国家科技重大专项(2012ZX9301002003)
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 相关作者：邵雷陈代杰李继安谭俊刘丽勤更多>>
- 相关机构：上海医药工业研究院上海师范大学雅本化学股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 糖基转移酶编码基因snogE中断对诺加霉素生物合成的影响被引量：1
- 2013年
- 为了考察基因snogE中断对诺加霉素生物合成的影响,比对多种糖基转移酶的氨基酸序列,并克隆与已知蒽环类抗生素糖基转移酶序列同源性最高的snogE编码基因片段,构建基因中断质粒pSXW-2-62。利用接合转移的方法将其转入产诺加霉素的胡桃链霉菌中并发生同源重组,得到重组菌株mSXW-2-71,验证突变株基因型与发酵产物。结果表明,基因中断质粒以正确方式整合入基因组,中断了snogE基因;在突变株发酵产物中无法检测到诺加霉素产生。snogE基因编码的糖基转移酶在诺加霉素的生物合成途径中是必需的。
- 石煊雯李梦茜李航李继安陈代杰邵雷
- 关键词：糖基转移酶基因中断同源重组
- 用于合成L-2-氨基丁酸基因工程菌的构建被引量：1
- 2015年
- 构建了还原型辅酶Ⅰ(NADH)再生与亮氨酸脱氢酶(LDH)偶联的催化体系,合成甲酸脱氢酶(FDH)基因序列片段,连接入pET28a质粒,构建了pFDH-pET28a,转化入E.coli BL21(DE3)表达。经IPTG诱导后,FDH粗酶液的酶活力约10 u/ml。合成LDH基因序列,连接入pET21a质粒,构建了pLDH-p ET21a,将该质粒与pFDH-pET28a共转化入E.coli BL21(DE3),共表达FDH与LDH,与苏氨酸脱氨酶(TD)共同催化L-2-氨基丁酸的合成。投料量为7 g/100 ml时,该体系产率可达95%。
- 郭红颜梁蕊李航陈代杰邵雷
- 关键词：甲酸脱氢酶共表达
- α-麦角环肽产生菌的菌种选育及发酵工艺
- 2014年
- 以产a-麦角环肽的黑麦麦角菌SIPI-197为出发菌株,经过紫外和亚硝基胍(NTG)诱变,在高浓度蔗糖平板中筛得一株a-麦角环肽产量提高的突变株SIPI-11,其摇瓶产量为657.5 mg/L。在5 L发酵罐进行分批发酵培养,a-麦角环肽的产量为374 mg/L。进一步在发酵过程补加蔗糖,a-麦角环肽的产量提高到903.6 mg/L。
- 杨松柏陈少欣
- 关键词：菌种选育发酵
- 乙醇脱氢酶与葡萄糖脱氢酶偶联催化制备(S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙醇被引量：3
- 2016年
- (S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙醇是抗癌药物克唑替尼的手性合成前体,可由2,6-二氯-3-氟苯乙酮经乙醇脱氢酶催化还原制备,还原中所需的还原型辅酶Ⅱ再生是该反应的技术瓶颈。本研究构建重组大肠杆菌E.coli BL21-ADH和E.coli BL21-GDH,实现了葡萄糖脱氢酶和乙醇脱氢酶的共表达,并进行偶联转化。结果表明,当在反应温度为30℃,p H为7的条件下,(S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙醇的产量达到最高,在投料量为6%时,该体系转化率为93.75%。
- 刘丽勤张骏梁谭俊陈代杰李亚军邵雷
- 关键词：乙醇脱氢酶葡萄糖脱氢酶
- 革兰阴性菌中脂质A修饰造成多黏菌素耐药机制的研究进展
- 2016年
- 某些革兰阴性菌是临床感染的重要病原菌,面对越来越严重的耐药菌威胁,多黏菌素已经成为临床抗多药耐药革兰阴性菌病原菌的最后一道防线。革兰阴性菌中脂质A的修饰可以造成细菌表面电负性的变化,进而造成对于多黏菌素的耐药,该文综述了铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、沙门氏菌和弗朗西斯菌等重要革兰阴性菌中,脂质A修饰的研究进展,以期为临床多黏菌素耐药机制及其相关药物的开发提供参考。
- 李国亮郑昆陈代杰王华邵雷
- 关键词：革兰阴性菌耐药机制多重耐药菌
- 增加cmcJ基因表达盒拷贝数对转化头孢菌素C效率的影响
- 2013年
- 研究表明利用棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus(ATCC27064)的粗酶液能够在头孢菌素C的7位添加一个甲氧基,得到的7α-甲氧基头孢菌素C,可以作为头霉素类抗生素的半合成前体。本研究首先构建含有棒状链霉菌中cmcJ基因的重组质粒pHJJ-2,再通过属间接合转移的方法将该基因片段导入棒状链霉菌中,得到cmcJ基因表达盒增加的棒状链霉菌重组突变株。结果表明,重组突变株将头孢菌素C转化为羟基化头孢菌素C的转化率,从野生型菌株的57.0%提高到重组突变株的67.4%;甲氧基头孢菌素C的转化率由野生型的43.1%提高到重组突变株的51.9%。
- 黄娟娟郭兆霞李继安刘伟邵雷陈代杰
- 关键词：头孢菌素C生物转化棒状链霉菌基因重组
