云南省教育厅科学研究基金(03Z463C)
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
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- PCR-RFLP方法检测CCR5基因启动子区59029G/A多态性的实验研究
- 2005年
- 目的:确定PCR-RFLP技术检测CCR5基因启动子区59029G/A多态性的最适实验条件.方法:对主要影响因素设系列浓度梯度分别进行PCR后观察电泳结果.结果:最适变性温度为94℃;最适退火温度为60℃;最适引物浓度为0.4μmol/L;最适Mg2+浓度为1.5 mmol/L;最适dNTP浓度为0.20 mmol/L;以1.0 U为最适Taq酶量.结论:酶切体系为20μL体系中加5μL产物用4 U的酶消化,为后续研究奠定了实验基础.
- 李会芳刘华宋滇平王玉明
- 关键词:聚合酶链反应限制性片段长度多态性CCR5基因
- PCR-RFLP技术检测RANTES基因启动子区-28C/G多态性的实验研究
- 2006年
- 目的为研究PCR-RFLP技术检测RANTES基因启动子区-28 C/G多态性的最适实验条件.方法对主要影响因素设系列浓度梯度进行PCR后观察电泳结果,设置不同的体系对RFLP方法进行了研究.结果最适变性温度为94℃;最适退火温度为60℃;最适引物浓度为0.6μmol/L;最经济有效的酶切体系为12μL体系中加4μL产物用3 U的酶消化.结论最佳的实验条件的摸索是进行大批量实验研究的关键.
- 李会芳刘华宋滇平王玉明
- 关键词:聚合酶链反应限制性片段长度多态性RANTES基因
- 昆明地区汉族人2型糖尿病肾病患者趋化因子受体5基因启动子区59029G/A多态性研究
- 2005年
- 目的探讨CC类趋化因子受体5(CCR5)基因启动子区59029G/A多态性与糖尿病肾病(DN)的相关性。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,在昆明地区汉族人中对163例2型糖尿病(T2DM)患者[其中正常白蛋白尿(DN0)组53例,微量白蛋白尿(DN1)组64例,临床白蛋白尿(DN2)组46例]和60例健康对照者(NC组)的CCR5基因启动子区59029GA多态性进行检测,并比较分析各组间基因型频率和等位基因频率以及相关临床资料。结果DN组(DN1+DN2)的GA、AA基因型频率和A等位基因频率高于DN0组(P<0.01)。DN1和DN2组间基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。DN0组与NC组间基因型频率不同,但两组间等位基因频率差异无统计学意义。logistic回归分析表明CCR5基因启动子区59029G/A多态性、病程与DN显著相关,多项logistic回归分析表明GA和AA基因型相对于GG基因型是DN发生的危险因素;DN患者中,病程>5年是DN2发生的危险因素。结论在昆明地区汉族人中,CCR5基因启动子区59029A阳性基因型可能是DN发生的危险因素;病程>5年可能是DN进展的危险因素。
- 李会芳宋滇平张敏刘华王玉明段勇
- 关键词:汉族2型糖尿病肾病趋化因子受体5基因启动子区