上海市科委重大科技攻关项目(04DZ19207-1)
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
- 相关作者：黄静叶海峰王嘉吴自荣金明飞更多>>
- 相关机构：华东师范大学上海市食品药品检验所更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基因串联原核高效表达胸腺肽α1被引量：10
- 2007年
- 人工合成含有SD序列、胸腺肽α1(Tα1)基因、纯化标签和酶切位点的DNA序列作为构建元件,利用同尾酶将其依次克隆到pET-32a(+)中,得到含有1～8个不同重复数目的含SD序列基因的串联表达载体,利用PCR初步鉴定和进一步的测序证实序列完全正确。进而利用lacZ基因作为指示基因,将带有SD序列的lacZ基因克隆到不同Tα1基因串数载体末尾,利用蓝白斑实验验证启动子后不同SD序列的效率,证实串联载体中的各个SD序列均能有效启动翻译。在此基础上对各串表达载体进行摇瓶发酵,SDS-PAGE电泳检测证实各串均可正确表达Tα1,且为可溶性表达,为小肽原核高效表达提出了新方法,有望成为小肽高效表达的新途径。
- 金明飞徐伟东黄静金丽王嘉叶海峰吴自荣
- 关键词：小肽胸腺肽Α1
