安徽省高校省级自然科学研究项目(2006KJ089A)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：王佑民丁晓洁程媛丁振兴刘莉更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肥胖大鼠骨骼肌AMPK表达及其与糖脂代谢的关系被引量：10
- 2010年
- 目的探讨肥胖大鼠骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达及其对糖脂代谢的影响。方法将28只6周龄雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组,15只)和高脂饮食组(HF组,13只),分别测体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标。采用免疫印迹法测定各组大鼠骨骼肌中AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)的水平。以p-AMPK/AMPK代表AMPK的活性。结果与NC组大鼠相比,HF组大鼠的BW、FFA、TG、FPG、FINS均明显升高(P<0.05),骨骼肌中AMPK表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05),p-AMPK表达及AMPK活性(p-AMPK/AMPK)降低显著(均P<0.05)。骨骼肌组织p-AMPK表达水平与FPG、FFA呈负相关(P<0.05),AMPK活性与FPG、FFA、TG呈负相关(P<0.05),与FINS无相关性。结论高脂饮食诱导大鼠营养性肥胖,降低AMPK的活性,从而导致TG和TCH的合成增加,血糖升高,脂质在外周组织沉积增加。
- 程媛王佑民丁晓洁
- 关键词：环AMP依赖性蛋白激酶类肥胖症
- 人脂联素基因真核表达载体的构建及表达
- 2006年
- 目的克隆人脂联素(hAPM)基因及构建真核表达重组体PGEX-4T-1/hAPMcDNA,诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶-hAPM(GST-hAPM)融合蛋白。方法应用RT-PCR法从中国汉族人大网膜脂肪垫总RNA中扩增出APMcDNA全长基因,并在基因上下游分别克隆上EcoR1、Sal1两个酶切位点,将其定向导入PGEX-4T-1多克隆位点,构建PGEX-4T-1/hAPM融合表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后进行诱导表达。结果从脂肪组织总RNA中扩增得到760bp片段APM基因,经双酶切鉴定及测序分析,证明hAPMcD-NA已克隆到PGEX-4T-1载体中。免疫印迹证实,诱导表达的融合蛋白可被多克隆抗体Acrp30(N-20)-R识别。结论成功诱导表达出融合蛋白GST-hAPM,为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组hAPM创造条件。
- 丁振兴王佑民刘莉
- 关键词：真核细胞
