长沙市科技局科技项目(K0904150-11)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。结果该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。
- 李文悌孙菲王晓春
- 关键词：甲型H1N1SYBR
- 分子技术在流感病毒诊断中的应用
- 2011年
- 流感病毒（influenza virus）属于正黏病毒科,根据病毒内部蛋白抗原性的不同分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型。根据病毒表面结构蛋白血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）抗原性的不同,又将A型流感分为不同的血清亚型,已发现有15种HA亚型（H1～H15）和9种NA亚型（N1-N9）。检测流感病毒的方法主要有：病毒分离培养、血清学诊断、抗原检测、核酸检测。病毒分离培养和血清学诊断耗时，敏感性差；抗原检测结果的特异性受抗体纯度影响较大，
- 李勃孙菲李文悌王晓春
- 关键词：流感病毒逆转录-聚合酶链反应
