国家高技术研究发展计划(2006AA02Z438)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王祖郧祁芝珍张青雯杨永海王效义更多>>
- 相关机构：青海省地方病预防控制所军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼠疫耶尔森菌F1抗原的纯化方法改进及其免疫原性的评价被引量：4
- 2009年
- 目的建立从减毒鼠疫菌培养物中提取天然F1抗原的方法，评价F1抗原对鼠疫的免疫保护效果。方法通过用玻璃珠裂解菌体替代有机溶剂的方法，结合饱和硫酸铵沉淀和凝胶过滤的方法从鼠疫菌培养物中纯化出天然F1抗原。将F1抗原吸附到25％氢氧化铝佐剂中，肌肉注射免疫BALB／c小鼠，于初次免疫后第18周皮下攻毒10^4 CFU活鼠疫菌141强毒株。结果一次免疫的两个剂量组之间产生的抗体滴度差异无统计学意义，而加强免疫的两个剂量组中，F1-40μg剂量组产生的抗体滴度明显高于F1-20μg剂量组。F1抗原免疫的小鼠全部存活，而且健康状况良好，对照组小鼠全部死亡。结论本研究提供了一种简单、有效和便于大规模提取F1抗原的方法。提取的F1抗原具有较高的免疫原性，可作为鼠疫亚单位疫苗的重要抗原组分用于鼠疫亚单位疫苗的研制。
- 祁芝珍赵海红代瑞霞张青雯任玲玲杨永海李存香吴海莲何建魏荣杰王虎杨瑞馥王祖郧王效义
- 关键词：鼠疫耶尔森菌F1抗原免疫保护
- 鼠疫耶尔森氏菌rV270抗原的克隆、表达及其免疫保护作用评价被引量：7
- 2008年
- 目的:为研制鼠疫亚单位疫苗,克隆、表达并纯化去除产生免疫抑制作用序列后的鼠疫耶尔森氏菌LcrV抗原(rV270)。方法:依据已知的LcrV的核苷酸序列,避开其产生免疫抑制作用的区段设计引物,扩增rV270基因并克隆到pET24a载体中,在大肠杆菌BL21中表达His-rV270融合蛋白;表达产物先后经Co2+亲和层析和Sephacryl S-200 HR凝胶柱纯化,并在纯化过程中应用凝血酶切除His标签;氢氧化铝佐剂吸附重组抗原后免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第21天加强免疫1次,第5周使用104CFU鼠疫菌141强毒株攻毒,测定其免疫保护作用。结果:rV270以可溶性方式表达;应用Co2+亲和层析柱和Sephacryl S-200 HR凝胶柱结合凝血蛋白酶切除His标签的方法可得到不含标签的较高纯度的重组蛋白;攻毒实验中实验组小鼠全部存活,而对照组全部死亡。结论:获得了具有良好免疫保护作用的rV270蛋白,可用于鼠疫亚单位疫苗的研究。
- 王棠祁芝珍吴本传朱紫雯杨永海崔百忠戴瑞霞张青雯邱业峰王祖郧王虎郭兆彪杨瑞馥王效义
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌免疫保护
