江苏省自然科学基金(BK2009102)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
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- 转化生长因子-β_1siRNA表达载体的构建
- 2012年
- 目的构建人转化生长因子β1(TGF-β1)基因siRNA质粒载体,为放射性肺损伤以及其他TGF-β1高表达疾病的基因治疗提供新的方法。方法根据人TGF-β1mRNA序列为模板,设计合成相应的寡核苷酸序列,经退火形成双链DNA片段,克隆到线性pRNAT载体中,用酶切方法对重组体进行鉴定,最后将构建的TGF-β1特异性siRNA质粒载体转染人胚肺成纤维细胞HFL-I细胞,通过通过荧光定量PCR检测和ELISA检测TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平,以及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到线性pRNAT载体质粒中,与对照组相比,TGF-β1mRNA水平及蛋白水平的表达量均受到明显抑制,人胚肺成纤维细胞凋亡明显增加,统计有显著性差异(P<0.05)。结论成功构建了人TGF-β1基因siRNA质粒载体,对于放射性肺损伤以及其他TGF-β1高表达疾病的基因治疗奠定了基础。
- 陆忠华王建华刘芬菊楼奕青
- 关键词：转化生长因子-Β1SIRNA
- 小鼠放射性肺损伤模型的建立与鉴定被引量：7
- 2013年
- 目的建立小鼠放射性肺损伤模型。方法 80只雌性C57BL/6小鼠随机分为四组:A、B和C三组每组24只小鼠,分别单次X线照射12、20和30Gy;D组8只小鼠作为空白对照。照射后1、3d和1、2、4、8、16、24周8个时点取出肺组织,行HE、VG染色,观察肺纤维化形成,RT-PCR测定肺组织转化生长因子(TGF)-β1的表达。结果 A、B、C组均出现典型放射性肺损伤及肺纤维化表现,随着照射剂量的增加,肺部病变加重,且肺部纤维化出现提前。与D组相比,A、B、C组8个时点肺组织TGF-β1含量均显著增高(P<0.01)。结论成功建立了放射性肺损伤小鼠动物模型。
- 陆忠华万美珍马燕刘芬菊
- 关键词：放射性肺损伤动物模型
