安徽省高校省级自然科学研究项目(2006KJ093A)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 相关作者：翟志敏徐静玮邬志伟李庆晏开力更多>>
- 相关机构：安徽省立医院安徽医科大学第一附属医院解放军105医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨髓间充质干细胞体外纯化及心肌样细胞定向诱导分化后的特征分析被引量：4
- 2007年
- 目的在体外将人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行纯化、扩增及向心肌样细胞定向诱导分化,并对诱导后的细胞进行心肌样细胞相关特性分析。方法采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs在体外经5μmol/L5-杂氮胞苷诱导24h后继续培养8w,相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组化方法鉴定心肌特异性蛋白心房钠尿肽(ANP)和连接蛋白(CX43)的表达,流式细胞仪检测诱导前后细胞表面抗原(CD31、CD34、CD45、CD90)的表达情况,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重链(β-MHC)和肌钙蛋白T(cTnT)等相关基因在分化过程中的动态表达。结果hMSCs诱导前为纺锤形,诱导后第2天部分细胞即开始发生形变,呈球形或短棒状,1w后胞浆中颗粒增多,约20%～30%细胞呈毛表达呈弱阳性,诱导后明显增高(P<0.05);ANP和CX43在诱导前无表达,诱导后第2周开始表达且表达随时间逐渐增强,但CX43在诱导后第5周表达量开始降低。β-MHC和CTNT基因分别在诱导后第1周和第4周时表达开始增强,在第6周时均达到高峰,第8周时表达开始衰减。结论hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性,可为hMSCs临床移植治疗提供可靠、安全的细胞来源。
- 马健唐海沁翟志敏朱薇波李结华
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化心肌样细胞
- 成人骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的研究被引量：14
- 2007年
- 目的研究成人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)体外分化为血管内皮细胞的能力并探讨其诱导条件。方法分离成人骨髓单个核细胞,经贴壁法获取MSCs。所获细胞分4组进行诱导组1、2以5×103/cm2细胞密度接分别接种于含2%和15%胎牛血清的L-DMEM培养基;组3、4以5×104/cm2细胞密度分别接种于上述两种血清浓度的培养基,各组细胞经血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)辅以牛脑提取物的诱导,对照组为正常传代培养的MSCs。在诱导的第14、21天分别测定表面分子CD34、VEGFR-2、CD31和因子相关抗原(factor-relatedantigen,又称vonWillebrandfactor,vWF)以及体外成血管实验对分化细胞进行鉴定,同时测定不同诱导条件下的细胞增殖指数(proliferationindex,PI)。结果组3细胞经诱导后,内皮系表面分子CD34、VEGFR-2、CD31、vWF于第14天均有不同程度表达,分别为8.5%、12.0%、40.0%、30.0%,其中CD34、VEGFR-2在第21天表达上调,为15.5%、20.0%,余各诱导组细胞未表达上述表面分子;诱导后的组3细胞呈低增殖状态(PI值约为10.4%),在半固体培养基中还可形成血管腔样结构。结论从成人骨髓中分离培养的MSCs,在较高细胞接种密度和低增殖状态下,经VEGF、牛脑垂体提取物诱导后,可分化为血管内皮细胞,可作为治疗性血管生成及组织工程理想的种子细胞。
- 晏开力汪健李庆邬志伟徐修才徐静玮翟志敏
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化血管内皮细胞体外培养
- 超声观察骨髓间充质干细胞移植对兔心肌梗死心功能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的应用超声评价体外不同处理方式兔骨髓间充质干细胞(MSCs)移植于缺血心肌后对心脏功能的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,2周后分别将自体MSCs、经5-aza诱导的MSCs、骨髓单个核细胞(BMMNCs),Dil标记后用微量注射器注射于兔缺血心肌内,并以无血清培养基注射动物为对照组。分别在术前、细胞移植前、细胞移植后2、4周之后行M型超声心动测量:左室收缩末内径(LVESD)、左室舒张末内径(LVEDD),计算左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)等指标。结果细胞移植后2、4周,超声心动检查发现MSCs组和5-aza诱导的MSCs组的兔心功能(LVEF、LVFS值)比对照组显著升高(P<0.05),而BMMNCs组仅在移植后4周明显改善(P<0.05);LVESD、LVEDD细胞移植组与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论 MSCs、经5-aza诱导的MSCs、BMMNCs均能存活于梗死心肌中,从而改善缺血心肌后左室收缩功能。
- 章仁品宋晓蓉翟志敏严中亚
- 关键词：骨髓干细胞细胞移植心功能二维超声
