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免疫印迹分析试验感染肝片吸虫和大片吸虫绵羊的IgG应答被引量：1: 2003年; 免疫印迹(Westernblot)分析试验感染肝片吸虫和大片吸虫绵羊的抗片形吸虫分泌排泄产物(FhESP和FgESP)IgG应答,结果表明,FhESP中分子质量在17.1～21.6ku之间的4条主要蛋白带仅被肝片吸虫感染以后(0WPI以后)的血清识别且不被对照组血清识别;FgESP中分子质量在19.0～71.1ku之间的6条主要蛋白带仅被大片吸虫感染以后(0WPI以后)的血清识别且不被对照组血清识别。; 张为宇MOREAU Emmanuelle黄维义CHAUVIN Alain; 关键词：绵羊肝片吸虫大片吸虫免疫印迹

广西沼泽型水牛IL-18和TNF-α基因的克隆与序列分析被引量：1: 2007年; 从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),用刀豆素A(ConA)诱导培养3,8和12 h后,提取细胞总RNA,以Oligo(dT)18为引物合成第一链cDNA,根据牛的白细胞介素18(IL-18)和绵羊的肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因序列设计2对特异性引物,通过PCR方法扩增出水牛IL-18和TNF-α基因,将其克隆到pMD18-T载体,测序后进行序列分析。结果试验中所克隆到的IL-18和TNF-α基因序列的开放阅读框(ORF)分别为602 bp和715 bp,与GenBank所登录的水牛IL-18和TNF-α核苷酸序列同源性为99.1%和99.7%,其推导的氨基酸序列同源性分别是99.0%和98.7%。表明成功从水牛外周血中克隆到了水牛IL-18和TNF-α基因。; 阳玉梅郑小龙黄维义石云良代华龙张为宇; 关键词：沼泽型水牛 IL-18 TNF-Α 基因克隆

广西牛片形吸虫流行情况调查被引量：13: 2006年; 为了解广西牛片形吸虫的流行情况,本文通过胆囊检查法对广西黄牛和水牛片形吸虫的流行情况进行了调查,结果表明广西水牛片形吸虫的感染纯阳性率为53.94%,黄牛阳性率为50.47%,水牛和黄牛分别有31.50%和9.35%为疑似感染,阴性分别只有14.56%和40.19%,说明广西牛片形吸虫感染情况非常严重。; 王冬英张为宇黄维义; 关键词：片形吸虫水牛黄牛阳性率

绵羊和水牛实验感染大片吸虫后外周血白细胞计数的分析被引量：3: 2006年; 对绵羊和水牛在感染大片吸虫后外周血白细胞总数计数和白细胞分类计数(嗜酸性细胞、嗜中性细胞、嗜碱性细胞、淋巴细胞和单核细胞)的特性进行研究。结果表明,绵羊对大片吸虫很不易感,水牛对大片吸虫很易感。未感染绵羊和水牛的白细胞总数有较大的差距,分别为5 956(±825)个细胞/mm3血液和12 657(±1 053)个细胞/mm3血液。未感染绵羊和水牛的嗜酸性细胞占白细胞总数的百分比小于5%。淋巴细胞占的比例最大,绵羊为59.5%,水牛达70.8%。感染绵羊和未感染绵羊的白细胞总数、嗜酸性细胞计数在感染过程中总体上存在显著差异,感染后绵羊的嗜酸性细胞的数量迅速升高,在感染后4周(4W P I)达到高峰。而感染水牛和未感染水牛白细胞总数差异不显著,但嗜酸性细胞存在显著差异,感染后水牛的嗜酸性细胞的数量升高缓慢,到8 W P I达到高峰。结果提示嗜酸性细胞在感染绵羊中更加有效地参与了杀灭大片吸虫。; 张为宇黄维义卢秀红吴文德严红郑启超; 关键词：大片吸虫绵羊水牛白细胞嗜酸性细胞

水牛实验感染大片吸虫及ELISA检测特异性抗体的变化被引量：6: 2004年; 目的　本试验为了对水牛感染大片吸虫的情况进行了解。方法　选 10头 6月龄水牛 ,分成 2组 ,每组 5头 ,A组对照 ,B组试验 ,每头经口感染 2 5 0个大片吸虫囊蚴。结果　水牛感染大片吸虫后的收虫率为 16 .2± 8.0 % ,在感染后第 13～ 14周检出虫卵。抗大片吸虫分泌排泄产物 Ig G水平从感染后第 2周明显升高 ,17周时达到高峰。结论　试验证实水牛对大片吸虫感染很敏感 ,EL; 张为宇杨炳壮吴文德李忠权黄维义; 关键词：水牛大片吸虫 ELISA检测特异性抗体

反刍动物肝片吸虫病——免疫与疫苗策略: 2003年; 反刍动物肝片吸虫病在世界范围内对畜牧业造成严重的经济损失,需要研制疫苗进行防制。本文介绍动物肝片吸虫病的保护性免疫应答的表现形式,对保护性免疫应答效应机制和寄生虫免疫逃避机制展开讨论,阐述选择疫苗候选抗原的不同策略,最后探讨研制抗肝片吸虫疫苗所受到的限制因素。; 张为宇CHAUVIN Alain黄维义; 关键词：反刍动物肝片吸虫病免疫疫苗免疫应答

两种方法测定羊外周血淋巴细胞增殖的研究被引量：6: 2003年; 本试验比较3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法和BrdU-ELISA方法测定羊外周血淋巴细胞增殖.分离健康羊外周血淋巴细胞,与不同浓度的非特异刺激因子刀豆素A(concanavalinA,1.0,0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313,0.0156,0.0078,0.0039 μg/孔)培养,分别用3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)和5-溴-2′-脱氧尿苷(BrdU)标记细胞,测定刺激细胞和对照细胞的每分钟脉冲数cpm或光吸收值OD,计算刺激指数SI和光吸收值差ΔOD,统计学方法分析SI和ΔOD的相关程度.同样的方法测定羊试验感染肝片吸虫(Fasciola hepatica)后,在感染早期阶段(PIW0-PIW4)其外周血淋巴细胞在特异性抗原-片形吸虫分泌排泄产物(ESP,5 μg/孔)刺激下的增殖.结果表明,刺激指数SI和光吸收值差ΔOD在两个试验中的相关系数分别为0.946和0.924,SI和*OD均呈强正线性相关.BrdU-ELISA方法无同位素放射物,且敏感、快速、方便,和3H-TdR渗入法一样可以用于测定淋巴细胞增殖.; 张为宇黄维义Chauvin Alain; 关键词：淋巴细胞增殖相关系数

绵羊试验感染肝片吸虫体液免疫应答的研究: 本文研究绵羊试验感染肝片吸虫(Fasciola hepatica)后的体液免疫应答。将10头羊分成2组,每组5头,A组为对照组,B组每头经口感染250个肝片吸虫囊蚴。酶联兔疫试验(ELISA)的结果表明,绵羊感染肝片吸虫...; 张为宇黄维义CHAUVIN Alain; 关键词：体液免疫应答绵羊肝片吸虫酶联免疫试验免疫印迹; 文献传递

广西沼泽型水牛白细胞介素-10和干扰素-γ基因的克隆及其序列分析被引量：2: 2007年; 将本地沼泽型成年水牛外周血单核细胞(PBMC)在刀豆素A(ConA)的刺激下体外培养,提取培养的单核细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增水牛白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ),并克隆到pMD18-T载体上,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定筛选阳性克隆,然后进行测序。序列分析结果显示:IL-10开放阅读框(ORF)由536个核苷酸组成,共编码178个氨基酸;在核苷酸水平上与印度水牛、牛、绵羊、猪、马、人和鼠的IL-10基因的同源性为75.9%～99.6%;氨基酸的同源性为74.2%～100%。IFN-γ的ORF由501个核苷酸组成,共编码166个氨基酸;在核苷酸水平上与印度水牛、牛、绵羊、猪、马、人和鼠的IFN-γ基因的同源性为60.7%～99.6%;氨基酸的同源性为40.6%～100%。; 阳玉梅郑小龙黄维义石云良代华龙张为宇; 关键词：沼泽型水牛单核细胞 IL-10 IFN-Γ

广西沼泽型水牛IL-4和IL-5基因的克隆及其序列分析被引量：4: 2007年; 从刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的广西沼泽型成年水牛外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-5(IL-5)基因,分别克隆到pMD18-T载体上,进行序列分析。结果表明,从培养9 h、17 h的单个核细胞中扩增得到的IL-4基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的印度水牛IL-4 cDNA序列同源性为98.8%,与牛、绵羊、猪和马的同源性分别为99.3%、94.1%、84.8%和80.6%;氨基酸水平的同源性分别为96.3%、98.5%、90.4%、78.4%和59.6%。从培养12 h的单个核细胞中扩增得到的IL-5基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的牛、绵羊、猪和马IL-5 cDNA序列同源性分别是99.0%、96.5%、89.6%和89.1%;氨基酸水平的同源性分别为97.8%、96.2%、85.9%和86.7%。本研究为进一步了解水牛IL-4和IL-5的结构和水牛免疫学特性奠定了基础。; 阳玉梅黄维义代华龙郑小龙石云良张为宇; 关键词：沼泽型水牛单个核细胞 IL-4 IL-5 克隆测序

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