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细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响被引量：2: 2009年; 目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用，为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB／c小鼠成骨细胞，将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组，细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1．2Pa的流体剪切力，另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）和免疫荧光检测c—fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平，并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组，流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平（分别为0．1637±0．0303和0．0104±0．0070）和蛋白荧光强度（分别为177．14±9．37和150．95±6．17）升高，与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞（mRNA相对水平分别为0．0057±0．0021和0．0032±0．0014，蛋白荧光强度分别为117．96±4．11和119．77±5．19）相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流体剪切力加载下，细胞松弛素D组细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因表达过程中的重要条件。; 徐亚娟张艺平覃峰吴昌敬李友瑞付强; 关键词：细胞骨架成骨细胞基因 FOS 流体剪切力

沉默LIMK2基因对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响被引量：2: 2009年; 目的采用RNA干扰沉默LIMK2基因来抑制细胞骨架的改建，观察流体剪切力作用下其对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后，进行流体剪切力加载或不加载。分别应用逆转录（RT）一PCR和免疫荧光检测c—fosm RNA和蛋白的表达，并进行统计学分析。结果在无流体剪切力加载条件下，单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建，并不能使成骨细胞c-fos mRNA（0．0108±0．0074与0．0042±0．0018，t=-1．86，P〉0．05）和蛋白（121±7与1194-6，t=-1．272，P〉0．05）的表达升高；流体剪切力能使成骨细胞c-fosmRNA（0．22034-0．1532比0．0042±0．0018，t=-707．35，P〈0．05）和蛋白（1784-12比119±6，t=-30．761，P〈0．05）的表达水平显著升高；RNA干扰处理可显著提高流体剪切力诱导成骨细胞c-fosmRNA（0．52804-0．0879比0．22034-0．1532，t=-1007．00，P〈0．05）和蛋白（224±46比1784-12，t=-6．853，P〈0．05）的表达水平；采用RNA干扰的方法抑制细胞骨架的改建，可以对流体剪切力诱导成骨细胞c—fosmRNA（F=84．388，P〈0．05）和蛋白（F=42．409，P〈0．05）的表达起协同作用。结论采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架的改建，可以促进成骨细胞在流体剪切力作用下的c-fos基因表达。; 张艺平覃峰吴昌敬李友瑞陈睿邵敏峰付强; 关键词：成骨细胞基因 FOS 流体剪切力

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广东省科技计划工业攻关项目(20088030301121)

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