国家自然科学基金(31100449)
- 作品数:7 被引量:23H指数:3
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- 相关机构:东北林业大学牡丹江师范学院更多>>
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- 白桦SPL8转录因子基因的分离及转录表达分析被引量:7
- 2013年
- 利用RACE和RT-PCR技术对白桦SPL转录因子SPL8进行克隆,获得cDNA全长为1 230 bp,其完整的开放读码框为930 bp,编码309个氨基酸,包含1个高度保守的SBP域,预测编码蛋白的分子质量为34.32 ku,理论等电点为9.08。将该基因命名为BplSPL8,并将它的cDNA序列提交到Genbank,登录号为JQ354964。同源序列比对分析表明,白桦BplSPL8与拟南芥AtSPL8、大豆GmSPL8、马铃薯ScSPL8、葡萄VvSPL8的氨基酸序列相似性分别为55.4%、73.1%、63.9%、70.8%。qRT-PCR结果显示,BplSPL8基因在不同组织均有表达,但在雄花序中最高,在种子和成熟花粉中最低;BplSPL8在雄花序不同发育阶段的表达量不同,另外,在雄花序发育突变体各组织中的表达水平均低于野生型。推测BplSPL8在白桦雄花序发育中的特定阶段起重要作用,其异常表达可能与雄性不育有关。
- 官民晓刘雪梅张妍刘瀛孙丰宾
- 关键词:白桦转录QRT-PCR突变体花发育
- 纤维素合酶的组成以及蛋白间的相互作用
- 2013年
- 活细胞成像技术极大地加深了人们对纤维素沉积分子机制的理解。微管细胞骨架参与影响了纤维素合酶复合物的正常分布及其组织和动力学特征。随着纤维素合酶互动蛋白1(CSI1)的最新研究发现,纤维素微纤丝和微管间的关系十分紧密。CSI1是首个与纤维素合酶复合物相关联的非CESA蛋白,这给人们今后研究纤维素合酶开辟了许多新的机会。文中综述了纤维素合酶复合物(CSCs)的组成及纤维素蛋白间的相互作用。
- 孔雪张翠霞暴帅
- 关键词:微管
- 白桦雄花序发育早期和中期差异表达基因的cDNA-AFLP分析
- 2014年
- 白桦雄花发育周期较长,从出现雄花序至花粉成熟经历近一年,其发育早期和中期是决定雄配子体发育的重要时期。采用cDNA-AFLP方法对白桦早期和中期发育雄花序进行了差异表达谱分析,共得到了62个TDFs,其中30个TDFs与Genbank中的基因具有较高的同源性,其它32个是未知序列。GO分析结果显示,这些已知基因主要参与代谢过程、细胞过程、刺激应答、生殖、信号传导和生物调控等生物学过程,其分子功能主要涉及催化活性、结合分子功能、酶调节活性和转运活性等;发现了参与生殖和雄花发育的两个重要TDFs,Bplbs658和Bplbs199。另外,选择11个TDFs进行不同组织的qRT-PCR转录表达分析,结果表明这些基因不仅参与花发育,也参与营养组织的发育,但各自具有不同的组织表达特征。
- 暴帅孔雪邢磊张翠霞官民晓赵丽红刘闯刘雪梅
- 关键词:白桦花发育雄花序
- 白桦雄花突变体早期发育差异表达基因的cDNA-AFLP分析被引量:10
- 2012年
- 白桦是雌雄同株的单性花树种,已发现的天然的雄花序突变体,其结构和生殖发育均不同于正常雄花序,显示出明显的雄性不育特征。为揭示该雄花突变体的发育机制,采用cDNA-AFLP分子标记技术,分析白桦雄花突变体发育早期的差异基因表达谱,共获得81个ESTs,51个ESTs与GenBank中的基因相似性较低,视为新基因,30个ESTs与已知蛋白具有较高同源性。GO和KEGG对其功能的注释表明,这些蛋白参与催化活性、结合活性、生物调节信号转导、生物合成以及基因编码转录因子和花发育等过程。选择5个与白桦花发育有关的ESTs,分别为MAP激酶、泛素结合酶、纤维素合成酶、热激蛋白和细胞色素P450,应用Real-time RT-PCR检测它们在白桦雄花突变植株的不同组织和雄花发育过程的转录表达,结果表明,这些基因在白桦突变植株中表达水平发生不同程度的上调或下调表达,推测它们参与白桦营养生长和生殖发育,并与雄花的迟缓发育、花药和花粉发育异常等雄性不育特征有关。
- 刘雪梅刘瀛宋福南邢磊戴超杨传平
- 关键词:白桦突变体CDNA-AFLP转录表达
- 白桦开花位点Flowering Locus T(FT)基因的分离及其表达被引量:5
- 2012年
- FT及其同源基因在促进植物成花和发育阶段转变过程中起重要作用。应用RT-PCR和RACE技术分离了白桦FT基因的cDNA,全长为928 bp,其开放阅读框为525 bp,编码174个氨基酸。预测的蛋白质分子量为19.6kDa,理论等电点为7.73。该预测蛋白序列含有保守的PEBP蛋白结构域,命名为BplFT,并在GenBank注册,登录号为JQ409561。该基因序列同其它16种植物的相似性为74%~93%,其中与无花果(Ficus carica)的相似度最高为93%,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)的相似度最低为74%,并构建了该基因序列的进化树。通过qRT-PCR的方法检测BplFT基因在白桦不同时期不同组织中的转录表达,在营养器官的表达高于花器官,成熟组织要高于幼嫩的组织,在成熟茎中的表达量最高,推测BplFT基因在成熟的营养器官发育中起重要作用,并可能参与调控次生细胞壁的形成。另外,选择了白桦雄花序突变体进行该基因的转录表达分析,该基因在突变体雌花序、雄花序、幼叶及幼茎中均为上调表达,预示着BplFT基因不仅仅参与营养组织发育,在花器官发育中也具有一定的作用。
- 马丽丽邱丽丽付扬威荆瑞瑞刘雪梅
- 关键词:白桦FT转录表达QRT-PCR花发育
- 白桦钙调蛋白基因CaM的分离及其转录表达被引量:3
- 2011年
- 钙调蛋白(CaM)是生物细胞内的重要调控蛋白,参与调节细胞内一系列酶的活性及各项生命活动。应用RACE和RT-PCR技术克隆了白桦的钙调蛋白基因CaM的全长cDNA,该基因长631 bp,开放阅读框(ORF)为450 bp,编码149个氨基酸,预测编码蛋白的相对分子质量为16.85 kDa,理论等电点为4.11,经过对其推测的氨基酸序列进行功能结构域预测,具备CaM典型的EFh结构域,将该基因命名为BpCaM。多序列比对与系统进化树分析结果显示,该基因序列同其它植物的CaM序列相似性均在97%以上。以白桦actin基因作为内参基因,利用定量PCR技术分析BpCaM基因在各发育时期的表达情况,结果表明,BpCaM基因在营养器官的表达高于花器官,幼嫩的组织要高于成熟组织,白桦BpCaM基因在各个器官组织均有表达,但表达量有差异。另外,对白桦雄花突变体进行了转录表达分析,结果显示在雌花、幼茎和幼叶中BpCaM基因在突变植株中上调表达,说明BpCaM基因参与多种组织的发育。
- 孙丰宾魏继承刘瀛张妍马丽丽付扬威刘雪梅
- 关键词:白桦钙调蛋白转录表达
- 白桦雌花发育前期和中期差异基因表达分析
- 2015年
- 白桦为雌雄同株的单性花树种,在木本植物花发育研究中有着重要作用。本文旨在初步确定白桦雌花发育过程中的关键时期大孢子发生(前期)和配子体发育(中期)过程中基因表达及调控的差异,同时挖掘与雌花发育相关的基因。首先,运用细胞学方法确定试材雌花的发育时期。其次,采用抑制消减杂交(SSH)技术,分别以白桦前期和中期雌花序的c DNA作为tester和driver,建立正、反向抑制消减杂交c DNA文库:BHHQ和BHHZ。共获得1 406个高质量的EST序列,其中787个与数据库中的已知核酸或蛋白序列有较高同源性,47个可能与花发育相关。GO分析结果表明,这些基因34.96%参与生物合成,16.45%参与细胞组件,48.59%参与分子功能。另外,选择6个与花发育相关EST进行qRT-PCR分析,结果显示这些基因在不同组织中都有一定表达。其中bhhq.408,bhhq.435,bhhz.359,bhhz.215在生殖器官中的表达明显高于营养器官;bhhq.254,bhhq.190在绝大多数组织中均有一定表达,说明这些基因不仅参与生殖器官的发育,也在营养器官中发挥一定的作用。
- 赵丽红周菲官民晓刘闯赵鑫刘雪梅
- 关键词:花发育白桦单性花转录表达