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国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-20-4-4): 作品数：34 被引量：167H指数：7; 相关作者：陈由强叶冰莹薛婷张积森何文锦更多>>; 相关机构：福建师范大学中华人民共和国农业部教育部更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>

产肌醇酿酒酵母基因工程菌的构建被引量：4: 2016年; 【目的】过表达酿酒酵母肌醇合成关键酶基因INO1,促进肌醇合成,构建能够分泌肌醇的基因工程菌株。【方法】构建r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH,电转化酿酒酵母Y01菌株,构建工程菌株YI2-1和YI2-2,荧光定量PCR方法分析INO1基因表达量。敲除Kan MX抗性基因,HPLC检测重组菌发酵液中肌醇含量。【结果】获得INO1基因过表达菌株YI2-1和YI2-2,YI2-1的INO1基因表达量是出发菌Y01的16.235倍。敲除Kan MX抗性基因的菌株命名为YI2-1△KP,初步检测YI2-1△KP产肌醇量为627 mg/L。【结论】r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH能够有效地过表达目的基因;过表达菌株合成的肌醇不仅能满足自身的需要,而且能够向胞外分泌,具有潜在的工业应用价值。; 黄贞杰陈由强陈丽霞陈淑增王容贞陈文标; 关键词：肌醇过表达 SC 基因工程菌酿酒酵母

甘蔗不同组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因家族的表达分析被引量：1: 2013年; 本研究通过光合参数和荧光定量PCR的测定来分析甘蔗不同组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因家族的表达。研究结果表明,乙烯利对九月龄甘蔗光合作用影响不大,对光合产物的积累和转化,糖代谢的信号调控的影响微弱;通过分析STK基因家族在甘蔗各组织中的组织表达差异时发现,多数基因是在鞘和嫩叶、嫩茎中表达量较高,且STK2、STK7在茎中表达量高,STK3在老叶中表达量高,STK5的嫩叶表达量高。; 叶冰莹薛婷陈玲张积森陈由强; 关键词：甘蔗蛋白激酶光合作用荧光定量PCR

微生物法生产肌醇研究进展被引量：11: 2015年; 肌醇是一种具有旋光性及生物活性的环状糖醇,具有许多重要的生理活性,广泛应用于医药、食品及饲料等行业。利用微生物法生产肌醇具有很好的应用前景。文中介绍了肌醇的功能,综述了肌醇的微生物酶解法和发酵法生产的研究进展,并对其前景进行了展望。; 黄贞杰陈由强; 关键词：肌醇发酵酿酒酵母

高温大曲中产耐热性蛋白酶芽孢杆菌的筛选和鉴定被引量：22: 2012年; 从高温大曲样品中通过分离纯化,在牛奶琼脂平板上初筛得到产耐热性蛋白酶的菌株,然后液体发酵培养测定蛋白酶酶活挑选出产酶较强的菌株A1。在经过菌株形态特征、生化鉴定、16SrDNA分子生物学鉴定为芽孢杆菌属苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。选择三个主要影响因子葡萄糖、酵母浸出粉和pH,运用响应面法优化发酵培养基,最佳产酶培养基为pH为8.4,葡萄糖添加量为1.092%,酵母浸出粉添加量为0.902%,最佳酶活力为142.81u/mL。测定蛋白酶酶作用的最适温度是61℃,且在55～70℃之间有较高的酶活力,60℃相对酶活为97.63%。; 马校卫颜林春汤二将龚丽琼黄祖新; 关键词：高温大曲苏云金芽孢杆菌蛋白酶响应面法

甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶基因的克隆及序列分析被引量：1: 2012年; 以福农28甘蔗品种为实验材料,电子克隆设计引物,克隆得到了甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,STK)基因的cDNA片段。采用RACE技术克隆获得了甘蔗叶STK基因cDNA的5'及3'端序列,长度分别为750和1000bp。5'、3'端序列与中间片段重叠延伸后总片段长为1133 bp,其中5'UTR为54 bp,3'UTR为254 bp,包含完整的ORF为825 bp,共编码274个氨基酸。开放阅读框架查询器(Open Reading Frame Finder)确定其为丝氨酸/苏氨酸激酶,通过预测(//cn.expasy.org/tools)该蛋白质分子质量为29.9052 ku,理论等电点为6.36。将其基因序列与NCBI中其他植物的STK进行比对,与高粱、玉米、水稻、短柄草和大麦的相似性分别为97%、94%、89%、89%和88%。; 陈玲叶冰莹黄贞杰张积森陈由强陈如凯; 关键词：甘蔗丝氨酸苏氨酸激酶电子克隆

甘蔗SPS基因家族成员表达与糖分积累关系解析被引量：5: 2014年; 以甘蔗高糖品种福农95-1702和低糖品种ROC-5为材料,分析SPS I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在高、低糖这两个品种的幼叶、第三功能叶和不同蔗茎的表达,测定甘蔗糖分积累早期、中期和后期的糖分含量。结果显示,在功能叶和茎第二节中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的含量整体趋势高于低糖品种,结合蔗糖积累特点分析表明其可能在蔗糖合成中扮演着重要的角色。与正三叶相反,在幼叶中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的表达量整体趋势低于低糖品种,表明其可能与嫩叶的生长等其他生理性状相关,在成熟茎中,随着蔗糖积累时间的增加,高糖品种中的优势表达基因减少,而低糖品种中的优势表达基因增加,这可能与低糖品种中、后期大量积累蔗糖相关。; 陈兰平陈由强方静平宋喜梅叶冰莹陈如凯张积森; 关键词：甘蔗蔗糖磷酸合成酶家族成员基因表达实时荧光PCR

过表达INO1基因提高酿酒酵母乙醇耐受性被引量：1: 2019年; 为获得燃料乙醇生产菌株,通过基因工程改造,构建能够利用能源甘蔗汁发酵、乙醇产率高的酿酒酵母工程菌株。即过表达肌醇-3-磷酸合成酶基因ino1,敲除kanMX抗性基因,获得重组菌。对过表达菌株的乙醇耐受性进行分析。利用甘蔗汁进行发酵培养,采用气相色谱(GC)对发酵产物乙醇进行检测。结果显示过表达菌株YI2-1能够耐19%(V/V)的乙醇,利用20oBx甘蔗汁厌氧发酵乙醇积累量为13.10%(V/V),较出发菌提高了8.55%。而过表达菌株YI2-1△KP的最大乙醇积累量为13.17%(V/V),较出发菌提高了9.16%。研究表明通过过表达酿酒酵母ino1基因能够有效提高菌株细胞活力、乙醇耐受性。构建的工程菌可利用甘蔗汁发酵,具有较高的乙醇产量。; 黄贞杰陈由强薛婷; 关键词：酿酒酵母燃料乙醇乙醇耐受性

酿酒酵母乙醇脱氢酶Ⅱ基因反义干扰及对乙醇发酵的影响被引量：1: 2015年; 通过构建酿酒酵母沉默表达载体PURH-ADH2,使ADH2基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达。采用Bam HI和Xmal I限制性内切酶对SADH2基因和PURH质粒进行双酶切,构建反义重组表达质粒PURH-SADH2,通过高效酵母转化法和电转法将重组质粒组件转化至酿酒酵母SY01细胞中,获得阳性克隆菌株JY01。酿酒酵母JY01突变菌株与出发菌株SY01和Y01发酵试验结果相比,JY01甘油脱氢酶酶活比出发菌株Y01与SY01分别下降了16.31%和13.5%;当酿酒酵母Y01、SY01和JY01菌株发酵36~60 h时,JY01菌株甘油含量相比Y01分别下降了16.34%、14.25%、14.89%;当酿酒酵母突变菌株发酵48 h时,Y01、SY01和JY01的乙醇浓度分别为6.243 g/100 m L、7.145 g/100 m L和7.288 g/100 m L,酿酒酵母JY01发酵液乙醇量比比原始菌株Y01乙醇含量提高了14.33%。结果表明通过反义干扰ADH2基因5’UTR序列,能有效干扰酵母工程菌株ADH2转录与表达,削弱甘油积累途径,促进乙醇代谢途径。; 薛婷陈栋才柳燕苏小玫林荣华陈由强; 关键词：酿酒酵母乙醇脱氢酶甘油脱氢酶

利用基因芯片筛选甘蔗成熟期叶片差异表达候选基因被引量：4: 2012年; 利用Agilent甘蔗4×44k(per array)芯片分析甘蔗叶片在甘蔗成熟期的差异表达基因,并通过生物信息学手段对基因芯片杂交结果进行分析。芯片杂交结果符合质控标准,并且杂交数据重复性良好,结果可靠。在甘蔗生长过程中8个时间点上,共筛选出相关差异在2倍以上的基因20个,其中上调表达基因17个,下调表达基因3个。这些候选基因分别涉及不同水平分子进程和多种代谢途径。; 黄峰何文锦代容春林荣华叶冰莹陈由强; 关键词：基因芯片甘蔗差异表达基因

甘蔗SPS Ⅲ启动子区ATCT-motif和CAT-box元件的酵母单杂交报告载体构建被引量：4: 2013年; 蔗糖磷酸合成酶是植物蔗糖代谢中关键限速酶之一,为了更具体分析光响应元件ATCT-motif与分生组织特异性元件CAT-box的功能,将含有ATCT-motif和CAT-box的SPSⅢ5'侧翼序列(-1 320～-1 210),顺式作用元件SPSⅢ-AB,构建应用酵母单杂交体系的诱饵报告载体pAbAi-SPSⅢ-AB,并转化进酵母,为进一步探讨SPSⅢ基因的调控序列奠定基础.; 张积森林清凡方静平邹丽娟叶冰莹陈由强陈如凯; 关键词：酵母单杂交转录因子启动子

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