中国临床肿瘤学科学基金(Y-2006-0009)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李荣罗荣城梁继珍郑航张军一更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：中国临床肿瘤学科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 逆转录病毒介导的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的构建逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,获取重组逆转录病毒,并将SHP-1基因转导入乳腺癌MDA-MB-231细胞株。方法采用RT-PCR方法从高表达SHP-1的人乳腺癌细胞株MCF-7中克隆出SHP-1基因全长cDNA,构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,通过脂质体介导将其转染入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将病毒感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231。采用Western blotting方法检测SHP-1基因在MDA-MB-231细胞中的表达情况。结果成功构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,转染包装细胞PT67,筛选出对G418具有稳定抗性的克隆PT67/SHP-1,获取重组逆转录病毒上清液,并感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231。从蛋白水平证实,感染后的MDA-MB-231有SHP-1基因的表达。结论将SHP-1基因定向克隆入逆转录病毒载体的方法可成功获取重组逆转录病毒,感染MDA-MB-231细胞得到稳定表达SHP-1基因MDA-MB-231/SHP-1,为进一步研究奠定了基础。
- 梁继珍李荣张军一郑航罗荣城
- 关键词：SHP-1酪氨酸磷酸酶逆转录病毒
