重庆市自然科学基金(CSTC2007BB0268)
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
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- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院重庆市妇幼保健院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布抑制胃癌多药耐药基因表达的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨选择性环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布对胃癌细胞株BGC823多药耐药(mdr)1表达的影响。方法:胃癌细胞株BGC823经浓度分别为0、10、100μmol/L的塞来昔布处理后,酶联免疫吸附试验检测塞来昔布对胃癌细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的影响,24、48h后用RT-PCR检测多药耐药(mdr)1 mRNA表达,48h后用免疫细胞化学染色法检测P-gp表达。结果:塞来昔布可显著抑制胃癌细胞株BGC823PGE2分泌。并呈浓度依赖性(P<0.05)。不同浓度塞来昔布作用于细胞后,胃癌细胞株BGC823的mdrl/P-gp表达受不同程度抑制,100μmol/L的塞来昔布对mdrl mRNA表达抑制作用强于10μmol/L(P<0.01)。不同浓度药物与测量时间为交互作用,作用48h与24h相比,塞来昔布对mdrl mRNA表达的抑制作用更强(P<0.01)。结论:塞来昔布可抑制BGC823的mdr1/P-gp表达,且呈剂量效应关系。塞来昔布可能通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达,从而抑制P-gp表达。选择性COX-2抑制剂可能有助于减轻肿瘤细胞对化疗药物的耐药性。
- 彭力王萍周远大何海霞
- 关键词：环氧合酶抑制剂P糖蛋白多药耐药
- 小鼠Smad6基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
- 2011年
- 构建小鼠Smad6基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默骨髓树突状细胞(BMDC)的Smad6基因表达,为构建骨髓致耐受DC用于哮喘等自身免疫疾病的研究。设计小鼠Smad6 shRNA序列,合成、退火,得到双链DNA,与经酶切后的Psih1-H1-copGFP shRNA Vector载体连接产生LV-shSmad6慢病毒载体,并测序鉴定。转染293TN细胞,包装产生慢病毒,测定滴度。感染小鼠骨髓树突细胞,检测Smad6基因的表达状况成功构建Smad6 shRNA的慢病毒载体LV-shSmad6。包装慢病毒,并显著抑制Smad6 mRNA水平及蛋白水平的表达。成功构建出小鼠Smad6基因shR-NA慢病毒载体,为后期研究Smad6基因在哮喘发病机制及新治疗方法提供了稳定的转染细胞载体。
- 刘铮代继宏符州冯琳琳
- 关键词：SMAD6RNA干扰慢病毒载体哮喘
- 支气管哮喘中CD4^+CD_(25)^+调节性T细胞作用的研究进展被引量：2
- 2009年
- 支气管哮喘是一种儿童时期最常见的慢性疾病,单纯的Thl/Th2应答失衡并不能完全解释支气管哮喘的发生,伴随着CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的研究进展,人们发现与CD4+CD25+Treg细胞相关的因素如叉头/翼状螺旋转录因子、血红蛋白加氧酶-1、转化生长因子β、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4与支气管哮喘均有密切的联系。
- 冯琳琳代继宏符州
- 关键词：支气管哮喘CD4^+CD25^+T细胞转化生长因子Β细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4
- Smad蛋白在转化生长因子β信号转导通路中的作用
- 2010年
- 转化生长因子β（TGF—β）超家族的细胞因子在细胞生长和分化、物质代谢等方面都有极其重要的作用，这种多功能性决定在细胞内必然存在复杂的TGF—β信号传导通路。Smad蛋自家族是近年来发现的新的细胞内信号传导蛋白，是转化生长因子-β（TGF—β）信号转导通路中关键的介质，TGF—β通过结合细胞表面特异性受体而启动下游的Smad蛋白通路。因而研究Smad蛋白家族的分类和结构，以及Smad蛋白在TGF—β超家族信号传导中的作用及其复杂的调节机制很有意义。
- 刘铮代继宏符州
- 关键词：转化生长因子-ΒSMAD信号转导
- 小鼠骨髓源树突状细胞体外诱导培养及初步鉴定被引量：4
- 2011年
- 用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,进行形态学变化观察,分析细胞表面分子,刺激T细胞增殖,探讨小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)体外诱导培养并进行初步鉴定。体外培养9d后BMDC可达80%以上,光镜下可见典型的树突状细胞形态。清楚表达成熟期主要表面标志物,可显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖。获得了较高纯度的BMDC,避免了使用传统磁珠分离方法所带来的成本高,操作复杂,产出率低的弊端,为研究BMDC功能以及运用开展下游实验提供材料。
- 刘铮代继宏符州冯琳琳
- 关键词：树突状细胞体外诱导培养
- 白介素-13(IL-13)和白介素-18(IL-18)调节支气管哮喘大鼠神经生长因子mRNA(NGF mRNA)的实验研究被引量：11
- 2010年
- 目的:初步探讨IL-13和IL-18对支气管哮喘大鼠神经生长因子mRNA(NGFmRNA)表达的影响。方法:建立Wistar大鼠哮喘模型,分离脾淋巴细胞并培养,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定NGF mRNA的基础水平,并观察予以IL-18和IL-13干预后NGF mRNA表达的情况。结果:哮喘大鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,并在ConA刺激下呈时间依赖性增强。空白对照组培养脾淋巴细胞0、12、24、48h时基础NGF mRNA表达量随着时间的延长逐渐升高,IL-13组随着时间的延长基础NGF mRNA表达量逐渐升高。随着时间的延长,IL-13组NGF mRNA表达相对值逐渐升高,并且至12h后分别显著高于各时间点的空白对照组(P<0.01)(表1)。同时随着IL-13干预浓度的依次增高,NGF mRNA表达相对值逐渐升高,并且分别与前一梯度低浓度处理组相比较有显著差异(P<0.05);而随着IL-18干预浓度的依次增高,NGF mRNA表达相对值却逐渐降低。结论:在哮喘中Th2类细胞因子IL-13可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IL-18可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性;Th1/Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA表达间接促进其诱导神经源性炎症。
- 廖翎帆陈文代继宏周远大何海霞
- 关键词：哮喘白细胞介素-13白细胞介素-18
- 脂多糖、转化生长因子-β1对小鼠骨髓来源树突状细胞的生物学作用被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨加入LPS、TGF-β1体外刺激小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的方法及其对生物学特性的作用。方法:GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠BMDC6d后,分别用培养基(对照组)、LPS、TGF-β1、LPS+TGF-β1,刺激BMDC48h后进行形态学观察,流式细胞术检测细胞表型CD11C、CD80、CD86、MHCⅡ,混合淋巴细胞反应检测其抗原提呈功能,收集上清液用ELISA检测IL-6,IL-12p70。结果:LPS组具有最典型的成熟样DC形态,CD80、CD86及MHCⅡ的表达水平显著升高,混合淋巴细胞反应和分泌IL-4、IL-12p70能力最强,与对照组,TGF-β1组,LPS+TGF-β1组比较差异具有统计学意义(P<0.05),TGF-β1组成熟样DC形态最不典型,CD80、CD86和MHCⅡ的表达水平最低,混合淋巴细胞反应和分泌IL-4、IL-12p70能力最弱,与对照组,LPS组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LPS在DC的分化晚期可以刺激其成熟,并且具有更高的生物学特性,TGF-β1不抑制DC的分化,但可以抑制DC的成熟,从而降低其生物学特性。
- 冯琳琳代继宏符州刘铮王莉佳李欣
- 关键词：脂多糖转化生长因子-Β1小鼠树突状细胞
