您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30700370)

作品数:2 被引量:0H指数:0
相关作者:黄丽丽叶凤张百芳伍婷婷李小明更多>>
相关机构:武汉大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇CAVEOL...
  • 1篇印迹
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇真核表达载体...
  • 1篇真核表达质粒
  • 1篇质粒
  • 1篇周期
  • 1篇系膜
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞周期
  • 1篇细胞周期阻滞
  • 1篇小凹
  • 1篇小凹蛋白
  • 1篇核表达
  • 1篇WESTER...
  • 1篇G1期
  • 1篇G1期阻滞
  • 1篇表达载体构建

机构

  • 1篇武汉大学

作者

  • 1篇曹佳
  • 1篇李小明
  • 1篇伍婷婷
  • 1篇张百芳
  • 1篇叶凤
  • 1篇黄丽丽

传媒

  • 1篇武汉大学学报...
  • 1篇Wuhan ...

年份

  • 2篇2010
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
Caveolin-1 Re-Expression Reverses G_0/G_1 Arrest in Caveolin-1 Knockout Mesangial Cells
2010年
Flow cytometry,BrdU incorporation,and western blotting were used to investigate whether caveolin-1(Cav-1) is involved in cell cycle progression of renal glomerular mesangial cells.Wide type mesangial cells re-entered the cell cycle after 22 h incubation with 20% fetal bovine serum(FBS) and Cav-1 knockout cells remained in G0/G1 phase after 48 h,which indicated that Cav-1 knockout mesangial cells were G0/G1 arrest.The protein level of cyclin D1 significantly increased after incubation with 20% FBS for 6 h in wide type mesangial cells,and 12 h in Cav-1 knockout cells.It suggested that cyclin D1 upregulation was delayed in knockout mesangial cells.Cav-1 re-expression in Cav-1 knockout mesangial cells increased the ratio of S phase from 4.8% to 15.26%,and decreased the ratio of G0/G1 phase from 90.96% to 77.84%,which implied that Cav-1 re-expression can reverse cell cycle arrest.It concludes that Cav-1 may promote the proliferation of mesangial cells.
WU TingtingYE FengWU DongchengXIAO ZelingZHANG Baifang
关键词:WESTERN印迹G1期阻滞
不同分子区域的Caveolin-1真核表达载体构建及其对Caveolin-1基因敲除小鼠系膜细胞周期的影响
2010年
目的:构建含不同分子区域的caveolin-1真核表达质粒,转染caveolin-1基因敲除小鼠(Cav-1-/-)的肾小球系膜细胞,观察能否逆转系膜细胞周期阻滞。方法:首先从pLHCX-N-FLAG2/caveolin-1全长质粒中扩增cave-olin-1 N末端(第1-82位氨基酸)、N末端+脚手架区(第1-101位氨基酸)的cDNA片段,同时在引物两端加上限制性酶切位点HindⅢ及XhoⅠ,再与复制缺陷型逆转录病毒表达载体pLHCX-N-FLAG3连接。完成酶切和测序鉴定后将pLHCX-N-FLAG3/cav-1-82和pLHCX-N-FLAG3/cav-1-101分别转染HEK293T细胞,包装产生有感染力的病毒颗粒,再分别感染Cav-1-/-系膜细胞,流式细胞分析观察能否逆转细胞周期阻滞。结果:成功构建含caveolin-1 N末端、N末端+脚手架区片段的重组真核表达载体,流式细胞分析发现pLHCX-N-FLAG3/cav-1-82和pLH-CX-N-FLAG3/cav-1-101基因导入Cav-1-/-系膜细胞,可逆转G0/G1细胞周期阻滞。Vcaveolin-1可能主要通过N末端第1-82位氨基酸区域参与细胞周期进程,具体机制还需进一步研究。
黄丽丽张百芳叶凤伍婷婷曹佳李小明
关键词:小凹蛋白真核表达质粒细胞周期阻滞
共1页<1>
聚类工具0