江苏省科技厅基金(BG2005322)
- 作品数:10 被引量:152H指数:8
- 相关作者:洪青李顺鹏洪源范沈雨佳蒋新更多>>
- 相关机构:南京农业大学中国科学院更多>>
- 发文基金:江苏省科技厅基金国家自然科学基金土壤与农业可持续发展国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达被引量:22
- 2008年
- 高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBC19-amy,并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis1A752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌B.subtilis1A752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性由蛋白质本身的氨基酸序列决定的.
- 董晨曹娟张迹沈标
- 甲氰菊酯降解菌JQL4-5的分离鉴定及降解特性研究被引量:39
- 2006年
- 从农药厂废水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲氰菊酯为唯一碳源生长的细菌,命名为JQL4-5.根据其生理生化特征和16S rDNA(GenBank Accession No.DQ177525)序列相似性分析,将该菌株鉴定为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonassp.).该菌株在24h内对20 mg/L的甲氰菊酯的降解率达到99.8%.降解甲氰菊酯的最适温度为30℃,pH为7.0,降解速率与初始接种量呈正相关.酶的定域试验表明,降解甲氰菊酯的酶为胞内酶.
- 洪源范洪青武俊张忠辉李顺鹏
- 关键词:甲氰菊酯生物降解
- 遗传稳定型六六六、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建及特性研究被引量:10
- 2008年
- 通过转座子介导同源重组的方法,将甲基对硫磷水解酶基因mpd导入到六六六降解菌BHC-A的染色体上,构建了能同时降解六六六和甲基对硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.对其生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株没有差别,生长至对数期A600 nm值都可达到2.5;对六六六的降解特性和原始菌株相同,可在10 h内将5 mg/L的六六六完全降解.mpd基因在BHC-A-mpd中稳定表达,BHC-A-mpd可以降解多种有机磷类农药.该基因工程菌的构建为六六六和甲基对硫磷复合污染环境的生物修复奠定了基础.
- 陆鹏洪源范洪青蒋新李顺鹏
- 关键词:甲基对硫磷生物降解基因工程菌
- 自然土壤中苯酚降解菌的分离和系统发育分析被引量:4
- 2007年
- 采用富集培养的方法,从未受苯酚污染的自然土壤中分离得到5株能以苯酚为唯一碳源生长的细菌.根据生理生化特性和系统发育分析对它们进行了初步鉴定,菌株PHD-2为Ralstonia sp.,菌株PHD-4为Acinetobacter sp.,菌株PHD-5为Microbacterium sp.,菌株PHD-1和PHD-3均为Pseudomonas sp.,16S rRNA基因序列的同源性比较和系统发育分析表明自然土壤中的苯酚降解菌具有丰富的多样性.
- 王云端董小军王茜洪青蒋新李顺鹏
- 关键词:自然土壤苯酚降解菌系统发育分析
- 甲氰菊酯降解菌Sphingomonas sp.JQL4-5对污染土壤的生物修复被引量:17
- 2007年
- JQL4-5(Sphingomonassp.)是1株从长期受农药污染土壤中分离的甲氰菊酯降解菌,考察了其在实验室模拟条件下对甲氰菊酯污染土壤的生物修复能力及其影响因素.结果表明,降解菌株在灭菌土壤中的降解效果要略好于未灭菌土壤,在土壤外源添加降解菌106CFU.g-1,温度20-40℃,pH为6.5-7.5的条件下,该菌株能有效降解土壤中10-200 mg.kg-1的甲氰菊酯.可以将其应用于甲氰菊酯污染土壤的生物修复.
- 洪源范洪青沈雨佳李顺鹏
- 关键词:甲氰菊酯生物修复
- 大叶白蜡的离体培养与快速繁殖被引量:15
- 2006年
- 洪源范沈雨佳洪青李顺鹏
- 关键词:大叶白蜡快速繁殖离体培养诱导培养基增殖培养基植物名称
- 中度嗜盐菌Halomonas sp.BYS-1耐盐相关DNA片段的克隆被引量:6
- 2006年
- 通过固体亚硝基胍诱变获得了Halom onassp.BYS-1的盐敏感突变株BYS-1M.以pBBR1MCS-2为载体在E.coliDH5α中构建了BYS-1的基因文库.以文库菌E.coliDH5α(pBBR-X)为供体菌、E.coliWD803(pRK2013)为辅助菌、BYS-1M为受体菌进行三亲接合,筛选到了恢复耐盐性能的接合子HR-23,提取接合子HR-23的重组质粒pHR23,酶切确定其插入的耐盐相关DNA片段大小分为5.4 kb.该片段为Halom onassp.BYS-1耐盐相关基因的克隆奠定了基础.
- 洪青徐剑宏王云端武俊张晓舟李顺鹏
- 关键词:中度嗜盐菌克隆
- 阿特拉津降解菌ADH-2的分离、鉴定及其特性研究被引量:14
- 2009年
- 从长期施用阿特拉津的玉米地中采集土样,通过富集培养的方法分离出一株能以阿特拉津为唯一碳、氮源生长的细菌ADH-2,结合生理生化特性及16S rRNA基因的相似性分析将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)。该菌在10h内对100mg.L-1阿特拉津的降解率为99.9%。外加氮源能促进菌株的生长,但对阿特拉津的降解有轻微的抑制作用。外加蔗糖和葡萄糖能显著促进菌株的生长,但对阿特拉津的降解表现出显著的抑制。而淀粉既能促进菌株的生长又能促进阿特拉津的降解。对其降解基因的初步研究显示,该菌含有trzN、atzB和atzC3个阿特拉津降解相关基因。通过与本实验室另外两株阿特拉津降解菌比较,菌株ADH-2具有更好的应用潜力。
- 韩鹏洪青何丽娟严秋香李顺鹏
- 关键词:阿特拉津降解
- DDT降解菌株DB-1的分离、系统发育及降解特性被引量:17
- 2005年
- 从农药厂下水道污泥中分离、筛选到1株能够在好氧条件下降解DDT的细菌菌株DB-1,根据表型特征、生理生化特性及16S rDNA序列的系统发育分析,将菌株DB-1初步鉴定为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp).该菌株能在含酵母膏(40mg/L)的DDT(40mg/L)无机盐液体培养基中降解DDT,10d降解率达到83.6%,菌株DB-1在25~30℃长势较好,最适生长pH值为8.0.
- 张明星洪青何健许育新李顺鹏
- 关键词:DDT农药残留系统发育分析
- 辛硫磷降解菌XSP-1的分离、鉴定及其降解特性研究被引量:14
- 2007年
- 从农药厂污泥中分离到1株能以辛硫磷为唯一碳源生长的细菌,命名为XSP-1.根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为戴尔福特菌属(Delftiasp.).该菌株能在7 h内完全降解100 mg/L的辛硫磷.XSP-1降解辛硫磷的最适pH为7.0,最适温度为35℃,降解速率与初始接种量呈正相关,该菌株对甲基对硫磷、毒死蜱、杀螟硫磷也有较好的降解能力.根据已报道有机磷农药降解基因mpd的保守序列设计引物,未从该菌株中扩增到目标条带,但是该菌株是否带有新的有机磷农药降解基因仍需要进一步研究.
- 沈雨佳洪源范洪青蒋新李顺鹏
- 关键词:辛硫磷生物降解