国家自然科学基金(81072072)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
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- Bex2抑制神经胶质瘤细胞凋亡及其与JNK/MAPK通路关系的研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究Bex2对神经胶质瘤细胞凋亡的影响并探讨其作用机制,为胶质瘤的基因治疗提供理论和实验依据。方法 1利用前期构建pEGFP-N1-Bex2真核表达载体,脂质体转染法过表达Bex2后12、24、48、72 h收集U251神经胶质瘤细胞,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用免疫印迹法检测Bex2基因的表达及活化型caspase-3、p-JNK、p-c-Jun的变化。2收集临床神经胶质瘤手术标本,通过免疫组织化学检测Bex2、活化型caspase-3、p-JNK、p-c-Jun蛋白的表达,并与正常脑组织比较,分析它们之间的相关关系。结果 1流式细胞术检测结果显示,过表达Bex2后12、24、48、72 h各时间点细胞凋亡率明显低于空载体组(P<0.05),转染48 h组低于其他时间点组(P<0.05)。免疫印迹法检测表明,转染后48 h细胞的活化型caspase-3、p-JNK、p-c-Jun含量较空载体组和空白对照组降低(P<0.05)。2免疫组织化学结果表明,神经胶质瘤组织较正常脑组织中Bex2表达增高,活化型caspase-3、p-JNK、p-c-Jun蛋白低表达(P<0.05)。结论 Bex2在神经胶质瘤组织中高表达,并通过下调JNK/MAPK通路活性抑制胶质瘤细胞凋亡,进而促进肿瘤的发生和发展。
- 王永于如同孟庆明
- 关键词：细胞凋亡P-JNK
- 槲皮素上调PGC-1α对创伤性脑损伤后炎症反应致神经细胞凋亡的影响被引量：13
- 2020年
- 目的探讨槲皮素(Que)对创伤性脑损伤(TBI)后过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)的上调作用,以及对神经细胞氧化应激及炎性反应的影响。方法48只ICR小鼠,随机分为4组:假手术组(Sham组),外伤组(TBI组),溶剂组(TBI+V组)和槲皮素组(TBI+Que组),每组12只。采用自由落体法制备小鼠TBI模型。Sham组小鼠仅切开头皮;TBI+Que组小鼠于伤后30 min予以腹腔注射槲皮素50 mg/kg;TBI+V组小鼠于伤后30 min腹腔注射同等体积的DMSO;TBI组小鼠于伤后不注射。于外伤1 d后,检测各组小鼠的神经损伤严重程度评分(neurological severity score,NSS)和脑含水量;采用TUNEL染色检测神经细胞凋亡率;Western blot法检测损伤灶周围脑组织的PGC-1α、IL-6、TNF-α蛋白表达水平。结果与Sham组相比,TBI组小鼠的脑含水量、细胞凋亡率及NSS评分明显增高(P=0.008、0.001、0.03),PGC-1α、IL-6、TNF-α蛋白水平明显增高(均P=0.01)。与TBI组相比,TBI+Que组小鼠的含水量、细胞凋亡率明显减低(P=0.03、0.007),NSS评分及PGC-1α、IL-6、TNF-α蛋白水平也明显减低(P=0.001、0.01、0.003、0.009)。结论Que可上调TBI后PGC-1α的表达,从而减少TBI后炎症反应所致的脑组织神经细胞凋亡,起到有效的脑保护作用。
- 翟效甫王子钰于如同
- 关键词：槲皮素创伤性脑损伤细胞凋亡
- 真核表达质粒pEGFP-N1-Bex2的构建及其在U251细胞中的表达
- 2013年
- 目的构建pEGFP-N1-Bex2真核表达质粒,并探索其在U251神经胶质瘤细胞中的表达。方法以正常人脑组织总RNA为模板,采用RT-PCR法获得Bex2的cDNA,并与pEGFP-N1载体连接,构建pEGFP-N1-Bex2真核表达质粒。对pEGFP-N1-Bex2重组质粒的菌液行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定。在U251细胞中用脂质体转染法转染pEGFP-N1-Bex2真核表达载体过表达Bex2,分别于转染后12、24、48、72h收集细胞,用Western blot检测Bex2基因的表达情况。结果真核表达质粒pEGFP-N1-Bex2经PCR及双酶切鉴定,均可见387bp的目的基因条带,并单倍正向克隆至质粒中。转染质粒pEGFP-N1-Bex2后荧光显微镜下观察U251细胞内有绿色荧光蛋白表达,Western blot检测见47KD和26KD分别有清晰的外源性Bex2-GFP融合蛋白和GFP蛋白的表达。pEGFP-N1-Bex2在转染U251细胞后12h即有表达,48h达到高峰。结论成功构建pEGFP-N1-Bex2真核表达质粒,瞬时转染后在U251细胞中顺利表达。
- 王永孟庆明周秀萍石琼冯守信李忠喜于如同
- 关键词：神经胶质瘤
