吴阶平医学基金(320675012376)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：褚忠华张旸来伟许鹤洋黄汉源更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学华县人民医院更多>>
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- 肝再生磷酸酶-3诱导肿瘤相关性巨噬细胞分泌白细胞介素-6促进结肠癌细胞转移被引量：6
- 2014年
- 目的 探讨肝再生磷酸酶-3（PRL-3）在结肠癌微环境中通过肿瘤相关性巨噬细胞（TAMs）促进结肠癌细胞转移的机制。方法 将TAMs与稳转染PRL-3的结肠癌Lovo细胞（Lovo-P）进行体外共培养的方式,再通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）筛选出TAMs中上调的细胞因子。Western blot检测细胞因子蛋白水平。免疫荧光法检测结肠癌患者肿瘤切片中相关TAMs表达,Kaplan-Meier法绘制患者的生存曲线。结果 Real-time PCR检测结果显示,TAMs与Lovo-P细胞共培养比与Lovo-C细胞共培养后白细胞介素（IL）-6 mRNA表达明显升高（8.3±2.2）倍。Western blot检测结果显示TAMs与Lovo-P细胞共培养后IL-6表达上调180%。在共培养体系中预处理IL-6中和抗体（5 mg/L及10 mg/L）后,Lovo-P细胞侵袭性下降[（220±13）个比（132±12）个比（83±7）个]。免疫荧光检测结果显示结肠癌患者癌灶处肿瘤切片中TAMs与IL-6荧光重合,分布于肿瘤间质中,并且I期患者IL-6阳性TAMs数量要少于Ⅳ期患者[（24±4）个比（56±9）个]。生存曲线分析发现IL-6阳性且TAMs〈20个的患者生存期明显短于IL-6阳性且TAMs≤20个患者（27.3个月比12.2个月）。结论 PRL-3能够通过诱导TAMs分泌IL-6,促进结肠癌细胞转移,并影响患者的预后和生存。
- 黄汉源许鹤洋来伟曾献清张旸陈志坚李定文林峰褚忠华
- 关键词：肝再生磷酸酶-3白细胞介素-6结肠癌
- 肝再生磷酸酶-3上调缝隙连接蛋白26诱导结肠癌LoVo细胞间质上皮化被引量：2
- 2016年
- 目的探讨在结肠癌肝转移的肿瘤微环境中肝再生磷酸酶-3（PRL-3）对缝隙连接蛋白26（Cx26）的影响及促进结肠癌细胞间质上皮化（MET）的机制。方法将稳定转染PRL-3的LoVo细胞（LoVo-P）、对照组（LoVo-c）分别和肝细胞（1．02）模拟肿瘤微环境进行体外共培养0～3d后，Westernblot检测Cx26、上皮标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）和间质标志物N-钙黏蛋白（N—cadherin）的蛋白表达。Transwell侵袭小室法检测LoVo细胞侵袭能力变化。采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶（sP）法检测20例Ⅳ期结肠癌及肝转移灶中Cx26和E-cadherin的表达。结果Westernblot检测结果显示，LoVo-P细胞经共培养后Cx26的蛋白表达分别上升31．03％、58．39％、93．95％（P〈0．05），E—cadherin蛋白表达明显上升，N．cadherin蛋白表达受到抑制（P〈0．05），对照组中蛋白表达变化不明显。经过共培养后LoVo-P细胞侵袭能力明显降低（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示，Cx26和E-cadherin在肝转移灶中的阳性表达率（65％和75％）高于原发灶（40％和45％），差异有统计学意义（P〈0．05）。在结肠癌肝转移灶中Cx26和E．cadherin呈正相关（r：0．545，P〈0．05）。结论在共培养环境中PRL-3能通过上调Cx26诱导LoVo细胞MET并降低其侵袭能力。
- 黄永亮来伟曾育杰蓝球生陈池生黄健褚忠华
- 关键词：结肠癌肝再生磷酸酶-3
- 肿瘤性巨噬细胞对结肠癌细胞侵袭性的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察肿瘤性巨噬细胞（TAMs）在肿瘤微环境中对人结肠癌细胞侵袭性的影响.方法 模拟肿瘤微环境,分别通过Transwell共培养小室将TAMs（1×109/L）和结肠癌细胞Lovo（1×109/L）及SW480（1×109/L）进行共培养24h,收集TAMs 24 h的上清液加入Lovo（l×109/L）及SW480（1×109/L）中培养24 h,再经Transwell侵袭实验检测两株细胞的侵袭性.结果 肿瘤细胞共培养后均提高了侵袭性,其中Lovo[（344±220个比（230±12）个,P＜0.05],SW480[（303±23）个比（211±18）个,P＜0.05];而加入TAMs上清的肿瘤细胞侵袭性未获得明显的增强,其中Lovo[（257±22）个比（221±17）个,P＞0.05];SW480[（233±11）个比（209±19）个,P＞0.05].结论 TAMs在肿瘤微环境能够与结肠癌细胞相互作用,从而提高结肠癌细胞侵袭性.
- 许鹤洋来伟罗兴喜张旸褚忠华
- 关键词：结肠癌肿瘤微环境
- 结直肠癌患者差异蛋白质组学研究被引量：2
- 2014年
- 目的应用差异蛋白质组学方法筛选结直肠癌组织和对应正常组织的差异蛋白表达。方法采用双向凝胶电泳（2-DE）分离23例结直肠癌患者和对应正常黏膜组织的总蛋白，从中选取差异表达蛋白质位点，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI—TOF—TOF—MS）鉴定差异表达的蛋白质；然后采用Western blot验证蛋白质组学分析的结果。结果通过2-DE图谱分析发现8个差异蛋白质斑点，质谱鉴定出6种蛋白质，在结直肠癌患者组织中高表达的有3个，其余3个在正常组织黏膜中低表达。Western blot对表达增高的翻译调节的肿瘤蛋白（TCTP）进行检测，结果与蛋白质组学分析结果一致。结论蛋白质组学研究是筛选结直肠癌组织中特异性标志物的有效手段。
- 黄汉源来伟张旸曾献清陈志坚李定文褚忠华
- 关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳结直肠癌
- 肝再生磷酸酶-3通过细胞外调节蛋白激酶上调丝氨酸蛋白酶抑制剂E3促进Lovo细胞侵袭被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨肝再生磷酸酶-3（PRL-3）对丝氨酸蛋白酶抑制剂E3（serpinE3）的影响及机制,以及PRL-3和serpinF3对结肠癌Lovo细胞侵袭性的影响.方法 通过Western blot方法,分别检测已经稳转入PRL-3载体的Lovo-P细胞和对照组Lovo-C细胞中serpinE3的表达水平,Transwell小室检测Lovo细胞侵袭性.再给予细胞外调节蛋白激酶（ERK）特异性抑制剂U0126（10 μmol/L）预处理Lovo-P细胞6h,观察serpinE3表达的变化,检测Lovo-P细胞侵袭性的改变.结果 Western blot检测结果显示在转染人PRL-3的Lovo-P细胞中,serpinE3表达明显上调,Lovo-P细胞侵袭性增强[（378±13）个比（269±15）个,P＜0.05];而当特异性阻断ERK后,Lovo-P细胞中的serpinE3表达下调,并且细胞侵袭性也降低[（21l±9）个比（358±19）个,P＜0.05].结论 PRL-3能够通过ERK诱导serpinE3表达上调的方式,增加Lovo细胞的侵袭性.
- 许鹤洋林显敢罗兴喜张旸蓝球生褚忠华
- 关键词：细胞外调节蛋白激酶
