉积等肾小管间质纤维化的典型病变。病变早期肾间质中有明显的MC/MP聚集 ,后期减少。表达增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)的单核细胞占一定比例 ,单核细胞的增生比例与聚集高度相关。原位杂交、免疫组化和Westernblot显示 ,病变肾组织中MCP 1、M CSFmRNA的表达主要位于变性的肾小管上皮细胞胞浆中 ,病变早期强 ,后期减弱。肾小管上皮细胞MCP 1和M CSF的表达与肾间质MC/MP的聚集高度相关。肾间质MC/MP的聚集与肾小管变性高度相关。结论 :肾小管间质?
- 郭华邹万忠
- 关键词：肾小管间质纤维化单核巨噬细胞病理学
- 碱性成纤维细胞生长因子对大鼠实验性肾小管损伤和间质病变的作用被引量：16
- 2000年
- 目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在大鼠肾小管损伤、再生以及肾间质病变过程中的作用。方法 应用Northern印迹杂交、原位杂交及免疫组织化学SP方法 ,观察在大鼠的庆大霉素中毒性肾小管损伤和再生过程中 ,bFGF及其受体 (FGFR1 )表达的情况 ,3 H TdR掺入法检测bFGF对培养的肾小管上皮细胞和肾间质成纤维细胞增殖的影响。结果 肾小管上皮细胞损伤和再生过程中 ,bFGFmRNA有表达 ,随着修复的增强 ,表达量逐渐增高 ;同时bFGF和FGFR1蛋白合成亦增加 ,主要分布于损伤及再生的肾小管上皮细胞 ,与mRNA分布一致。bFGF能够促进培养的肾小管上皮细胞和肾间质成纤维细胞的分裂增殖。结论 肾小管损伤和再生过程中 ,bFGF和FGFR1表达增强 ,一方面促进肾小管损伤的修复 ;另一方面还促进肾间质成纤维细胞增殖 。
- 杜爱萍邹万忠
- 关键词：肾小管损伤肾小管间质病变BFGF
- 大鼠尿酸性肾病肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达关系被引量：5
- 2008年
- 采用腺嘌呤灌胃法建立了大鼠实验性尿酸肾病动物模型,应用原位末端标记(TUNEL法)、免疫组化、原位杂交检测了6例正常及30例模型大鼠肾组织肾小管凋亡、增殖、表型转化现象及促纤维化细胞因子TGF-β1蛋白及基因表达状况.研究发现:尿酸性肾病发生发展过程中,肾小管上皮细胞存在明显的凋亡、增殖及表型转化现象.伴随着肾小管间质纤维化的形成,损伤肾小管凋亡、增殖、表型转化与转化生长因子β1(TGF-β1)表达呈增高趋势,且阳性表达细胞分布趋势一致:多位于尿酸盐沉积处损伤及再生的肾小管上皮细胞,可见凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达在肾小管上皮细胞间伴随发生的现象.在病变晚期,肾小管明显萎缩及扩张,肾间质异物肉芽肿形成及弥漫纤维化,肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达数量随残存肾小管上皮细胞的减少而呈下降趋势,但仍可见凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达在肾小管上皮细胞间伴随发生的现象.这些结果均表明尿酸性肾病致肾小管间质纤维化过程中,肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化是损伤肾小管上皮细胞的重要病理变化形式,肾小管上皮细胞通过增殖,完成损伤肾小管的再生;通过细胞凋亡,清除坏死细胞并抑制肾小管上皮细胞的过度增殖;增殖的肾小管上皮细胞通过表型转化及TGFβ1表达,成为细胞外基质和促纤维化细胞因子的重要来源细胞,在肾小管间质纤维化中发挥了核心作用.
- 孙锁柱程波吴西钊周艳敏邹万忠
- 关键词：尿酸性肾病肾小管间质纤维化凋亡增殖表型转化转化生长因子Β1
- 实验性肾小管间质纤维化中肾小管上皮细胞表型转化的研究被引量：22
- 2003年
- 目的 观察和研究肾小管间质纤维化过程中肾小管上皮细胞发生表型转化的现象及其形态特点。方法 结扎大鼠一侧肾静脉 ,制作大鼠肾小管间质纤维化模型 ,连续饲养 2 5d。每 5d杀检 5只 ,对肾脏重点检查 ,未结扎肾静脉的对侧肾作为对照 ,采用光镜、透射电镜、偏振光显微镜及免疫组织化学方法 [链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法 ]观察肾组织的病理变化以及肾小管上皮细胞的表型转化情况。结果 肾静脉结扎侧肾逐渐出现肾小管萎缩 ,肾间质淋巴、单核细胞浸润和纤维化等肾小管间质纤维化的典型病变。免疫组织化学观察发现 ,随着病变的发展 ,损伤的肾小管上皮细胞角蛋白表达逐渐减弱 ,而α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、转化生长因子 β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达逐渐增强 ,肾间质中也出现角蛋白阳性的间质细胞。透射电镜下可见肾小管上皮细胞内线粒体减少 ,内质网和微丝增多 ,并可见肾小管上皮细胞突破基底膜游离到肾间质中。天狼星红染色偏振光显微镜观察显示早期肾间质中Ⅲ型胶原增生为主 ,后期以Ⅰ型胶原为主。结论 在大鼠肾小管间质纤维化病变的发生和发展中 ,肾小管上皮细胞可转化为间质成纤维细胞 。
- 郭华邹万忠
- 关键词：肾小管间质纤维化上皮细胞表型转化
- 肾小管间质纤维化中成纤维细胞的转化生长因子β1及其Ⅰ型受体蛋白及基因表达检测被引量：16
- 2000年
- 目的 :研究腺嘌呤致大鼠肾小管间质纤维化模型的肾组织成纤维细胞中转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ型受体的表达。方法 :腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型 ,由模型肾组织培养肾间质成纤维细胞 ,应用免疫组化、逆转录PCR分别检测TGF β1及其Ⅰ型受体蛋白及mRNA的表达。结果 :成纤维细胞TGF β1、TGF β1I型受体免疫组化阳性 ;逆转录PCR可见 2 94bp的TGF β1及 34 5bp的TGF β1的Ⅰ型受体mRNA特异扩增带。结论 :在肾小管间质纤维化进程中 ,肾间质成纤维细胞是TGF β1的一个来源 ,而且也是其效应细胞 ,从而在TGF β1的作用下出现增生和合成细胞外基质的效应。
- 孙锁柱徐曼邹万忠
- 关键词：肾小管间质纤维化TGF-Β1
