国家重点基础研究发展计划(2012CB722306)
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李光鹏白春玲魏著英吕洋王煜更多>>
- 相关机构：内蒙古大学内蒙古医科大学附属医院西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- microRNA-483和microRNA-486在克隆和转fat-1基因牛组织中的表达
- 2016年
- 利用荧光定量PCR比较正常受精牛、克隆牛和转基因牛的心、肝、脾、肺、肾、胎盘、子叶、子宫内膜中miR-483和miR-486的表达水平。结果显示,miR-483和miR-486在正常受精牛、克隆牛和转fat-1基因牛的组织中均有表达,其中在心脏中表达量显著高于其他组织。而转fat-1基因牛心脏中miR-483和miR-486表达量均低于正常牛。miR-483和miR-486在不同组织中表达量存在一定差异,在心脏中呈现高表达,提示miR-483和miR-486表达降低可能与心肌肥大、心肌梗死等病理生理过程有关。
- 吕洋王煜孙佳佳弓春玲李光鹏
- 关键词：转基因牛心脏
- miRNA与子宫内膜容受性
- 2013年
- microRNAs(miRNAs)是一种内源性非编码小RNA,以完全或非完全互补的方式与其靶mRNA相结合,通过影响靶基因转录或翻译来调控细胞发育、分化、增殖、凋亡及疾病的发生发展等.在胚胎着床的子宫内膜容受性形成及蜕膜化过程中,胚胎滋养层细胞对子宫内膜的有控性侵袭是胎儿正常发育的基础.虽然,目前对miRNA与子宫内膜容受性的关系仍不十分清楚,但是已有一些研究表明,在正常妊娠胎盘、绒毛和正常子宫内膜中,一些miRNA与靶基因存在一定的的互作关系.本文简要综述了miRNA与子宫内膜容受性相关的研究进展.
- 王煜吕洋王丽岩李光鹏
- 关键词：微小RNA子宫内膜容受性胚胎着床
- 正常培养条件下绵羊卵母细胞减数分裂从中期Ⅰ至中期Ⅲ的动态变化过程
- 2016年
- 以绵羊卵母细胞为研究对象,通过免疫组织化学的方法研究其染色体和纺锤体微管及微丝在体外成熟、孤雌激活过程中的动态变化。结果表明:(1)纺锤体的形态由中期的桶形,变成早后期的圆柱形及后期和末期细长而扁平的三角锥形,与椎体底面连接的染色质将来进入极体并最终被排出。(2)染色体形态从中期单个的清晰可见的状态,变为后期和末期凝缩的染色质状态,随后在下一个中期再次呈现出清晰可见的形态。(3)第一次减数分裂中期(MI)纺锤体比第二次减数分裂中期(MII)和第三次减数分裂中期(MIII)大,但MII期纺锤体形态比MI期更接近桶形。(4)几乎所有组成纺锤体的微管和微丝都被分配到极体中。
- 李欣欣白春玲魏著英李光鹏
- 关键词：减数分裂微管微丝纺锤体卵母细胞绵羊
- Cdc42蛋白在牛卵母细胞中的表达分布及对其成熟的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】探明Cdc42蛋白在牛卵母细胞成熟过程中的表达及分布规律,并且研究抑制Cdc42活性对于牛卵母细胞成熟的影响。【方法】首先通过收集体外成熟不同时间(0—24 h)的牛卵母细胞,用Western blotting的方法检测Cdc42蛋白在牛卵母细胞中的表达量变化情况,通过免疫细胞化学的方法检测Cdc42蛋白在牛卵母细胞中的分布及定位情况。根据GenBank公布的牛Cdc42基因(GenBank登录号:NM_001046332.1)的mRNA序列设计引物,并在正向和反向引物的末端分别加上KpnⅠ和EcoRⅠ酶切位点,用PCR的方法扩增牛Cdc42基因的CDS区,将PCR产物和pMD19T载体连接得到野生型的克隆载体pMD19T-Cdc42WT。用定点突变引物以pMD19T-Cdc42WT为模板进行PCR反应,得到Cdc42的显性负性突变体Cdc42T17N的克隆载体pMD19T-Cdc42T17N。将pMD19T-Cdc42WT和pMD19T-Cdc42T17N分别酶切后,将Cdc42WT(775 bp)和Cdc42T17N(775 bp)片段分别连接到pcDNA3.1(+)的多克隆位点区域,得到相应的原核表达载体pcDNA3.1(+)-Cdc42WT和pcDNA3.1(+)-Cdc42T17N。用体外转录的方法分别得到Cdc42WT和Cdc42T17N的cRNA,用显微注射的方法将相应的cRNA分别注入到牛GV期卵母细胞质内,检测其成熟率的变化。【结果】①Cdc42蛋白分别在牛卵母细胞中成熟培养0、4、8、12、16、20以及24 h时表达量没有明显差异,但是其分布规律随着减数分裂的进行发生着动态的变化:Cdc42蛋白在卵母细胞皮质区域集中分布的模式在生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞中很少出现,而在第一次减数分裂中期(metaphaseⅠ,MⅠ)卵母细胞中出现得最多也最为明显;Cdc42蛋白在染色体附近的皮质富集的现象开始出现于前中期(pro-metaphaseⅠ,pMⅠ),并且出现频率从pMⅠ期到第2次减数分裂中期(metaphaseⅡ,MⅡ)逐渐增多;Cdc42蛋白和纺锤体重叠定位的现象在第1次减数分裂后期(anaphaseⅠ,AⅠ)到末期(telophaseⅠ,TⅠ)的卵母细胞中占有有很高比例,而到M�
- 刘扬银凤霞白春玲魏著英昝林森李光鹏
- 关键词：CDC42免疫细胞化学体外转录显微注射
