目的观察辐射后骨髓基质细胞（MSC）高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）的释放，研究HMGB1对人脐血造血干细胞（HSC）增殖分化的影响。方法体外培养人骨髓MSC，利用ELISA方法检测经12Gyγ射线照射后培养上清中HMGB1含量的变化。HMGB1与CD34^＋的人脐血HSC体外液体共培养6d，通过流式细胞术检测CD34^＋细胞分化指标（CD13、CD14、CD11c、CD41、CD71）的变化。集落形成实验观察HMGB1对HSC增殖分化的影响。结果辐射后，骨髓MSC培养上清中HMGB1含量为（4．3±0．9）ng／ml，较对照组HMGB1含量[（0．4±0．2）ng／m1]明显升高（P〈0．01）。脐血CD34^＋细胞表面表达HMGBl受体RAGE、TLR2和TLR4。HSC与HMGBI共培养6d后，与对照组比较，红系（CD71）和粒单系（CD13、CD14、CD11c）标记的表达明显增强，分别为CD13（18．4±3．8）％和（32．6±5．9）％、CD14（12．6±2．7）％和（25．4±4．4）％、CD11c（9．8±2．1）％和（20．3±3．9）％、CD71（26．6±4．6）％和（47．1±7．4）％，而巨核系标记CD41的表达[（1．1±0．4）％和（1．3±0．5）％]无明显变化。集落形成实验示共培养14d后，红系集落、粒一巨噬细胞集落和总集落的生成较对照组明显增多（P〈0．05），联用抗-TLR2和抗-TLR4抗体可部分抑制这一作用。结论辐射促进骨髓MSC释放HMGB1，胞外HMGB1可以促进HSC的增殖分化。辐射后，骨髓MSC释放的HMGB1与造血恢复或造血重建的关系值得进一步研究。
本研究探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)对人脐血CD34+细胞迁移的影响及其机制。用流式细胞仪检测脐血CD34+细胞表面HMGB1受体:晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products,RAGE)、Toll样受体2(Toll-like receptors2,TLR2)及TLR4的表达。用磁珠分选法富集的新鲜人脐血CD34+细胞,经不同浓度的HMGB1(10、50、100、1000ng/ml)刺激后,应用transwell小室趋化装置观察HMGB1对人脐血CD34+细胞的迁移活性,显微镜下计数,计算趋化指数,即试验孔与对照孔细胞数的比值。以未加HMGB1的培养细胞为对照组。结果表明:人脐血CD34+细胞经免疫磁珠分选富集的纯度达98%以上。HMGB1在一定的浓度范围内随浓度递增对人脐血CD34+细胞的迁移作用逐渐增强,当HMGB1浓度为100ng/ml时迁移活性最强,与对照组比较差异显著(p<0.01)。抗-RAGE抗体可部分抑制HMGB1对脐血CD34+细胞的迁移作用。结论:一定浓度的HMGB1加强人脐血CD34+细胞迁移功能,此作用有可能通过RAGE介导。
