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国家自然科学基金(30700338)

作品数：5 被引量：6H指数：2
相关作者：王小中熊火梅李静王彩纹肖芸更多>>
相关机构：南昌大学第二附属医院南昌大学第一附属医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇选择性剪接
  • 2篇微基因
  • 2篇细胞
  • 2篇粒细胞
  • 2篇粒细胞白血病
  • 2篇慢性
  • 2篇慢性粒细胞
  • 2篇慢性粒细胞白...
  • 2篇聚合酶
  • 2篇基因
  • 2篇剪接
  • 2篇合酶
  • 2篇白血
  • 2篇白血病
  • 2篇BCL-X
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白转运
  • 1篇双链
  • 1篇双链RNA
  • 1篇逆转

机构

  • 5篇南昌大学第二...
  • 3篇南昌大学第一...

作者

  • 5篇王小中
  • 3篇熊火梅
  • 3篇李静
  • 2篇章海斌
  • 2篇黄波
  • 2篇肖芸
  • 2篇王彩纹
  • 1篇刘静
  • 1篇黄淑英
  • 1篇李华

传媒

  • 2篇实验与检验医...
  • 1篇第三军医大学...
  • 1篇中国组织工程...
  • 1篇分子诊断与治...

年份

  • 1篇2011
  • 3篇2010
  • 1篇2009
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
循环miRNA在疾病诊断中的应用被引量：2
2009年
微小RNA（miRNA）是指长度为18～24个核甘酸的内源性小分子非编码RNA．普遍存在于各种生物中．由RNA聚合酶Ⅱ转录后，形成RNA前体分子（pri-miRNA），在细胞核内经RNA酶Ⅲ（Drosha）和双链RNA结合蛋向（Pasha）加工成长约70个核苷酸，具有茎环结构的miRNA前体（pre—miRNAs），prc—miRNAs经exporlin5等蛋白转运到细胞质中，在另一个RNA酶Ⅲ（Dicer）剪切下形成约22个核苷酸的miRNA双链．
熊火梅王小中
关键词：MIRNAS疾病诊断双链RNARNA酶蛋白转运
Bcl-x微基因及其突变微基因的构建与鉴定被引量：1
2010年
背景:Bcl-xL/Bcl-xS比值的增高与肿瘤的发生密切相关,其机制尚未阐明。Bcl-x微基因是研究其选择性剪接机制的重要工具。目的:构建人类凋亡相关基因Bcl-x的微基因及其突变微基因,为进行Bcl-x基因选择性剪接方面的研究打下基础。方法:首先采用PCR法从人白血病细胞K562基因组DNA中扩增出Bcl-x基因外显子2及内含子2的5’部分序列片段,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(-)中,然后扩增出Bcl-x基因内含子2的3’端及外显子3部分序列,定向插入上一片段下游,构建成pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因,测序鉴定无误后,用pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因瞬时转染HL-60,通过RT-PCR方法对其在细胞内表达作进一步鉴定。另外,以pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因为模板,利用反向PCR法构建突变微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)。结果与结论:以人白血病细胞K562基因组DNA为模板,P1和P2为引物,经PCR扩增得约686bp的目的片段;以P3和P4为引物扩增出约178bp的目的片段。微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x分别经XbaⅠ和EcoRⅠ双切、XbaⅠ和XhoⅠ双切鉴定均得到预期的片段,突变微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)经EcoRⅠ单酶切后,均得到预期片段,测序结果正确,表明成功构建人类凋亡相关基因Bcl-x的微基因及其突变微基因。
黄波王小中王彩纹李静章海斌熊火梅肖芸
关键词：微基因选择性剪接BCL-X
慢性粒细胞白血病PKR基因的表达及临床意义
2010年
目的检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)基因在慢性粒细胞白血病(CML)病人及CML细胞株K562细胞中的表达情况。方法分离CML患者慢性期(CP)15例,加速期(AP)11例,急变期(BC)9例及11例正常供者骨髓或外周血单个核细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其PKR基因表达情况,并同时检测PKR基因在K562细胞中的表达。结果正常对照组PKR表达阳性率为90.9%,高于加速期的81.8%(P<0.05)及急变期的77.8%(P<0.05);正常对照组PKR/GAPDH比值为(0.92±0.40)%,高于慢性期的(0.85±0.32)%(P<0.05)及加速期的(0.72±0.54)%(P<0.05),明显高于急变期的(0.46±0.31)%(P>0.01)。K562细胞PKR/GAPDH比值为(0.55±0.13)%。结论 CML细胞及K562细胞株都有一定丰度的蛋白激酶PKR基因表达,为通过激活PKR而靶向诱导CML细胞凋亡奠定理论基础。
李静王小中黄淑英李华
关键词：慢性粒细胞白血病逆转录聚合酶链反应
bcl-x选择性剪接微基因报告方法的建立
2011年
目的利用bcl-x微基因(minigene)构建重要顺式作用元件B2G、CRCE2的突变微基因,建立bcl-x微基因报告法并应用于bcl-x选择性剪接机制的研究。方法以构建成功的pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因为模板,利用反向PCR的方法,按碱基互补配对原则设计能让顺式元件B2G,CRCE2定点突变的引物,进行PCR反应。PCR反应结束后,用DpnⅠ对模板质粒DNA进行消化,然后使PCR产物发生自身环化反应。将环化产物转化入感受态DH5α,通过筛选并最后利用测序来鉴定所构建突变微基因成功与否。结果测序结果鉴定,所克隆的突变微基因序列碱基无一错误突变。并且在HL-60细胞中,RT-PCR实验表明bcl-x顺式作用元件B2G,CRCE2对bcl-xL/bcl-xS有一定影响,pcDNA3.1(-)-bcl-x-B2G(M)转染后RT-PCR电泳显示bcl-xS几乎消失,pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE2(M)转染后RT-PCR电泳显示bcl-xL/bcl-xS为1.6。结论成功构建及应用人类凋亡相关基因bcl-x的突变微基因,顺式作用元件B2G缺失使bcl-xS几乎消失,CRCE2突变使bcl-xL/bcl-xS上升。
黄波王小中王彩纹李静章海斌熊火梅肖芸余佳
关键词：微基因选择性剪接
慢性粒细胞白血病相关microRNA的研究进展被引量：3
2010年
微小RNA(microRNA)是一组片段短小但功能丰富,序列高度保守,表达具有时序性和组织特异性的核苷酸序列。近年来通过对microRNA生物学功能的研究发现,microRNA在细胞的生长、分化、凋亡以及肿瘤的发生、转移、耐药等过程中发挥重要作用。microRNA与血液系统疾病的关系也在逐渐被阐明,本文就慢性粒细胞白血病相关microRNA的研究进展做一综述。
刘静王小中
关键词：微小RNA慢性粒细胞白血病
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