国家自然科学基金(39900036)
- 作品数：22 被引量：239H指数：10
- 相关作者：王常勇赵强段翠密郭希民范明更多>>
- 相关机构：军事医学科学院第三军医大学西南医院中国科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 组织工程化人工骨修复颅骨缺损的研究被引量：25
- 2001年
- 目的 应用同种异体兔成骨细胞研究组织工程化人工骨对骨缺损的修复能力。方法 取 4周龄新西兰幼兔的颅骨组织 ,应用胰酶及I型胶原酶消化 ,经分离、培养而获得的成骨细胞种植到可降解聚合物 (PLGA)泡沫材料上 ,体外培养 1周后 ,将两者的复合体移植到兔颅骨缺损区域 ,细胞接种浓度为 4× 1 0 10 个 /L。分别于术后 4、8、1 2周取材 ,进行大体、X线、组织学及免疫组织化学观察。以缺损区单纯植入泡沫材料或单纯种植成骨细胞为对照组。结果 成骨细胞 支架复合体组颅骨缺损修复明显 ,两对照组颅骨缺损无明显修复。术后 1 2周 ,对各组免疫组织化学染色结果进行图像分析 ,其中实验组灰度值为 92 .6,单纯泡沫材料组与单纯种植成骨细胞组灰度值分别为 1 3 1 .7及 1 1 9.3。结论 本实验构建的组织工程化人工骨具有较强的颅骨缺损修复能力 。
- 曹军凯王常勇赵强石桂欣王身国贝建中范明
- 关键词：成骨细胞颅骨缺损人工骨
- 组织工程骨对羊节段性骨缺损的修复被引量：7
- 2005年
- 目的探讨自体骨髓间充质干细胞(MSCs)复合生物活性陶瓷材料β磷酸三钙(TCP)修复羊跖骨节段性缺损的能力。方法将24只成年中国美利奴绵羊随机分成3组,制备单侧跖骨21mm长节段性缺损,缺损分别采用相应方法修复材料+细胞组,缺损区植入βTCP+MSCs复合体(n=10);单纯材料组,缺损区植入单纯βTCP(n=10);空白组,缺损区不作处理(n=4)。术后1、3和6月处死动物并取材,做大体形态学、组织学、Ⅹ线检查。结果术后6月检查结果显示,在材料+细胞组,骨生成能力明显强于单纯材料组;而空白组仅在骨折断面处生成少量松质骨,骨缺损不能修复。结论生物活性陶瓷βTCP与MSCs结合能明显提高骨生成速度,在修复长骨干节段性缺损方面具有潜在的临床应用价值。
- 赵子义陈新郭希民王常勇徐莘香段翠密
- 关键词：节段性骨缺损组织工程骨节段性跖骨骨生成体形
- 采用组织工程技术再造鼻翼软骨的实验研究被引量：4
- 2001年
- 王常勇赵强王永红石桂欣王身国贝建中
- 关键词：鼻翼软骨美容术
- 生物降解聚合物—聚乳酸泡沫材料(D.L-PLA)的研制及物理机械性能检测被引量：15
- 2000年
- 本研究以生物降解聚合物—聚乳酸 (D .L PLA)为原料 ,在测定材料分子量、筛选颗粒型氯化钠及轮廓制图的基础上 ,应用溶媒投放、颗粒沥滤技术制备了单片方形或圆形的D .L PLA多孔生物降解膜 ,并采用层压技术 ,将 2 3层D .L PLA多孔性膜状物加工成三维立体聚合物泡沫材料。随后 ,对加工的泡沫材料物理、机械性能进行了检测 ,通过对检测结果的分析表明 :采用层压技术可以研制、加工出均匀多孔、可用于细胞移植的支架材料。
- 王常勇王勤毛天球王会信朱萧玲
- 关键词：聚乳酸层压技术
- 大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
- 2006年
- 为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定了细胞周期及CD29,CD44,CD45和HLA-DR的表达。结果表明,在体外培养条件下大鼠MSCs贴壁生长,为成纤维细胞样;CD45和HLA-DR的表达呈阴性,CD29和CD44的表达呈阳性;细胞周期的G0/G1期约占95%,具有原始细胞的特征。说明建立的体外培养扩增体系可获得形态单一、生长稳定、增殖性较强、较均一的大鼠MSCs。
- 李延清刘霞
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞形态细胞周期密度梯度离心流式细胞术
- 成人骨髓基质干细胞的分离与纯化被引量：13
- 2004年
- 目的利用免疫磁珠分离成人骨髓神经生长因子受体(nervegrowthfactorreceptor,NGFR)阳性细胞,获得同质性骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)。方法采用Percoll密度梯度离心法分离成人骨髓中单个核细胞(mononuclearcells,MNCs)。对MNCs进行常规贴壁培养或应用磁分离技术分离NGFR+细胞。分别检测NGFR+细胞和常规贴壁培养所获BMSCs体外扩增和集落形成能力,分析其细胞表型和细胞周期,并进行成骨、成脂肪诱导。结果免疫磁珠分离获得NGFR+细胞的纯度为(90.4±4.7)%,NGFR+细胞较贴壁培养获得BMSCs具备更强增殖能力和成骨及成脂肪分化潜能。结论利用免疫磁珠分离骨髓NGFR+细胞可以获得同质性原始BMSCs。
- 赵子义郭希民王常勇徐莘香段翠密董灵芝李晶
- 关键词：基质干细胞骨髓神经生长因子受体
- 骨髓间质干细胞复合生物陶瓷构建组织工程化人工软骨被引量：19
- 2003年
- 目的 探索以多孔β-磷酸三钙 (β- TCP)生物陶瓷材料为支架 ,经体外诱导的骨髓间质干细胞 (MSCs)为种子细胞 ,构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 将 2 8只中国美利奴绵羊分为三组。实验组 (n=12 ) :分离培养羊自体第 7代 MSCs,经转化生长因子 - β诱导后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入预制的羊单侧肱骨近端关节面缺损处 ;单纯材料组 (n=12 ) :采用单纯β- TCP材料修复羊关节软骨缺损 ;空白对照组 (n=4 ) :制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复。术后 12周和 2 4周分别取材 ,进行组织学、组织化学和免疫组织化学分析。结果 实验组术后 12周羊关节软骨缺损处肉眼可见透明软骨样组织形成 ,组织学检查发现 ,材料降解明显 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织 ,软骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 2 4周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生软骨组织所取代。单纯材料组术后 12周 ,缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入 ,支架材料吸收明显 ;术后 2 4周 ,见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生软骨形成。空白对照组至术后 2 4周 。
- 郭希民王常勇薄斌方泽强段翠密赵强王永红张旭辉范明卢建熙
- 关键词：骨髓间质干细胞人工软骨生物陶瓷材料Β-磷酸三钙
- 采用温敏性壳聚糖水凝胶体外构建组织工程化软骨的实验研究被引量：16
- 2007年
- 目的验证自行制备的温敏性壳聚糖水凝胶作为软骨细胞支架材料构建组织工程化软骨的可行性。方法以壳聚糖、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素为原料,制备温敏性壳聚糖水凝胶,通过SD大鼠肌内注射植入,进行组织相容性检测。在此基础上,将其与软骨细胞复合构建组织工程化软骨,观察软骨细胞在壳聚糖水凝胶中的存活情况,并于体外培养3周后,作相关组织形态学检测。结果制备的壳聚糖水凝胶具有温度敏感性,即室温时为液态,37℃时10～15min可发生交联反应成为固态凝胶。SD大鼠肌内注射不同时间点组织相容性检测表明,该材料具有良好的组织相容性,植入体内2、4周时有少量炎性细胞浸润,6周时材料降解明显,8周时已经基本降解。采用该材料构建的组织工程化软骨体外培养3周后取材,通过组织学检查,HE染色可观察到软骨陷窝样结构,甲苯胺蓝染色、番红O染色及免疫组化染色结果显示软骨细胞具有分泌细胞外基质的功能。结论本研究自行制备的温敏性壳聚糖水凝胶材料具有良好的组织相容性,将其与软骨细胞复合后,可以在体外再造组织工程化软骨,是一种有广泛应用前景的软骨组织工程支架材料。
- 郝彤刘暾吕双红王常勇
- 关键词：软骨温度敏感壳聚糖水凝胶
- 应用旋转细胞培养系统建造组织工程化人工软骨的实验研究被引量：1
- 2001年
- 王常勇刘爽赵强石桂欣王身国贝建中范明
- 关键词：人工软骨组织工程化软骨缺损
- 应用旋转生物反应器开展软骨组织工程研究被引量：2
- 2000年
- 目的 应用旋转生物反应器(RCCS)在体外条件下培育具有一定形状的组织工程化人工软骨,以便为软骨组织工程产品产业化生产奠定基础。方法 将兔关节软骨细胞接种到圆形或方形可降解聚合物材料上,然后在RCCS内进行培养,并以在培养瓶内培养复合体为对照组。在体外培养期间,对复合体培育产物氨基糖胺聚糖(GAG)及DNA含量进行定量测量。经体外培养后,将复合体植入到裸鼠背部皮下,术后不同时间取材,进行大体、组织学等检查。结果 经RCCS培养的复合体在体外培养期间以及体内植入后均有明显软骨形成,而对照组则仅见少量软骨形成。复合体体外培育产物检测结果表明,在RCCS内培育的复合体GAG和DNA含量明显高于对照组。结论 RCCS与以单层生长方式为主的传统细胞培养装置—培养瓶相比,能够提供更适宜的外部环境,从而有利于软骨细胞在支架内形成人工软骨组织。
- 王常勇蔡晴刘爽王身国赵强贝建中范明
- 关键词：软骨细胞软骨旋转生物反应器
