国家自然科学基金(81171048)
- 作品数：31 被引量：47H指数：4
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- 去氢紫堇碱对小鼠完全弗氏佐剂导致的机械性痛觉过敏的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察去氢紫堇碱（DHC）对小鼠完全弗氏佐剂（CFA）导致的机械性痛觉过敏的影响。方法采用随机数字表法将40只ICR小鼠分为4组（CFA实验中，实验组8只，对照组8只；自发活动及脏器系数测定实验中，实验组12只，对照组12只），小鼠右后足底皮下注射CFA建立疼痛模型，模型建立第3天实验组腹腔注射10mg／kg DHC，对照组腹腔注射溶媒（10％DMSO），测定给药前及给药后0．5h，1h，2h，3h小鼠机械缩足反射阈值（PWMT）。测定DHC对小鼠自发活动和脏器系数的影响。结果实验组与对照组小鼠的基础PWMT值差异无统计学意义[（10．27±1．34）g vs（10．28±0．35）g，P〉0．05]。与对照组相比，实验组小鼠在给药后0．5h，1h，2h，3h的PWMT升高，差异有统计学意义[0．5h：（8．18±0．87）g vs（4．85±0．65）g；1h：（7．85±0．59）g vs（4．84±0．54）g；2h：（7．36±0．49）g vs（4．90±0．59）g；3h：（6．66±0．45）g vs（5．00±0．36）g；均P〈0．01]。与对照组相比，实验组小鼠2min内穿越格子数及前肢抬起站立次数的差异无统计学意义（P〉0．05），对小鼠肝、肾、脾、心、肺和大脑脏器系数的影响差异无统计学意义（P〉0．05）。结论DHC可以有效缓解小鼠CFA导致的机械性痛觉过敏。
- 殷智宇楚帅帅孙青李璐顾小萍马正良
- 关键词：去氢紫堇碱完全弗氏佐剂
- 鞘内注射驱动蛋白17反义寡核苷酸对骨癌痛小鼠脊髓水平mLin10和NR2B蛋白表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨鞘内重复注射驱动蛋白17（Kinesin superfamily 17,KIF17）反义寡核苷酸对骨癌痛小鼠脊髓水平mLin10（mammalian orthologue of the caenorhabditis elegans LIN-10,mLin10）和NR2B（the 2Bsubunits of N-methyl-D-aspartate Receptor,NR2B）蛋白表达的影响.方法 56只雄性C3H/HeJ小鼠,4～6周龄,体质量20～25 g,随机数字表法分为假手术组（S组,n=20）和骨癌痛组（T组,n=36）.T组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射约含2×105个NCTC2472纤维肉瘤细胞的最小必须培养基（α-MEM）20μl制备骨癌痛模型,S组小鼠注射不含肿瘤细胞的α-MEM 20μl.各组于接种前（base）、接种后第4,7,10,14天行痛行为学测试并在相应时间点取24只小鼠用western blot法测定脊髓KIF17、mLin10和NR2B蛋白含量.再将T组剩余24只小鼠随机分为T1,T2,T3组,每组8只.接种后第14天起,连续6d同一时间行鞘内穿刺给药,S组和T1组注射5μl生理盐水,T2组和T3组分别注射KIF17正义、反义寡核苷酸5μg/5μl.连续给药,第2～6天行痛行为学测试,第6天再次测定脊髓相关蛋白含量.结果 接种后7～14d,与S组和基础值相比,T组小鼠自发抬足次数增多,机械缩足阈值降低（P＜0.05）,与基础值[（0.65±0.15）、（1.06±0.06）、（1.01±0.14）]相比,T组小鼠脊髓水平KIF17、mLin 10和NR2B蛋白表达[14 d：（1.13±0.06）、（2.17±0.37）、（1.85±0.32）]增多（P＜0.05）;给药期间,与T1和T2组相比,T3组小鼠自发抬足次数减少,机械缩足阈值升高（P＜0.05）,给药后脊髓水平KIF17、mLin10和NR2B蛋白表达[（0.88±0.08）、（0.96±0.11）、（1.03±0.08）]减少（P＜0.05）.结论 重复鞘内注射KIF17反义寡核苷酸能明显改善骨癌痛小鼠的痛行为,并抑制了脊髓水平KIF17、mLin10和NR2B蛋白表达上调.
- 刘明刘玥侯百灵石林玉隽立芹顾小萍马正良
- 关键词：骨癌痛NR2B
- 环境温度对小鼠空间记忆、体重和运动的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究短时间外部高温和低温环境刺激对小鼠空间记忆、体重及运动的影响。方法C57BL／6雄性小鼠24只，2～3月龄，体重21—24g，将小鼠按照随机数字表法分为3组（每组8只）：对照组、高温组和低温组。3组小鼠在20℃常规饲养环境温度下适应3周后，将高温组小鼠置于38℃高温环境，低温组小鼠置于4℃低温环境，对照组置于20℃的室温环境中，环境温度刺激持续6h。采用小鼠智能鼠笼自动监测小鼠空间记忆和运动，每日记录各组小鼠体重水平变化。结果与对照组比较，高温组小鼠在处理后第3-6天出现明显的空间记忆提高[第3天（82±7）％比（74±8）％，第4天（87±12）％比（71±4）％，第5天（80±9）％比（6±＋6）％，第6天（84±6）％比（73±7）％]（P〈0．05），且其体重水平持续降至处理后第8天[第5天（27．5±1．2）g比（29．1±0．7）g，第6天（28．6±1．0）g比（30．1±0．7）g，第7天（28．7±1．0）g比（30．4±0．8）g．第8天（29．9±0．5）g比（30．6±0．5）g]（P〈0．05）。高温及低温处理后第2-4天均表现出明显的鼻触时间减少[第2天（361±74）s比（576±88）s，第3天（487±104）S比（631±81）S，第4天（532±88）S比（678±35）S]（P〈0．05）。低温组未见明显空间记忆及体重水平改变；在处理后3～4d表现为鼻触时间减少[第3天（501±103）S比（631±81）s，第4天（492±74）S比（678±35）s]（P〈0．05）。结论高温环境可升高小鼠空间记忆水平，减轻体重，减少运动量，低温环境可减少运动量。
- 楚帅帅王嫘夏天娇崔银马正良顾小萍
- 关键词：空间记忆代谢环境温度
- 艾芬地尔重复鞘内注射对骨癌痛模型小鼠痛行为的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察艾芬地尔重复鞘内注射对小鼠骨癌痛的影响。方法96只雄性C3H／HeJ小鼠随机分为肿瘤给药组（T组）、肿瘤对照组（c组）和假手术组（S组）。将含2×10^5个纤维肉瘤NCTC2472细胞的最小必需培养基（Ⅱ．MEM）注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内，制作骨癌痛模型。假手术组注入不含肿瘤细胞的α-MEM。T组在术后第14天开始，鞘内注射艾芬地尔5μl（10μg），每天1次，连续3天。C组和s组在相同时间点分别给予相同体积的溶媒。各组于接种前1天，接种后第3天、第5天、第7天、第10天、第14天、第17天、第19天和第23天检测痛行为学指标，包括小鼠的自发抬足次数、机械性缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PwTL）。按照分组在相应时间点处死小鼠，用Western-blotting方法检测脊髓腰膨大NR2B蛋白表达水平。结果肿瘤细胞接种后第14天，和s组及术前基础值相比，T组小鼠自发性抬足[（12．88±1．64）次]显著增加，PWMT（0．39±0．17）g和PWTL（11．59±1．67）S明显下降（P〈0．05）。脊髓NR2B蛋白（2．12±0．13）显著增加（P〈0．05）。肿瘤细胞接种后第17天，第19天，第23天，和第14天及C组相比，T组自发性抬足[（5．13±1．38）次，（4．70±1．58）次，（5．64±1．17）次]明显减少，PWMT[（1．10±0．65）g，（0．95±0．56）g，（1．05±0．26）g]和PWTL[（15．17±1．27）s，（15．93±2．18）s，（16．28±1．48）S]显著增加（P〈0．05）。脊髓NR2B蛋白[（1．42±0．17），（1．67±0．53），（1．14±0．79）]显著减少（P〈0．05）。结论重复鞘内注射艾芬地尔能显著改善骨癌痛小鼠的痛行为，降低脊髓NR2B蛋白。
- 杨许丽马正良朱洁崔昕龙梁樱申艳刘玥顾小萍
- 关键词：艾芬地尔骨癌痛小鼠
- K252a通过下调脊髓背角钾氯共转运体-2的表达缓解大鼠术后持续性痛被引量：1
- 2016年
- 目的 察鞘内注射酪氨酸激酶受体B（tyrosinekinasereceptorB，TrkB）抑制剂K252a对皮肤／肌肉切口牵拉术（skin／muscleincisionandretraction，SMIR）诱发的术后持续性痛大鼠脊髓背角钾氯共转运体-2（K＋-CI—cotransporter2，KCC2）蛋白表达的影响。方法采用随机数字表法将52只成年雄性SD大鼠随机分成假手术组（对照组）、SMIR组、SMIR＋-甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）组和SMIR＋K252a组，每组13只。于术前1d及术后3、7、12、22、32d测定大鼠机械缩足反射阈值（mechanicalwithdrawalthreshold，MWT），Westernblot测定术后7d大鼠脊髓背角KCC2蛋白的表达。结果与对照组比较，术后7、12、22d时MWT在sMIR组[（22．5±2．3）、（24．9±1．4）、（29．5±2．4）g]和SMIR＋DMSO组[（24．0±1．9）、（24．8±2．3）、（26．7±2．1）g]明显降低（P＜0．05）；与SMIR组比较，术后7、12、22d时MWT在SMIR＋K252a组[（31．6±1．7）、（36．1±2．0）、（38．1±2．1）g]明显上调（P〈0．05）。与对照组比较，术后7d时SMIR组和sMIR＋DMS0组的脊髓背角KCC2表达明显下调（P〈0．05），SMIR＋K252a组未检测到明显变化（P〉0．05）。与SMIR组比较，SMIR＋K252a组的脊髓背角KCC2表达明显上调（P〈0．05）。结论脊髓背角KCC2的表达变化可能参与了大鼠术后持续性痛的形成。
- 代淑红孙玉娥荣辉马正良顾小萍
- 关键词：酪氨酸激酶受体B
- 不同昼夜节律下小鼠肝脏生物钟基因表达的变化及异氟醚麻醉对肝脏生物钟基因表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨不同昼夜节律下小鼠肝脏生物钟基因表达的变化及异氟醚麻醉对肝脏生物钟基因表达的影响.方法 选择雄性C57/B6小鼠72只,2月龄,体重20 - 25 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=24）,昼夜节律正常组：采用12h光照（光照期8：00-20：00）与12 h黑暗（黑暗期20：00-8：00）交替,持续3周;昼夜节律颠倒组：采用12h黑暗（黑暗期8：00-20：00）与12 h光照（光照期20：00-8：00）交替,持续3周;麻醉组：光照处理同昼夜节律正常组,持续3周后,行麻醉处理.将自然时间转换为昼夜节律时间（CT）,以光照起点定为CT0.麻醉组在小鼠的相对觉醒期行2％异氟醚麻醉6h,即CT14开始,持续至CT20.于CT2、CT8、CT14、CT20时取下丘脑视交叉上核（SCN）和肝脏,采用实时定量聚合酶链反应方法测定Clock mRNA及Cry1 mRNA表达.结果 两种昼夜节律下小鼠肝脏与SCN中Crv1 mRNA、Clock mRNA表达都呈现节律性.与SCN比较,两种昼夜节律下肝脏Cry1mRNA及Clock mRNA表达的峰值相位均滞后;与昼夜节律正常组比较,麻醉组肝脏Cry1 mRNA及Clock mRNA表达的峰值相位滞后.结论 不同昼夜节律下肝脏生物钟基因呈现节律性表达,且异氟醚麻醉可导致其表达峰值相位的明显滞后.
- 崔银夏天娇马正良顾小萍
- 关键词：昼夜节律麻醉生物钟
- 鞘内注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响被引量：3
- 2012年
- 目的评价鞘内注射注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响。方法雄性C3H／HeJ小鼠288只，8～10周，体重18～22g，采用随机数字表法，将其随机分为6组（n=48）：对照组（c组）、假手术组（S组）、骨癌痛＋5出人工脑脊液组（BCP组）、骨癌痛＋14．4ugMgSO4组（M1组）、骨癌痛＋43．2ugMgSO4组（M2组）和骨癌痛＋86．4ugMgSO4组（M3组）。S组右侧股骨骨髓腔内仅注入20ul a-MEM；BCP组、M1组、M2组和M，组注入含有2×10^5个肿瘤细胞的20ul a-MEM制备小鼠骨癌痛模型，各组在接种肿瘤细胞后第14天分别定时鞘内注射人工脑脊液5ul、MgSO4 14．4ug／5ul、43．2ug/5ul、86．4ug／5ul。分别于给药前0．5h（T0）、给药后0．5、2、4、8h（T1～4）时测定机械缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PWTL），于T0-4时各组随机取8只小鼠处死取脊髓腰膨大，采用免疫组化法检测脊髓含2B亚基的NMDA受体（NR2B）的表达。结果与C组和s组比较，BCP组、M1组、M2组和M1组T0-4时PWMT和PWTL降低，脊髓NR2B表达上调（P〈0．05）；与BCP组比较，M2组和M，组T1-3时PWMT和PWTL升高，脊髓NR2B表达下调（P〈0．05）；与M2组比较，M3组T1～3时PWMT和PWTL升高，脊髓NR2B表达下调（P〈0．05）。结论鞘内注射硫酸镁可减轻小鼠骨癌痛，其效应呈剂量依赖性。
- 孙玉娥马正良郑亚国张娟顾小萍
- 关键词：硫酸镁骨肿瘤疼痛
- 鞘内注射miR-212反义锁核酸对骨癌小鼠痛行为的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究骨癌痛发展和维持过程中小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律及连续鞘内注射miR-212反义锁核酸LNA．anti—miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法本实验分为两个部分：（一）骨癌痛小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律：C3H／HeJ雄性小鼠36只，随机分为假手术组（sham组，n=18）和肿瘤组（T组，n=18）。sham组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM，T组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射纤维肉瘤细胞NCTC2472，建立骨癌痛模型。在术前1d，术后4d、7d、10d、14d、21d，sham组和T组各随机取三只小鼠处死，取脊髓腰膨大标本，用Real-timePCR的方法检测脊髓水平miR一212的表达情况。（二）连续鞘内注射LNA—anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响：C3H／HeJ雄性小鼠24只，随机分为四组：L组（鞘内注射LNA-anti—miR一212，n=6）、L’组（鞘内注射LNA＇-negativecontrol，n=6）、C组（鞘内注射溶媒无核酸酶水，n=6）和S组（假手术处理，n=6）。L组、L’组和C组小鼠在右侧股骨远端注射纤维肉瘤细胞NCTC2472，S组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM。所有小鼠于术前1d、术后4d、7d、10d、14d测小鼠痛行为指标，包括自发抬足次数和机械缩足阈值（PWMT），术后14d，L组、L’组、C组小鼠分别鞘内注射LNA—anti—miR-21212pmol／5山、LNA＇-negativecontrol12pmol／5I＊1和无核酸酶水5I＊1，连续鞘内注射7d，1次／d，每天测小鼠痛行为指标，至术后第21天。结果miR-212的表达变化表现为：与基础值相比，sham组和T组小鼠在术后第4天，脊髓水平miR一212明显升高（P〈0．05）；与基础值和sham组相比，T组小鼠脊髓水平miR-212在术后7d、10d、14d、21d均明显升高（P〈0．05）。连续鞘内注射LNA—anti—miR-212改善骨癌痛小鼠痛行为：术后19d至21d，与L’组和c组相比，L组小鼠PWMT[1
- 侯百灵刘玥夏天娇张羽孙蓓冷鑫周瑜倪坤顾小萍马正良
- 关键词：骨癌痛
- 鞘内注射NR2B9c对骨癌痛小鼠的镇痛效应被引量：1
- 2012年
- 骨肿瘤患者疼痛剧烈，临床上还缺乏疗效显著且副作用较小的治疗方法。N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体介导的脊髓水平中枢敏化是骨癌痛发生的重要机制之-。NR2B亚基C末端的氨基酸残基可特异性地与突触后致密蛋白95（PSD-95）的PDZ2结构域结合，有利于NMDA受体聚集于突触后致密区，并抑制NMDA受体内化，使含有NR2B哑基的NMDA受体在突触后致密区表达增多，介导了中枢敏化的发生。
- 崔昕龙孙玉娥杨许丽朱洁倪坤周瑜马正良顾小萍
- 关键词：骨癌痛镇痛效应鞘内注射NR2B亚基小鼠中枢敏化
- 鞘内注射单羧酸转运蛋白抑制剂α-氰基-4-羟基肉桂酸缓解大鼠神经病理性疼痛被引量：1
- 2014年
- 目的 观察鞘内注射4-CIN对坐骨神经慢性缩窄性损伤（CCI）大鼠神经病理性疼痛的影响.方法 18只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组（n=6）：假手术组（S组）、CCI组（C0组）及4-CIN组（C1组）.C0组与C1组建立CCI动物模型,S组仅分离而不结扎坐骨神经.术后第2天,C1组鞘内注射溶解于10％二甲基亚砜（DMSO） 10μl中的4-CIN（α-cyano-4-hydroxy-cinnamate）100 μmol,C0组仅鞘内注射DMSO10μl.各组在术前1d、术后第1,3,7,10,14天（T0-5）测定大鼠机械缩足反应阈值（PWMT）和热缩足反应潜伏期（PWTL）.结果 各组术前PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）.与S组相比,C0组在T1-5时PWMT[（11.71±2.81）g,（9.76±1.00）g,（8.22±1.33）g,（6.50± 1.48）g,（4.67± 1.03）g]、PWTL[（11.36±2.18）s,（11.60±2.54）s,（8.54±1.42）s,（7.59±1.00）s,（6.88±0.42）s]均出现明显降低（P＜0.05）,而C1组在给药后T2-5时与S组无明显差异（P＞0.05）.结论 鞘内注射4-CIN可缓解CCI所致的慢性神经病理性疼痛.
- 徐黎何建华沈羽石林玉刘廪顾小萍马正良
