江苏省高校自然科学研究项目(11KJA360001) 作品数:13 被引量:126 H指数:9 相关作者: 李伟东 陈志鹏 翁泽斌 蔡宝昌 高倩倩 更多>> 相关机构: 南京中医药大学 南通市中医院 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 江苏省“青蓝工程”基金资助项目 江苏省“青蓝工程”基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细胞增殖与分化的影响 被引量:12 2015年 目的研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。方法以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品及盐炙品杜仲水提液灌胃(10 ml·kg-1),给药持续7 d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白对照组、空白血清组、杜仲含药血清组、盐杜仲含药血清组。以雌二醇作为对照阳性药物。采用MTT法检测各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞分化的作用。结果杜仲生品和盐炙品含药血清均能促进人成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶的活性,且血清浓度为20%时,杜仲盐炙品含药血清对成骨细胞增殖、分化的促进作用显著优于生品(P<0.01);同时杜仲中4种环烯醚萜类成分对人成骨细胞的增殖和分化均有促进作用。结论杜仲生品和盐炙品含药血清均具有良好的促进人成骨细胞增殖和分化的作用,其中盐炙品的作用显著优于生品。杜仲中环烯醚萜类成分可能是其补肾健骨作用的有效成分。 翁泽斌 颜翠萍 高倩倩 赵根华 陈志鹏 蔡宝昌 李伟东关键词:环烯醚萜 盐炙 成骨细胞 青娥丸方有效成分药动学-药效学相关性研究 被引量:12 2016年 研究青娥丸方中3种有效成分京尼平苷酸、补骨脂素、异补骨脂素在大鼠体内的药代动力学过程与其抗骨质疏松作用的相关性。该实验通过大鼠灌胃给药青娥丸生品与盐炙品后,选取不同时间点进行眼眶取血,采用UHPLC-MS/MS测定大鼠血浆中京尼平苷酸、补骨脂素和异补骨脂素的药物浓度,绘制药-时曲线;以成骨细胞的增殖率为药效学指标,采用MTT法测定不同时间点含药血清作用于成骨细胞后的增殖率,绘制时-效曲线。比较时-效曲线和药-时曲线可以发现,在成骨细胞的增殖率达到峰值时,京尼平苷酸和补骨脂素的血药浓度也在峰值附近,表明两者具有较好的相关性。而异补骨脂素的血药浓度峰值相对于药效峰值具有一定的滞后性。将青娥丸生品及盐炙品各成分的时-效曲线与药-时曲线进行拟合,进行相关性分析,发现盐炙品组各成分的相关性略高于生品组。上述实验结果表明,青娥丸中京尼平苷酸、补骨脂素的药-时曲线和时-效曲线具有良好的相关性,且与生品相比,青娥丸盐炙品中两者的相关性更高。 刘玲 翁泽斌 王恒 朱星宇 陈志鹏 吴丽 李伟东关键词:青娥丸 药动学 药效学 京尼平苷酸 补骨脂素 异补骨脂素 补肾活血健骨方含药血清对人成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响 被引量:13 2016年 目的观察补肾活血健骨方含药血清对体外培养的人成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响,为其治疗骨质疏松症提供理论依据。方法取骨质疏松症合并股骨颈骨折患者松质骨进行成骨细胞培养,构建成骨细胞分化模型;制备低、中、高3种浓度的补肾活血健骨方含药血清;采用MTT法、细胞上清液ALP测定和茜素红染色观察含药血清对成骨细胞的影响。结果加入含药血清干预细胞生长48h后,MTT检测显示中、高剂量组出现不同程度的细胞增殖现象,并存在一定程度的剂量依赖;作用72h后,低、中、高3个剂量组ALP活性增高,高剂量组茜素红染色钙盐沉积明显增多。结论补肾活血健骨方含药血清具有促进体外培养的人成骨细胞增殖、分化及矿化的作用。 陈巨鹏 黄桂成 李伟东 刘华东 邢润麟关键词:绝经后骨质疏松症 含药血清 成骨细胞 补骨脂中9种黄酮类化合物的构效关系及对绝经后妇女成骨细胞的增殖、分化活性研究 被引量:11 2015年 目的研究补骨脂中9种黄酮类化合物构效关系及对成骨细胞的增殖、分化活性。方法采用从绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞,利用噻唑蓝法检测黄酮类化合物对成骨细胞增殖的影响,同时测量成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性来评价黄酮类化合物对人成骨细胞分化的影响。结果 9种黄酮化合物中,补骨脂二氢黄酮药物组对成骨细胞增殖、分化的活性最强,通过对9中化合物的EC50值和各药物组成骨细胞酶活性比较,发现二氢黄酮母核、7位羟基、6位异戊二烯基的存在对成骨细胞的增殖、分化具有显著的作用。结论补骨脂中黄酮类化合物对成骨细胞的增殖、分化作用与其结构有一定的相关性。 高倩倩 翁泽斌 颜翠萍 赵根华 陈志鹏 蔡宝昌 李伟东关键词:补骨脂 黄酮化合物 分化 构效关系 不同炮制品配伍的青娥丸中12种指标成分含量变化研究 被引量:6 2016年 目的建立HPLC同时测定青娥丸中12种指标成分的方法,研究不同炮制品配伍的青娥丸中指标性成分含量变化。方法色谱柱:Purospher~ STAR LPRP-C_(18)endcapped(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱;流速:1.0 m L·min^(-1);检测波长:240 nm;进样量:10μL;柱温:30℃。对不同炮制品配伍的青娥丸中指标性成分进行含量测定。结果在上述色谱条件下,青娥丸中12个成分分离度良好,加样回收率范围96.04%~104.07%,RSD均小于2.95%。盐炙品青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、Corlifol A、补骨脂酚、异补骨脂查尔酮7种成分含量明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其他成分无明显变化。结论本研究所建立的方法简单,准确性和稳定性较好,可用于青娥丸的质量控制。盐炙品配伍的青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素等成分与生品配伍的青娥丸比较含量明显下降。 王恒 李伟东 高倩倩 翁泽斌 赵根华 陈志鹏 蔡宝昌关键词:青娥丸 配伍 盐炙 高效液相色谱法 不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化及矿化的影响 被引量:19 2015年 目的:研究以不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。观察盐炙品及生品青娥丸含药血清对人成骨细胞功能的影响,探讨青娥丸对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品配伍入药的必要性。方法:以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,制备以补骨脂和杜仲生品及盐炙品配伍入药的青娥丸,给予大鼠生品及盐炙品青娥丸水提液ig(10mL·kg-1),给药持续7d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白组、空白血清组、青娥丸含药血清组、盐青娥丸含药血清组。采用MTT法检测各组含药血清对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清对人成骨细胞分化的作用;采用细胞钙茜素红染色方法对给予含药血清处理的人成骨细胞进行染色,观察对人成骨细胞矿化的影响。结果:与同浓度空白血清比较,青娥丸的生品和盐炙品的含药血清均有促进成骨细胞增殖的作用(P<0.05),且含药血清浓度相同时,青娥丸盐炙品含药血清促进成骨细胞增殖的作用优于生品含药血清(P<0.05);青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞分化的作用(P<0.05),且盐炙品的作用要优于生品(P<0.01);空白血清对成骨细胞的矿化无显著的作用,而青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞矿化结节形成的作用,且盐炙品的作用要优于生品。结论:青娥丸能提高成骨细胞增殖、分化及矿化活性,其对于骨质疏松症的治疗作用与其能显著提高成骨细胞功能有关,且盐炙品入药的青娥丸效果较好。 翁泽斌 颜翠萍 张志杰 高倩倩 赵根华 陈志鹏 蔡宝昌 李伟东关键词:青娥丸 含药血清 人成骨细胞 青娥丸盐炙品与生品抗去卵巢诱导的骨质疏松效应的比较研究 被引量:10 2014年 目的研究盐制对青娥丸补肾健骨药效的影响,根据中医"盐制入肾"的理论,盐制可以增加中药温肾壮阳的功效。本研究观察不同炮制品配伍的青娥丸对去卵巢(Ovariectomy,OVX)大鼠诱导的骨质疏松症(Osteoporosis)的治疗作用,并进一步探讨盐制引起青娥丸治疗骨质疏松症的药效差异的机制。方法采用大鼠去卵巢骨质疏松症模型,制备以补骨脂和杜仲生品及盐炙品配伍的青娥丸,给予大鼠不同炮制品配伍青娥丸混悬液(2mL/200g)灌胃,给药持续12周。采用双能X射线骨密度仪对大鼠左股骨干骺端骨密度(BMD)进行测定;同时测量血清中与骨代谢相关的生化指标来评价不同炮制品青娥丸的治疗效果;采用Micro-CT和HE染色的方法对大鼠左股骨干骺端骨小梁的微结构进行分析;对子宫进行HE染色,评价青娥丸对子宫的刺激作用。结果青娥丸能够抑制大鼠去卵巢引起的肥胖,增加去卵巢大鼠的子宫质量,盐炙品配伍青娥丸抑制大鼠体质量增加和增加子宫质量的效果与生品配伍青娥丸并无明显差异,同时青娥丸还能够增加大鼠股骨的BMD,改善去卵巢引起的大鼠骨小梁微结构的受损,且研究结果表明,盐炙品配伍的青娥丸治疗效果优于生品配伍组。同时,以生品及盐炙品配伍的青娥丸治疗均没有引起大鼠子宫病变。结论青娥丸对治疗大鼠去卵巢引起的骨质疏松症有良好的治疗效果,且盐制增强了青娥丸的抗骨质疏松药效。以生品及盐炙品配伍青娥丸在治疗剂量范围内均没有引起子宫病变。 颜翠萍 翁泽斌 吴育 陈志鹏 蔡宝昌 李伟东关键词:青娥丸 去卵巢大鼠 盐制 盐炙对杜仲中京尼平苷酸体内药代动力学的影响 被引量:8 2015年 目的建立测定大鼠血浆中京尼平苷酸的UHPLC-MS/MS方法,研究盐炙对杜仲中京尼平苷酸药代动力学的影响。方法色谱柱:BEH-C18(100mm×2.1mm,1.7μm);流动相:0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱;流速:0.3mL/min。结果京尼平苷酸在生品和盐炙品组大鼠体内的药动学参数分别为:AUC(0-t)(1 547.18±272.28)、(2 120.694±664.532)ng·h/mL;AUC(0-∞)(1 564.42±273.97)、(2 145.61±659.983)ng·h/mL;Cmax(517.59±51.24)、(733.292±261.34)ng/mL;MRT(2.68±0.11)、(2.551±0.08)h;T1/2(1.37±0.08)、(1.43±0.17)h;Tmax(1.52±0.1)、(1.51±0.1)h。结论杜仲盐炙后有助于促进京尼平苷酸的吸收,一定程度上增加了其生物利用度。 高倩倩 翁泽斌 赵根华 颜翠萍 陈志鹏 蔡宝昌 徐晗 李伟东关键词:盐炙 京尼平苷酸 药代动力学 3种补骨脂炮制品水煎液中4种成分含量的比较 被引量:6 2017年 目的比较盐水闷润、清炒、盐炙对补骨脂Psoraleae Fructus水煎液中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素含有量的影响。方法水煎液的HPLC分析采用Hibar C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长246 nm;柱温30℃。结果盐水闷润品中苷类成分及总成分溶出较生品均明显降低;盐炙能显著促进苷类成分(补骨脂苷和异补骨脂苷)溶出,而对苷元成分(补骨脂素和异补骨脂素)无显著影响;清炒显著提高了各成分含有量。结论清炒和盐炙均能显著提高补骨脂水煎液中4种成分的总含有量。 赵根华 刘玲 王恒 高倩倩 李伟东 陈志鹏关键词:补骨脂 水煎液 清炒 盐炙 盐制对补骨脂中主要化学成分的影响 被引量:14 2013年 目的建立HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔酮和补骨脂酚等13种化学成分的方法,比较补骨脂盐制前后主要化学成分量的变化。方法按照《中国药典》规定的盐制法对来源不同的10批补骨脂生品进行炮制,采用HPLC法测定补骨脂中13种指标性成分,在此基础上,对补骨脂主要成分进行归类,分析了补骨脂盐制前后各类成分的变化规律。结果补骨脂盐制后香豆素成分含有量变化不大,而黄酮类成分和补骨脂酚的量略有上升。结论补骨脂的盐制机制还需结合药效学试验进行深入研究。 颜翠萍 吴育 翁泽斌 陈志鹏 蔡宝昌 李伟东关键词:补骨脂 香豆素 黄酮 HPLC 盐制