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蒲公英ISSR-PCR反应体系及扩增程序的建立与优化被引量：9: 2012年; 目的:优化蒲公英ISSR-PCR反应体系及扩增程序;筛选适合的引物,并确定最佳退火温度。方法:采用CTAB法提取蒲公英叶片的DNA,利用正交试验设计,从Taq酶MIX、模板DNA、引物3种因素2个水平,对蒲公英ISSR-PCR反应体系进行考察;采用单因素实验对其扩增程序进行优化。结果:确立了适合于蒲公英的最佳ISSR-PCR反应方法,即在25μL反应体系中,内含Taq酶MIX 15μL(1.25 U Taq DNA聚合酶,1.8 mmol.L-1 Mg2+,dNTPs各0.24 mmol.L-1),0.3μmol.L-1引物,5 ng模板。在此基础上,从50条引物中筛选出16条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论:采用单因子试验和正交设计方法可以快速建立ISSR-PCR反应体系,经过验证,证明该体系稳定可靠,可用于蒲公英遗传分析。; 李喜凤邱天宝张红梅胡利欣胡春月郑楠楠唐露; 关键词：蒲公英 ISSR-PCR 正交实验设计

不同种群蒲公英的内转录间隔区(ITS)序列及其亲缘关系分析被引量：4: 2013年; 目的对20个不同种源蒲公英样品内转录间隔区(ITS)序列进行序列测定与分析,分析其遗传关系。方法用特异引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后,用PCR产物直接测序法测序。用DNASRTAR软件分析测序结果。结果各样品的内转录间隔区序列总长为711 bp,ITS1、5.8S、ITS2序列长度分别为225、262、226 bp。5.8S区较为保守,ITS1和ITS2碱基频率差异显著。结论内转录间隔区序列分析技术可用于蒲公英不同种群的亲缘关系分析。; 李喜凤邱天宝张红梅胡利欣胡春月郑楠楠唐露; 关键词：蒲公英亲缘关系

蒲公英遗传多样性的ISSR分析被引量：8: 2012年; 目的分析蒲公英的遗传多样性。方法采用ISSR分子标记对21个居群蒲公英遗传多样性进行分析,用软件Popgen32分析Nei’s基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I),采用NTSYS 2.10e软件进行聚类分析和主坐标分析。结果 16条ISSR引物共扩增出166条条带,其中多态性条带152条,平均多态性百分率为90.4%,平均H为0.286 5,平均I为0.437 0;遗传距离和遗传一致度分别为0.156 2～0.590 2和0.554 2～0.855 4;UPMGA法进行聚类分析显示,聚类结果与地理来源有较强的一致性,可以看出来源于同一地区的蒲公英种质聚在一起,呈现出一定的地域性分布规律。结论采用ISSR分析蒲公英遗传多样性,蒲公英表现出丰富的多态性,表明可以用ISSR标记技术对蒲公英进行分子水平的遗传多样性分析。; 李喜凤邱天宝张红梅胡春月胡利欣郑楠楠唐露; 关键词：蒲公英 ISSR 聚类分析

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河南省教育厅自然科学基金(2010A360010)