江苏省自然科学基金(BK2011418)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
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- 梭鱼白细胞介素-22原核表达及活性蛋白的制备
- 2012年
- 根据梭鱼IL-22cDNA序列设计特异性引物,从梭鱼脾脏中扩增IL-22用于表达片段,连接至载体pUC57。分别以BamHⅠ和KpnⅠ对含有目的基因的质粒和pQE-30进行酶切,连接并转化到大肠杆菌M15中,以IPTG进行诱导表达。表达产物通过Ni-NTA亲和层析进行纯化。经SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE显示该IL-22表达质粒经IPTG诱导后,IL-22重组蛋白主要在菌体培养上清中表达。通过优化蛋白表达及纯化方法,成功获得了梭鱼IL-22活性蛋白。
- 王资生齐志涛黄贝张启焕仇明邵荣
- 关键词：梭鱼白细胞介素-22原核表达蛋白纯化
- 超声波辅助醇溶剂法提取橙皮苷及体外抑菌活性分析被引量：8
- 2015年
- [目的]对柑橘皮中的橙皮苷提取工艺进行优化，并且分析其抗菌活性。[方法]采用单因素试验和正交试验，对利用超声波辅助乙醇溶液法提取柑橘皮中橙皮苷的工艺进行优化，并且采用平板法检测提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。[结果]获得的最佳工艺条件为：浓度50％乙醇碱性溶液，pH11，提取时间30min，料液比1：30（g／ml）。在此条件下，橙皮苷的提取率为2．76％。抑菌试验显示，橙皮苷在0．15％-0．50％的浓度下金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有较好的抑菌效果。[结论]获得超声波辅助，氢氧化钠乙醇溶液法提取橙皮苷的最佳工艺，橙皮苷抑菌效果无种属特异性，具有广谱的抑菌活性。
- 张启焕严新许伟齐志涛邵荣
- 关键词：橙皮苷抑菌
- 半滑舌鳎HIF-1α基因的原核表达与多克隆抗体的制备
- 2012年
- 根据半滑舌鳎HIF-1αcDNA序列设计特异性引物,从半滑舌鳎肝脏中扩增HIF-1α用于表达片段,连接至载体pMD18-T,分别以KpnI和XholI对含有目的基因的质粒和pET-30a进行酶切,连接并转化大肠杆菌BL21中,构建了半滑舌鳎HIF-1α原核蛋白表达载体。以IPTG进行诱导表达。表达产物通过Ni-NTA亲和层析进行纯化,免疫接种日本大耳白兔,制备了兔抗HIF-1α多克隆抗体。Western blot检测显示该多克隆抗体具有较好的特异性,能够与HIF-1α表达宿主菌蛋白特异性结合。
- 王资生齐志涛张启焕仇明赵卫红
- 关键词：半滑舌鳎HIF-1Α原核表达蛋白纯化WESTERNBLOT
