国家重点基础研究发展计划(K0805110064)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吴玉章汤玉瑜陈永文郭晟费蕾更多>>
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- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因芯片筛选HepG2与HepG2.2.15细胞中的差异表达基因被引量：2
- 2008年
- 目的探讨HepG2细胞及HepG2.2.15细胞中差异表达的基因并对其基因表达谱进行生物学信息分析。方法用Trizol一步法提取HepG2细胞及HepG2.2.15细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cD-NA探针,与基因芯片杂交;采用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,最后以差异为2倍的标准来确定差异表达基因。结果在54614个基因表达谱的筛选中,发现有4462个基因表达水平显著上调,2592个基因表达水平显著下调。结论HBV基因组及其表达产物对于肝细胞基因表达谱有显著影响,可能参与了肝癌的发生发展。
- 汤玉瑜陈永文费蕾吴玉章
- 关键词：基因芯片HEPG2细胞HEPG2.2.15细胞
- HBV基因组各基因真核表达载体的构建及转染被引量：4
- 2008年
- 目的构建HBV基因组各基因真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系。方法采用PCR方法,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBV基因的各基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcD-NA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用细胞流式技术及细胞免疫组化技术检测HBV各基因产物在细胞内的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/HBs、pcDNA3.1(+)/HBc、pcDNA3.1(+)/HBe、pcDNA3.1(+)/HBp、pcDNA3.1(+)/HB-preS1、pcDNA3.1(+)/HB-preS2、pcDNA3.1(+)/HBx真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染HepG2细胞系的建立为进一步研究各基因的功能奠定良好的实验基础。
- 汤玉瑜陈永文郭晟吴玉章
- 关键词：HBV真核表达载体基因表达
