河南省医学科技攻关计划项目(2008A320041)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李雪峰秦贵军饶小娟马晓君更多>>
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- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
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- FoxO1基因沉默对胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗的影响及其机制被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨抑制叉头状转录因子O1（FoxO1）基因表达对胰岛素抵抗HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响及可能机制.方法 构建针对转录因子FoxO1 mRNA特异性的携带红色荧光标记的siRNA载体,并测序鉴定.高浓度（10-6mol/L）胰岛素诱导24 h建立胰岛素抵抗细胞模型.实验共分4组：A组为普通培养基培养的细胞组;B组为未处理胰岛索抵抗细胞组;C组为转染FOxO1 siRNA载体的胰岛素抵抗细胞组;D组为以转染试剂为对照的胰岛素抵抗细胞组.转染后荧光显微镜下观察红色荧光的表达;葡萄糖氧化酶法检测各组细胞葡萄糖的消耗;RT-PCR技术检测FOxO1 mRNA表达;Western印迹和免疫沉淀技术检测胰岛素受体底物2（IRS-2）蛋白表达及酪氨酸磷酸化水平.结果 经测序,成功构建了FoxO1 siRNA 载体.在转染后48 h,细胞内红色荧光表达最强.此时,与A组比较,B组葡萄糖消耗量降低（P〈0.01）,FoxO1 mRNA表达增强（P〈0.05）,IRS-2蛋白表达无显著性差别（P〉0.05）,但其酪氨酸磷酸化明显降低（P〈O.01）;与B组比较,C组FOxO1 mRNA表达明显降低（P〈0.01）,细胞葡萄糖消耗量增加（P〈0.05）,IRS-2蛋白酪氨酸磷酸化明显增强（P〈0.01）;与B组比较,D组各项指标表达差异不具有统计学意义（P〉0.05）.结论 抑制FoxO1基因在胰岛素抵抗细胞中的高表达,可改善胰岛素敏感性,其机制可能是通过反馈调节IRS-2蛋白酪氨酸磷酸化,增强胰岛素信号转导.
- 饶小娟秦贵军马晓君李雪峰
- 关键词：胰岛素抵抗叉头转录因子胰岛素受体底物2
