福建省自然科学基金(2012J01126)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：叶君健郑力峰林曦陈雷胡秀年更多>>
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- p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在腰椎间盘退变中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）与凋亡信号调节激酶-1（ASK-1）在退变腰椎间盘组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学法和Western blot检测40例退变（实验组）和10例正常（对照组）腰椎间盘组织中p38MAPK和ASK一1的表达。结果p38MAPK和ASK-1在各实验组中的表达分别为重度退变组（0．8551±0．0332）和（0．8103±0．0559），轻中度退变组（0．37624-0．0214）和（0．4024±0．0415），均明显高于对照组的（0．1625-4-0．0132）和（0．1833±0．0122）；重度退变组p38MAPK和ASK-1的表达明显高于轻中度退变组，差异均有统计学意义（P〈0．01）；且两者的表达呈正相关（r=0．976，P〈0．01）。结论p38MAPK信号转导通路可能在腰椎间盘退变的分子生物学机制中起重要作用。
- 郑力峰杨海亮叶君健
- 关键词：腰椎间盘退变P38丝裂原活化蛋白激酶
- 骨形态发生蛋白2对退变椎间盘组织学和Ⅰ,Ⅱ型胶原的影响被引量：5
- 2013年
- 背景:研究表明,退变椎间盘细胞外基质的主要变化是Ⅱ型胶原和蛋白多糖含量的减少和Ⅰ型胶原含量的增加。目的:观察腺相关病毒介导的骨形态发生蛋白2基因(AAV-BMP-2)对兔退变腰椎间盘内髓核Ⅰ,Ⅱ型胶原的影响。方法:将12只新西兰大白兔L2-3,L3-4,L4-5,L5-6椎间盘针刺制造退变模型后随机分为3组,每组4只。其中AAV-BMP-2组兔椎间盘注射AAV-BMP-2,AAV组兔椎间盘注射不携带目的基因的空载体,生理盐水组兔椎间盘注射生理盐水,注射后第8周处死动物取其相应的椎间盘常规石蜡包埋,组织切片,以苏木精-伊红染色观察其髓核组织学变化,免疫组织化学法检测髓核组织Ⅰ型、Ⅱ型胶原表达并进行半定量分析。结果与结论:普通苏木精-伊红染色结果显示AAV-BMP-2组椎间盘内髓核细胞数目较多,呈单个或者簇状分布,髓核结构清晰,无纤维样组织填充。而AAV组和生理盐水组的组织结构相似,髓核内细胞数目少,髓核皱缩干瘪,细胞间为纤维样组织填充且排列紊乱。免疫组织化学染色显示:AAV-BMP-2组椎间盘髓核内Ⅱ型胶原的表达均高于AAV组和生理盐水组(P<0.05);AAV-BMP-2组椎间盘髓核内Ⅰ型胶原的表达均低于AAV组和生理盐水组(P<0.05)。结果说明,体内转染AAV-BMP-2能抑制椎间盘髓核细胞表达Ⅰ型胶原,促进椎间盘髓核细胞表达合成Ⅱ型胶原,提示维持椎间盘内胶原的含量、种类,可维持椎间盘内组织学的结构和形态,稳定髓核细胞生长环境,延缓椎间盘的退变。
- 林曦叶君健
- 关键词：骨形态发生蛋白质类椎间盘
- 胰岛素样生长因子-1对骨髓间充质干细胞分化类髓核细胞的作用被引量：1
- 2015年
- 目的：观察不同浓度胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化成类髓核细胞的作用.方法：应用3月龄新西兰大白兔骨髓和髓核进行BMSCs及髓核细胞的分离培养与鉴定;将第2代BMSCs和原代髓核细胞构建共培养体系,实验组加入不同浓度IGF-1（0、10、50、100、150 μg/L）的无血清培养液诱导5、10、15、20、25 d;以10％胎牛血清的培养基单独培养BMSCs作为阴性对照.利用免疫印迹检测各组BMSCsⅡ型胶原及蛋白聚糖的表达情况.结果：100 μg/L IGF-1诱导液诱导的BMSCsⅡ型胶原和蛋白聚糖蛋白水平高于对照组和其他实验组.结论：100 μg/L IGF-1能提高兔BMSCs体外诱导分化成类髓核细胞的数量.
- 郑力峰叶君健郑佑相林建华
- 关键词：胰岛素样生长因子-1骨髓间充质干细胞髓核细胞
- 非接触性共培养BMSCs和髓核细胞时间差异性的实验研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨在非接触性共培养环境下,BMSCs定向分化为类髓核细胞在共培养时间上的差异性,寻找适合体内移植的最佳时间。方法取6只8周龄健康新西兰大白兔(体重1.5～2.0 kg)骨髓及椎间盘髓核,分离、培养BMSCs和髓核细胞并进行免疫细胞化学鉴定。取原代髓核细胞和第2代生长良好的BMSCs体外建立非接触性共培养模型。观察共培养后第1、3、5代BMSCs的形态学变化并绘制生长曲线;RT-PCR检测共培养5、10、15 d BMSCsⅡ型胶原和蛋白聚糖mRNA表达;Western blot检测共培养5、10、15、20、25、30 d BMSCsⅡ型胶原和蛋白聚糖蛋白的表达。结果 BMSCs相对特异性标记物CD44、CD90表达阳性,造血细胞表面标记物CD34、CD45表达阴性。髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达阳性。共培养后2周BMSCs形态发生明显变化,呈多角形、不规则形;共培养后3代内,BMSCs生长速度无明显差异,随着传代次数增加,细胞增殖明显减慢。RT-PCR检测示共培养后10、15 d BMSCs蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于5 d时(P<0.05),而10 d与15 d时差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测示共培养后随时间延长细胞表达Ⅱ型胶原和蛋白聚糖蛋白逐渐增加,5、10、15 d间差异有统计学意义(P<0.05),15 d后各时间点间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在非接触性共培养环境下,BMSCs在髓核细胞诱导下可向类髓核细胞分化,表达Ⅱ型胶原和蛋白聚糖,在共培养15 d时达到相对稳定,此时较适合进行体内移植。
- 陈雷胡秀年傅冷西叶君健
- 关键词：BMSCS髓核细胞
