目的利用谷胱甘肽 S 转移酶(GST)融合基因表达系统表达、纯化及鉴定 HEVpbl66-GST 融合蛋白,为研制戊型肝炎诊断抗原探索新的途径。方法由本室制备的重组大肠杆菌(E.coli)B121株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导 HEV pb166-GST 融合蛋白表达,用 BDBiosience GST 蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和 Western blot 对纯化的蛋白进行鉴定,并对实验条件和结果进行分析。结果在 LB 培养液中的 E-coli B121株能稳定、高效表达 HEV pbl66-GST 融合蛋白;纯化后的成分单一,仅在43 000处有表达,该蛋白能被 GST 特异性抗体识别。结论我们的方法可获得高效的重组 HEV pbl66-GST 融合蛋白,为进一步研制戊型肝炎诊断性抗原奠定了基础。
