广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0815009-3-5)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：毛燕覃绍敏扈荣良吴健敏刘烨更多>>
- 相关机构：广西兽医研究所广西动物疫病预防控制中心广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西青年科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 广西副猪嗜血杆菌病分子流行病学调查被引量：2
- 2010年
- 根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)16S rRNA(M75065)序列设计1对引物,对从广西9个市26个地县采集的305份病料进行PCR鉴定。结果表明,305份病料有14份为阳性,阳性率为4.59%,扩增片段大小为822 bp;经Sph I、BamH I双酶切进一步鉴定,可以确定检测到的14份阳性材料均为Hps;将PCR扩增产物连接pMD18-T载体并转化DH5α感受态细胞,然后进行测序及同源性比较分析,发现14份阳性材料之间的核苷酸同源性均在94.5%以上,与国外Hps的核苷酸同源性均在94.3%以上,说明Hps已在广西发生存在。
- 马琳谭颖翌覃绍敏陆芹章
- 关键词：分子流行病学PCR
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M基因重组腺病毒的构建及表达被引量：2
- 2012年
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组腺病毒活载体疫苗,本研究将PRRSV GP5和M基因串联表达盒定向克隆至穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA多克隆位点处,获得重组穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA-GP5-M,与骨架质粒pacAd5 9.2-100共转染293AD细胞,包装出含有GP5和M基因的重组腺病毒rAd5-GP5-M。应用PCR技术、间接免疫荧光、Western blot分析,结果表明,GP5和M基因已经被成功整合到了腺病毒基因组上,且GP5和M蛋白在293AD细胞上均得到了表达;滴度测定表明,该重组腺病毒rAd5v-GP5-M的TCID50为10-6.5/mL;连续传代试验表明该重组腺病毒可在细胞内稳定繁殖,有效地转录并表达GP5和M蛋白,具有较高的遗传稳定性。该研究为PRRSV重组腺病毒疫苗的研制打下了基础。
- 高博马玲张念毛燕陈凤莲张守峰刘烨张菲扈荣良吴健敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因M基因重组腺病毒
